DB51T 1365-2011 黄瓜抗白粉病性田间鉴定技术规程.doc

ICS65.020.20 B16 备案号：32709-2012 DB51 四川省地方标准 DB 51/ T1365—2011 黄瓜抗白粉病性田间鉴定技术规程 2011 - 12 - 28发布 2012 - 03 - 01实施 四川省质量技术监督局发布 DB51/ T1365—2011 目次 前言 II 1　范围 1 2　规范性引用文件 1 3　术语和定义 1 4　用具和试剂 2 5　栽培技术及田间管理 2 6　接种体制备 3 7　抗性鉴定方法 3 8　记载、鉴定评价表格 5 附录A（资料性附录）　黄瓜白粉病菌基本信息 6 附录B（资料性附录）　黄瓜白粉病调查及病情指数计算方法 7 附录C（资料性附录）　黄瓜抗白粉病性田间鉴定原始数据记载表 8 附录D（资料性附录）　黄瓜抗白粉性鉴定评价表 9 前言 本标准的附录A、附录B、附录C、附录D、附录E为资料性附录。 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准起草单位：四川省农业科学院植物保护研究所。 本标准主要起草人：席亚东、向运佳、刘波微、彭化贤。 9 黄瓜抗白粉病性田间鉴定技术规程 1　 范围 本标准规定了黄瓜抗白粉病性田间鉴定方法和抗性评价标准。 本标准适用于四川省黄瓜品种和黄瓜材料对白粉病的田间抗性鉴定及评价。 2　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 ISBN/S1676 农作物抗病虫性鉴定方法 NY/T 1875.2 黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程 GB 8079 蔬菜种子 3　 术语和定义 3.1　 抗病性鉴定 Identification of disease resistance 通过适宜的技术方法鉴定植物对病害的抵抗水平。 3.2　 田间鉴定 Field identification 参鉴品种（材料）种植在病区试验地，对各个参试品种（材料）病害发病程度进行调查，经结果分析确定各个黄瓜品种（材料）的抗性水平。 3.3　 抗性评价 Evaluation of disease resistance 根据采用的适宜技术标准判别黄瓜对白粉病菌反应程度和抵抗水平的定性描述。 3.4　 对照品种 Control variety 选择抗性水平较稳定的高抗品种（津研四号）和感病品种（二早子）作为抗感性鉴定试验的对照品种。 3.5　 诱发品种 Induce variety 在参鉴品种（材料）之间种植的高感品种（白丝条、大白黄瓜或二早子）。 4　 用具和试剂 4.1　 用具 量杯、量桶、玻棒、塑料薄膜、毛刷、血球计数板、小型手持喷雾器、光照培养箱、恒温生物培养箱、倒置显微镜。 4.2　 试剂 福尔马林溶液(38％HCHO)、50％多菌灵WP、50%福美双WP、0.1%升汞、75%酒精、吐温20（tween20）、甘露糖醇、蔗糖、琼脂、蒸馏水。 4.3　 培养基 甘露糖醇-蔗糖培养基：甘露糖醇(0.1 mol/L)、蔗糖(0.02 mol/L)和琼脂(8g/L)。 5　 栽培技术及田间管理 5.1　 栽培技术要点 5.1.1　 种子 5.1.1.1　 种子质量 应达到GB8079规定的要求。 5.1.1.2　 种子消毒 药剂浸种：用50%多菌灵WP500倍液浸种1h，或用福尔马林300倍液浸种1.5h，捞出洗净备用。 温汤浸种：将种子用55℃的温水浸种20min，用清水冲净后晒干备用。 5.1.1.3　 种子催芽 消毒后的种子于25℃～30℃左右的水温中浸泡4h～6h后捞出洗净，置于25℃～30℃催芽20h。 5.1.2　 营养土配方及消毒处理 5.1.2.1　 育苗营养土配方 用近3年未种植过瓜类的肥沃无病表土，掺入30%充分腐熟的粪肥，充分混匀。 5.1.2.2　 营养土的消毒处理 福尔马林消毒法：按每立方米用福尔马林溶液(38％甲醛)50倍～100倍液200ml～250ml，喷洒营养土，用塑料膜密闭营养土3d～5d后，晾晒10d～15d待气体散尽后使用。 多菌灵与福美双混合剂法：用8g～15g 50%多菌灵WP与50%福美双WP混合（按1：1混合），与15kg～30kg细土混合均匀使用。 5.1.3　 播种时期 鉴定黄瓜品种（材料）应在每年3月初进行播种育苗。 5.1.4　 播种或育苗移栽 5.1.4.1　 直播法 直播前浇足底水，在黄瓜穴中直接播种，每穴种植2粒种子，覆盖约0.2cm厚的消毒营养土。 5.1.4.2　 育苗移栽 移栽前浇足底水；育苗移栽是在营养杯（8cm×8cm）或者营养盘中（50孔）播种，当黄瓜长到3片真叶时移栽到田间定植，然后加消毒土覆盖。 5.2　 田间管理 按常规田间管理水肥等。整个生长期内不应使用任何防治黄瓜霜霉病的药剂。 6　 接种体制备 6.1　 病原物采集 采集无其它病斑带有新鲜孢子堆的病叶，装入袋内封口，注明来源地、采集日期后用于当天接种或用于繁殖保存。 6.2　 接种体制备与保存 6.2.1　 接种体制备 接种前用干净毛刷刷取叶片上长出的新鲜孢子于无菌水中，按吐温与无菌水的体积比为0.01‰的标准加入吐温20，搅拌均匀后即得分生孢子悬浮液，用血球计数板计数分生孢子数稀释至约1×105分生孢子/mL。白粉病菌分生孢子悬浮液从制备到接种应限制在3h以内。 6.2.2　 病原物保存 活体植株保存法：用喷雾法接种处于3~4叶期的感病黄瓜品种幼苗，接种后将其置于白天温度26℃、夜晚20℃，12h光周期的培养箱内或温室内培养。 离体叶片保存法：将感病品种的子叶消毒（子叶消毒法：用0.05%的升汞溶液浸泡3min，然后用无菌水冲洗2~3次，用消毒过的滤纸吸干水珠）后置于甘露糖醇-蔗糖培养基上，挑取白粉病菌的分生孢子置于该叶片上，在17℃有微光的培养室内培养。 7　 抗性鉴定方法 7.1　 病圃设置 按ISBN/S1676农作物抗病鉴定方法的原则进行病圃设置，病圃应设在常年黄瓜白粉病发生区。 7.2　 品种排布及田间设计 参鉴品种（材料）与对照品种一起编号，每品种重复3次，随机区组排列，每重复种植20株参鉴品种和4株诱发品种。采用高畦种植模式（箱面宽80cm，沟宽50cm，畦高约15cm），每畦栽两行，每单行种植10穴参鉴品种和2穴诱发品种黄瓜，每穴1株，每重复按诱发品种种植于鉴定品种之后的顺序排列。 7.3　 接种 7.3.1　 人工接种 7.3.1.1　 接种时期及时间 接种期为初花期；接种时间为下午7点以后。 7.3.1.2　 接种方法 接种采用喷雾接种法。用小型手持喷雾器将分生孢子悬浮液均匀喷于诱发品种叶片的正、反两面直至有水滴流出为止。接种后使田间小气候相对湿度达到70%以上。 7.3.2　 自然诱发 若每重复的诱发品种在初花期前发病均匀、充分（发病率为100%，病情指数为30以上），可以不接种而采取自然发病。 7.4　 病情调查 7.4.1　 调查次数和时间 调查一次。自然发病或者接种诱发品种，待感病对照品种充分发病后，在结瓜初期进行病情调查。 7.4.2　 调查方法及数据处理 按附录A描述的黄瓜白粉病症状逐品种（材料）进行调查。调查时，每小区（每重复）调查10株～14株，每株调查全部叶片。记载总叶片、各叶片病级，根据各品种叶片病级数计算各品种的病情指数（DI）和平均病情指数，再根据校正系数K计算相对平均病情指数。叶片病级划分标准依据附录B进行。 7.4.3　 计算 病情指数=［Σ（各级病叶数×相应级别）÷（调查总叶数×发病最高级别代表值）］×100 平均病情指数=Σ（每重复病情指数）÷重复数 校正系数（K）=36.5／感病对照品种的实际病情指数 相对平均病情指数=K×鉴定品种的平均病情指数 7.5　 抗病性评价 7.5.1　 鉴定有效性判别 当感病对照品种的平均病情指数≥35.0，抗病对照品种的平均病情指数≤20,该批次抗白粉病性鉴定视为有效。 7.5.2　 评价依据 以参鉴黄瓜品种（材料）的相对平均病情指数作为抗性划分依据。 7.5.3　 抗性评价 依据鉴定品种（材料）的相对平均病情指数确定其对白粉病的抗性水平，划分标准见表1. 表1　 黄瓜品种（材料）抗白粉病性评价分级标准 相对平均病情指数（X） 抗性评价 0.00≤X≤6.50 高抗（HR） 6.50＜X≤15.00 抗病（R） 15.00＜X≤20.00 中抗（MR） 20.00＜X≤35.00 中感（MS） 35.00＜X≤50.00 感病（S） X＞50.00 高感（HS） 8　 记载、鉴定评价表格 黄瓜抗白粉病性鉴定原始数据记载表格见附录C，抗病性评价表格见附录D。 A A 附　录　A （资料性附录） 黄瓜白粉病菌基本信息 A.1　 黄瓜白粉病菌侵染植株症状 黄瓜白粉病属于真菌性病害，自苗期至收获期均可发生，而以结瓜期发病最盛。主要危害叶片，偶尔侵害叶柄或茎蔓，瓜条一般不受害。 发病初期，叶片正面或背面产生白色近圆形小粉斑，以后逐渐扩大成边缘不明显的大片白粉斑（菌丝体、分生孢子梗及分生孢子）。抹去白粉层，可见叶片变黄枯、变脆，一般不落叶。严重时，病斑扩大、连片布满整个叶片，粉状物由白色渐变成灰白色乃至灰褐色，后期病斑上长出成堆或散生的黄褐色转黑褐色的小粒点（白粉病菌闭囊壳）。 叶柄和茎蔓上症状与叶片相似。 黄瓜白粉病病原菌描述：黄瓜白粉病的病原菌有性态为单囊壳菌[Sphaerotheca fuliginea (Schlecht.)Poll.]和二孢白粉菌[Erysiphe cichoracearum DC.]，分别为子囊菌亚门单丝壳属和白粉菌属。两菌在各地均有分布，以前者较为普遍。二菌的无性态均为无性孢子类粉孢属。 A.2　 黄瓜白粉病菌危害叶片及分生孢子显微图片 图A.1　 黄瓜白粉病菌为害叶片症状 黄瓜白粉病菌分生孢子显微照片 A.2.2 黄瓜白粉病菌分生孢子显微照片 B B 附　录　B （资料性附录） 黄瓜白粉病调查及病情指数计算方法 B.1　 黄瓜白粉病叶片病情严重度调查分级标准 每片叶按病斑占叶面积的百分率分级记录。 0级：无病斑； 1级：病斑面积占整个叶面积的1/16以下； 3级：病斑面积占整个叶面积的1/16～1/8； 5级：病斑面积占整个叶面积的1/8～1/4； 7级：病斑面积占整个叶面积的1/4～1/2； 9级：病斑面积占整个叶面积的1/2以上。 C C 附　录　C （资料性附录） 黄瓜抗白粉病性田间鉴定原始数据记载表 C.1　 黄瓜品种（材料）抗白粉病性田间鉴定原始数据记载表 试验地点： 播种时间： 防治害虫药剂种类及时间： 调查日期： 调查所处生育期： 调查人： 记 载 人： 品种编号 重复 株数 总叶片 病情分级 病情指数 平均病情指数 0 1 3 5 7 9 I 第1株 第2株