GBT 14926.2-2001 实验动物 单核细胞增生性李斯特杆菌检测方法.pdf

I C S 6 5.0 2 0.3 0B 4 4臀鹭中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6.1 一1 4 9 2 6.6-2 0 0 1.8-1 4 9 2 6-1 7-2 0 0 1.4 1-2 0 0 1.4 4 一 1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 1实验动物微生物学检测方法(2)L a b o r a t o r y a n i m a l-Mi c r o b i o l o g i c a l e x a m i n a t i o n m e t h o d s2 0 0 1 一 0 8 一 2 9 发布2 0 0 2 一 0 5 一 0 1 实施中华人民共和国国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局发 布食品伙伴网http:/ 11n几八八八乃八JA占八峪叹UL门:Jhh户匕门了月了口U只QG B/T 1 4 9 2 6.1-2 0 0 1 实验动物沙门菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.2-2 0 0 1 实验动物单核细胞增生性李斯特杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.3-2 0 0 1 实验动物 耶尔 森菌检 测方法G B/T 1 4 9 2 6.4-2 0 0 1 实验动物皮肤病原真菌检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.5-2 0 0 1 实验动物多杀巴斯德杆菌检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.6-2 0 0 1 实验动物支气管鲍特杆菌检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.8-2 0 0 1 实验动物支原体检测方法 。GB/T 1 4 9 2 6.9-2 0 0 1 实验动物鼠棒状杆菌检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.1 0-2 0 0 1 实验动物泰泽病原体检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 1-2 0 0 1 实验动物大肠埃希菌。1 1 5 a,c:K(B)检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.1 2-2 0 0 1 实验动物 嗜肺巴斯德杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 3-2 0 0 1 实验动物肺炎克雷伯杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 4-2 0 0 1 实 验动物 金黄色葡萄球菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 5-2 0 0 1 实 验动物 肺炎链球菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 6-2 0 0 1 实验动物乙型溶血性链球菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 7-2 0 0 1 实验动物绿脓杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 1-2 0 0 1 实验动物无菌动物生活环境及粪便标本的检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 4-2 0 0 1 实验动物念珠状链杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 5-2 0 0 1 实验动物布鲁杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 6-2 0 0 1 实验动物钩端螺旋体检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 7-2 0 0 1 实验动物志贺菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 8-2 0 0 1 实验动物结核分枝杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 1 实验动物空肠弯曲杆菌检测方法食品伙伴网http:/ B/T 1 4 9 2 6.2-2 0 0 1前言 本 标准是对G B/T 1 4 9 2 6.2-1 9 9 4(实验动物 单核 细胞增多性李氏杆菌检验方法 的修订 本标准删除了原标准中“3.3 C R T液体培养基，3.7氧化酶试剂，3.8 半固体琼脂，3.1 0李氏营养琼脂，5.6生化试验中李斯特氏菌属鉴别特征”的有关内容。增加了几种培养基以及两次增菌培养等相关内容。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:范薇。本标准于 1 9 9 4 年 1 月首次发布。食品伙伴网http:/ 华 人 民 共 和 国 国 家 标准实验动物单核细胞增生性李斯特 杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.2-2 0 0 1代 替 G B/T 1 4 9 2 6.2-1 9 9 4L a b o r a t o r y a n i ma l-Me t h o d f o r e x a mi n a t i o n o fL i s t e r i a mo n o c y t o g e n e s范 围本标准规定一r 实验动物单核细胞增生性李斯特杆菌的检测方法。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔单核细胞增生性李斯特杆菌的检测。引用标准 下列标准所包含的条文.通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。G B/T 1 4 9 2 6.4 2-2 0 0 1 实验动物细菌学检测标本采集 G B/T 1 4 9 2 6.4 3-2 0 0 1 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3 原 理单核细胞增生性李斯特杆菌在培养基上有特定的生长、形态和生理生化特征。4主要设备和材料:.:2 5 C普通恒温培养箱。3 0 普通恒温培养箱。3 7 C普通恒温培养箱。生物显微镜。实体显微镜。妇4243培养基及试剂5川5253别55内曰7lQU :只JCJ反5.9血琼脂平皿。L B增菌液(L B,、,B).改良Me B r i d e(MMA)琼脂。S I M动力培养基三糖铁琼脂。克氏双糖铁琼脂。糖发酵培养基尿素琼脂硝酸盐还 原试验培养基中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2 0 0 1 一 0 8-2 9 批准2 0 0 2一 0 5一 0 1实施食品伙伴网http:/ 1 4 9 2 6.2-2 0 0 15.1 0 缓冲葡萄糖蛋白陈水(MR和V-P试验用)。5.1 1七叶昔培养基。5.1 2革兰染色液。6 检测程序7 操作 步骤7 门采样 采取气管分泌物、盲肠内容物或病变组织了.2 分离培养7.2.1 气管分泌物或病变组织接种血琼脂平皿，置(3 6 士1)C培养2 4-4 8 h,7.2.2 将回盲部内容物以1:1 0的比例接种于 L B、增菌液。I-B，增菌液置 3 0 培养 1 8 2 4 h后再接种L B:增菌液于 3 0 C,培养 1 8.2 4 h进行二次增菌。取 L B:增菌液一环接种MMA琼脂平皿，置(3 0 士1)C培养 4 8 h o7.3 鉴定7.3.1 菌落特征 血平皿形成圆形、光滑湿润，直径 1 -2 m m并有狭窄透明俘 溶血环的小菌落;在 MMA琼脂平皿上形成的菌落用斜射光镜检查呈现灰蓝色或蓝色，圆形稍凸起，边缘整齐的小菌落。食品伙伴网http:/ 1 4 9 2 6.2-2 0 0 17.3.2 斜射光镜检查 使光源呈 4 5 度角照射到平面镜反射为解剖镜光源。平皿置载物台上，通过目镜观察。7.3.3 菌体特征 革兰阳性小杆菌，大小(0.4 0.5)ta mX(0.5 -2.0)p m，通常成双排列，偶可见双球状，病变组织触片，有时可见有弧形，单个排列，V”形排列，两端浓染。7.3.4 三糖铁琼脂培养基，(3 0 士1)C 培养 1 8 2 4 h的反应为:斜面产酸，底层产酸，硫化氢阴性。7.3.5 S I M 培养基，(2 5 士1)培养 2-5 d，有动力，呈伞状或月牙状生长。7.3.6 生化反应:本菌生化反应特征见表 1.表 1 产单核细胞李斯特杆菌生化反应特征菌种硝酸盐甘露醉鼠李糖木糖MR V P尿素七叶昔产单核细胞李斯特杆菌一一+一+一+:阳性;一:阴性结果报告凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。食品伙伴网http:/