65.020.30B47DB51四川省地方标准DB51/T1207—2011桑蚕血液型脓病诊断技术规程2011-01-25发布2011-03-01实施四川省质量技术监督局发布DB51/T1207—2011前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由四川省农业厅提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局发布。本标准起草单位：四川省蚕业管理总站、四川省农科院生物技术核技术研究所。本标准主要起草人：马露芸、吴钢、蔡平钟、朱洪顺、谢忠良、张学清。IDB51/T1207—2011桑蚕血液型脓病诊断技术规程1范围本标准规定了四川省桑蚕血液型脓病诊断的技术要求。本标准适用于四川省桑蚕血液型脓病的诊断。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1核型多角体nuclearpolyhedralbody在桑蚕血细胞和体腔内各种组织感染细胞的细胞核中产生的包含和保护病毒粒子的一种蛋白质结晶体，多呈比较整齐的六角形。3.2质型多角体cytoplasmicpolyhedralbody在桑蚕中肠感染细胞的细胞质中产生的包含和保护病毒粒子的一种蛋白质结晶体，多为六角形，或有四角形，偶有三角形。3.3血液型脓病(核型多角体病)nuclearpolyhedrosis病毒寄生在桑蚕血细胞和体腔内各种组织细胞，使其血液浑浊呈乳白的蚕病；并在细胞核中形成多角体，又称核型多角体病。4试剂4.1焦宁—甲基绿染液A液：焦宁[w(C17H19ClN2O)=5％]15.5mL甲基绿[w(C27H35Cl2N3.ZnCl2)=2％]10mL1DB51/T1207—2011无菌水250mLB液：醋酸缓冲液pH4.8使用前将A、B两液等体积混合。4.2苏丹Ⅲ染色剂0.5g苏丹Ⅲ溶于100mL95%乙醇中，过滤后，加入少许甘油。4.3氢氧化钾溶液[w(KOH)=2％]。4.4盐酸溶液[c(HCl)=1mol/L]。4.5化学纯乙醇（C2H5OH）。4.6化学纯乙醚（C4H10O）。4.7分析用水按GB/T6682规定执行。5仪器、设备5.1普通光学显微镜、相差显微镜，放大倍数15×40倍或16×40倍；恒温培养箱（5℃～65℃）、冰箱；天平（感量0.1g）。5.2载玻片、盖玻片；乳钵、乳棒；解剖剪、镊子、吸管；量筒、烧杯；样品袋、冻存管（1.8mL、5mL）。6诊断6.1肉眼诊断6.1.1外观观察肉眼观察蚕在不同发育阶段是否具有下列症状。a)不眠蚕：发生于各龄眠期。体色乳白，体躯肿胀，狂躁爬行，体壁发亮，皮破流脓。b)起节蚕：发生于各龄眠起时。生长停滞，体色乳白；体壁松弛，体躯缩小...
