SN 0206-1993 出口活鳗鱼中喹酸残留量检验方法.pdf

SI中华人民共和国进出口商品检验行业标准s N 0 2 0 6 一 9 3出口活鳗鱼中0.Cr 喳酸残留量检验方法Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f o x o l i n i ca c i d r e s i d u e s i n l i v e e e l f o r e x p o r t1 9 9 3 一 0 6 一 0 4 发布1 9 9 3 一 0 8 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布中华人民共和国进出口商品检验行业标准出 口活鳗鱼中o f 喳酸残留量检验方法s N 0 2Co一 9 3M e t h o d f o r d e t e r m i n a t i o n o f o x o l i n i ca c i d r e s i d u e s i n l i v e e e l f o r e x p o r t主题内容与适用范围本标准规定了出口活鳗鱼中嗯哇酸残留量检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。术标准适用于出口活鳗鱼中嗯哇酸浅留量的检验。2 抽样与制样2 门检验批和抽样数量 按出口 活鳗鱼同一养殖池塘、同一 规格鳗鱼为一检验批 随机抽取活鳗鱼。.3 R g 作为实验室样品，标明标记并及时送实验室。2.2 试样制备 送实验室待测活鳗鱼，将其窒息后，开膛，去除内脏，用捣肉机捣碎成浆状，然后按四分法分样 均分成两份，装入洁净容器内，作为试样。密封，并标明标记2.3 试祥的保存 将试样于一1 8 C 冷冻保存。注:在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化.测定方法3.1 方法提要 样品经捣碎后，用二氯甲烷提取，除去溶剂后，残渣用稀盐酸溶液和正己烷处理以去除脂肪，然后用二氯甲烷萃取。在减压下除去提取液中有机试剂，然后在重氮甲烷一 乙醚溶液中甲基化，吹干，残留物溶于甲醉水溶液中，用液相色谱仪进行测定。3.2 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，能蒸溜者须经重蒸馏;水指蒸馏水h相适应的去离子水3.2.1 乙醚3.2.2 二撅甲烷。3.2.3正己烷。3.2.4 甲醉3.2.5 无水硫酸钠3.2.6 盐酸溶液:1 m o t,t3.2.7 海砂:分析用3-2.8 重氮甲烷溶液配制:将装有氢氧化钾水溶液(浓度。.6 g/mL)1 0 m L、乙醇 3 5 m L及乙醚 1 0 ml-的混合液的双口蒸馏瓶.祝于有磁力搅拌器加热板上的水浴中，水温7 0 C。将搅拌子放入瓶中.接上滴液漏斗和高效冷凝器，中华人民共和国国家进出口商品检验局1 9 9 3-0 6-0 4 批准1 9 9 3-0 8-0 1 实施 1S N 02 06一 93冷凝器后串连两个1 2 5 mL的烧瓶。在二个烧瓶中各放 1 0 mL乙醚，出口管均应插到乙醚液面以下。在冰水浴中冷却这两个 接收瓶。边用磁力搅拌器搅拌，边通过滴液漏斗滴加盛有2 1.5 g N 一 甲 基-N-亚硝基-P 一 甲茉磺酞胺溶解于1 4 0 m L乙醚的溶液。滴完全部溶液的时间控制在2 0 mi n 以上。当蒸馏液近于无色时，停止蒸馏 将两个接收瓶中的液体合并，在7 0水浴上再蒸馏，其蒸馏液作为重氮甲烷溶液，此溶液应密I*_ 于冰箱中保存，保存期为一个月。3,2.9 P f I 4 x 标准品:纯度9 9%.3.2 1 0 嗯唆玻标准溶液:准确称取 1 0.0 m g嗯嚓酸标准品溶于丙酮中，并在 1 0 0 mL容量瓶中稀释至刻度。准确吸取该溶液1 0 m L，用 丙酮配成1.。b e g/m l 的晤哇酸标准工作液。33汉器不 t i 设备3.3.1 玻#t tt 滤器3.3.L 砂芯潇斗，2 号或 3 号。33.3 均质器或研钵。3.3-4 旋转戈发器I3弓 K相色C仪并配备紫外检测器。13.6 微4 注射器:1 0 JA，或5 0 1,L,3.4 刚定步骤3.4.1 提取和净化 称取经捣碎成浆的试样约5.0 g(精确至。，工 g)于研钵中 加入少量无水硫酸钠及海砂 经仔细研磨后用 BC,r i L=:A甲烷分数次研磨并将试样溶液通过砂芯漏牛过滤。收集滤液于鸡心瓶中，S L 旋转蒸发器上浓缩.扮后用氮气流吹至千。在残留物中加入 3 0 m L 1 m 0 1/L盐酸溶液，摇匀后，分二次.每次加入2 0 m?-正已烷，振摇 5 m i n.分层后弃除正己烷层。下层酸性溶液，侮次用 3 0 m，二氯M烷获取二次。萃取渗过无水硫酸钠柱脱水，二氯甲烷萃取液经旋转蒸发器浓缩后，继用氮气流吹至溶剂完全蒸发除去为少3车2 甲基氮化 残渣用)m L甲醇水(7:3)溶解。加入3 m L重氮甲烷溶液，轻轻摇混后，在室温下反应1h。反应完 毕 后 在 减 压 下 蒸 干 溶 液，再 用1.0 m L 甲 醇 本(7 3)溶 解 残 渣。此 溶 液 供 液 相 色 谱 仪 测 定。3.4.3 测定3.4.3.1 色语条件 a.色谱柱:内径4.6 m m、长2 5 c。不锈钢柱;b.固定相:Y WG-G1 8.粒度 5 p m;流动相:甲醇:水=7:VV/1 1);C检测器波长;2 5 4 n m 温度:室J y l3.4 1 2 色，弩 测定 分别将公体积标准工作液、样液注入液相色谱仪，测量其峰面积(或峰In:)J.AT3.4.式中生自坛验仁 加试样夕 均按上述测定步骤进行结.t 计算扣表述按下式计炸试祥中吧岭酸的含f x cA二 二A,c试洋中惩 唆酸含量,t u g/k g;样液中 告 唆酸色谱峰面积(或峰高)、m m(或mm);丫八s N 0 2 0 6 一9 3 A,一 一 标准工作溶液中嗯哇酸色谱峰面积 或峰高),m m(或mm);标准工作溶液中唔哇酸的浓度，K g/m L;c最终样液所代表试样的浓度，g/m L,注:计算结果须将空白值扣除.测定低限、回收率 测定低限本方法的测定低 限为。0 4 m g/k g,回收率回收率的实验数据:唔哇酸的浓度在0.0 4 0.4 0 m g/k g 范围内，回收率为9 2.0%-9 6.0%.附加说明:本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。本标准由中华人民共和国上海进出口商品检验局负责起草。本标准主要起草人陈志诚、黄伟坤。主要参考文献 T h e I n s p e c t i o n Me t h o d o f R e s i d u e s i n L i v e s t o c k a n d A q u a l i c A n i m a l F o o d s,J a p a n,V o l,(Ma r c h,1 9 8 2).P r o f e s s i o n a l S t a n d a r d o f t h e P e o p l e s R e p u b l i c o f C h i n a f o r I m p o r t a n d E x p o r t C o m mo d i t y I n s p e c t i o ns N 0 206 一 93M e t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f o x o l i n i c a c i d r e s i d u e s i n l i v e e e l f o r e x p o r t1 S c o p e a n d f i e l d o f a p p l i c a t i o n T h i s s t a n d a r d s p e c i f i e s t h e me t h o d s o f s a mp l i n g,s a m p l e p r e p a r a t i o n a n d d e t e r mi n a t i o n b y l iq u i dc h r o m a t o g r a p h y o f o x o l i n i c a c id r e s i d u e s i n l i v e e e l f o r e x p o r t.T h i s.s t a n d a r d i s a p p l i c a b l e t o t h e d e t e r mi n a t i o n o f o x o l i n i c a c i d r e s i d u e c o n t e n t i n l i v e e e l f o r e x-p or t.2 S a mp l i n g a n d s a mp l e p r e p a r a t i o n2.1 I n s p e c t io n l o t a n d q u a n t i t y o f t h e s a mp l e t a k e n A n i n s p e c t i o n l o t o f l i c e e e l f o r e x p o r t s h a l l b e o f t h e s a m e s p e c i f ic a t i o n a n d b r e d i n t h e s a mep o n d.T a k e a t r a n d o m 0.5 k g f r o m e a c h l o t a s t h e t e s t s a m p l e,l a b e l a n d s e n d t o t h e l a b o r a t o r y i n t i me.2.2 P r e p a r a t i o n o f t e s t s a m p l e S l a s h a n d e v i s c e r a t e t h e e e l s a f t e r h a v in g e x p i r e d,g r i n d t h e s a mp l e i n a mi n c e r t o m i n c e,t h e n r e-d u c e b y q u a r t e r i n g a n d d i v id e d i n t o t w o e q u a l p o r t io n s.E a c h p o r t i o n is p l a c e d i n a c l e a n c o n t a i n e r a st e s t s a mp l e,w h i c h i s s e a l e d a n d l a b e l e d.2.3 S t o r a g e o f s a mp l e T h e t e s t s a mp l e s s h o u l d b e s t o r e d u n d e r一1 8U。:V o t e:I n t h e c o u r s e o f s a m p l i n g a n d s a m p l e p r e p a r a t io n,p r e c a u t i o n mu s t b e t a k e n t o a v o id c o n t a mi n a t io n o r a n y fa c t o r s w h i c h m a y c a u s e t h e c h a n g e o f t h e r e s i d u e c o n t e n t.3 Me t h o d o f d e t e r mi n a t i o n3.1 P r in c i p l e T h e o x o l i n i c a c id r e s i d u e s i n e e l i s e x t r a c t e d w i t h me t h y l e n e c h l o