20040521_zbx66040-87.pdf

中华人民共和国专业标准中华人民共和国专业标准 还还 原原 糖糖 测测 定定 法法 ZB X 6604087 Determination of reduced sugar 本方法适用于酿造酱油半成品的还原糖测定。本方法适用于酿造酱油半成品的还原糖测定。1 亚铁氰化钾快速法亚铁氰化钾快速法 1.1 试剂与溶液试剂与溶液 1.1.1 费林氏甲液费林氏甲液 称取分析纯硫酸铜称取分析纯硫酸铜(CuSO45H2O)15g 及四甲基蓝及四甲基蓝(次甲基蓝次甲基蓝)0.05g,用蒸馏水溶解用蒸馏水溶解,淀容至淀容至 1000mL。1.1.2 费林氏乙液费林氏乙液 称取分析纯酒石酸钾钠称取分析纯酒石酸钾钠 50g,分析纯氢氧化钠分析纯氢氧化钠 54g 及分析纯亚铁氰化钾及分析纯亚铁氰化钾 4g,用蒸馏水溶用蒸馏水溶 解解,定容至定容至 1000mL。1.1.3 0.1%葡萄糖标准溶液葡萄糖标准溶液 精确称取在精确称取在 105烘烘 23h 至恒重的分析纯无水葡萄糖至恒重的分析纯无水葡萄糖 1.000g,放入放入 100mL 烧杯中烧杯中,用用 蒸馏水溶解蒸馏水溶解,定容至定容至 1000mL,为防染菌为防染菌,可加可加 5mL 浓盐酸后再定容。浓盐酸后再定容。1.2 测定方法测定方法 1.2.1 样品处理及吸取样品处理及吸取 精确吸取样品精确吸取样品 10mL,用蒸馏水稀释定容至用蒸馏水稀释定容至 100mL,摇匀吸取稀释液摇匀吸取稀释液 1mL 进行测定。稀释进行测定。稀释 度及吸取量根据含糖量可予增减。度及吸取量根据含糖量可予增减。1.2.2 空白滴定空白滴定 精确吸取费林甲、乙液各精确吸取费林甲、乙液各 5mL 放入放入 150mL 锥形瓶中锥形瓶中,加蒸馏水加蒸馏水 10mL。再用滴定管加入。再用滴定管加入 0.1%葡萄糖标准液葡萄糖标准液 9mL。摇匀在电炉。摇匀在电炉(或煤气灯或煤气灯)上加热上加热,使其在使其在 2min 内沸腾内沸腾,沸腾沸腾 30s 后后,匀速滴入匀速滴入 0.1%葡萄糖标准液至蓝色消失即为终点。记录沸腾前后共耗用葡萄糖液毫升数葡萄糖标准液至蓝色消失即为终点。记录沸腾前后共耗用葡萄糖液毫升数(A)。1.2.3 预备滴定预备滴定 精确吸取费林甲、乙液各精确吸取费林甲、乙液各 5mL,放入放入 150mL 锥形瓶中锥形瓶中,加蒸馏水加蒸馏水 10mL,再加再加 1mL10%样品样品 稀释液。根据样品含糖量的高低稀释液。根据样品含糖量的高低(估计数估计数),可用糖液滴定管先加入一定量的可用糖液滴定管先加入一定量的 0.1%葡萄糖葡萄糖 液液(空白滴定耗用葡萄糖液一般在空白滴定耗用葡萄糖液一般在 10mL 以上以上),摇匀加热摇匀加热,沸腾沸腾 30S 后后,匀速滴入匀速滴入 0.1%葡萄糖葡萄糖 液液,至蓝色消失即为终点至蓝色消失即为终点,记下沸腾前后共耗用记下沸腾前后共耗用 0.1%葡萄糖标准液毫升数葡萄糖标准液毫升数,作正式滴定时作正式滴定时 参考用。参考用。1.2.4 正式滴定正式滴定 精确吸取费林甲、乙液各精确吸取费林甲、乙液各 5mL,放入放入 150mL 锥形瓶内锥形瓶内,加蒸馏水加蒸馏水 10mL 及及 1mL10%样品稀样品稀 释液释液,再用糖液滴定管加入比预备滴定耗用量少再用糖液滴定管加入比预备滴定耗用量少 0.5mL 左右的左右的 0.1%葡萄糖标准液葡萄糖标准液,摇匀后摇匀后 加热加热,使其在使其在 12min 内沸腾内沸腾,沸腾沸腾 30S 后匀速滴入后匀速滴入 0.1%葡萄糖标准液至蓝色消失即为终葡萄糖标准液至蓝色消失即为终 点点,记下沸腾前后共耗用记下沸腾前后共耗用 0.1%葡萄糖标准液的毫升数葡萄糖标准液的毫升数(B)。做平行测定做平行测定,两次相差不得超过两次相差不得超过 0.1mL。1.3 计算计算 (A-B)C 还原糖还原糖(以葡萄糖计以葡萄糖计,g/100mL 或或 g)100(1)W 式中式中:A空白滴定耗用空白滴定耗用 0.1%葡萄糖标准液数葡萄糖标准液数,mL;B正式滴定耗用正式滴定耗用 0.1%葡萄糖标准液数葡萄糖标准液数,mL;C1mL0.1%葡萄糖标准液含葡萄量葡萄糖标准液含葡萄量(即即 0.001g);W吸取样液相当样品量吸取样液相当样品量,mL 或或 g。1.4 注意事项注意事项 1.4.1 每批试样测试前必须做空白滴定每批试样测试前必须做空白滴定,二次平行测定误差不得超过二次平行测定误差不得超过 0.1mL。1.4.2 空白滴定、预备滴定及正式滴定操作条件应保持一致。滴定速度应以每秒空白滴定、预备滴定及正式滴定操作条件应保持一致。滴定速度应以每秒 12 滴为宜。热源要稳定滴为宜。热源要稳定,在正式滴定时在正式滴定时,待试样沸腾后待试样沸腾后,标准糖液的滴定量必须控制在标准糖液的滴定量必须控制在 0.5 1mL 之内之内,否则要重做。整个滴定过程必须始终保持沸腾状态。否则要重做。整个滴定过程必须始终保持沸腾状态。1.4.3 凡样品含糖量在凡样品含糖量在 6%以上时以上时,应适当增加稀释倍数应适当增加稀释倍数,否则会加大误差。否则会加大误差。1.4.4 酿造酱油在制品常含有非糖还原物质酿造酱油在制品常含有非糖还原物质,所以本法测定结果略为偏高。所以本法测定结果略为偏高。2 兰兰-艾农艾农(Lan-Eynon)法法 2.1 试剂与溶液试剂与溶液 2.1.1 0.5%次甲基蓝次甲基蓝 称取称取 0.50g 次甲基蓝次甲基蓝,溶于溶于 100mL 蒸馏水中。蒸馏水中。2.1.2 费林氏甲液费林氏甲液 称取分析纯硫酸铜称取分析纯硫酸铜(CuSO45H2O)69.28g,加蒸馏水溶解定容至加蒸馏水溶解定容至 1000mL。2.1.3 费林氏乙液费林氏乙液 称取分析纯酒石酸钾钠称取分析纯酒石酸钾钠 346g 及氢氧化钠及氢氧化钠 100g,加蒸馏水溶解定容至加蒸馏水溶解定容至 1000mL。标定标定:称取于称取于 105干燥干燥 23h 恒重的分析纯蒲萄糖恒重的分析纯蒲萄糖 1.000g 放入放入 100mL 烧杯中烧杯中,先以先以 少量蒸馏水溶解后少量蒸馏水溶解后,移入移入 250mL 容量瓶中容量瓶中,用蒸馏水洗净烧杯用蒸馏水洗净烧杯,洗液并入容量瓶中。待冷至洗液并入容量瓶中。待冷至 20时时,稀释至刻度稀释至刻度,摇匀后摇匀后,将此液装入滴定管中进行滴定。将此液装入滴定管中进行滴定。预备滴定预备滴定:吸取费林氏甲、乙液各吸取费林氏甲、乙液各 5mL 移入移入 150mL 锥形瓶中锥形瓶中,加入蒸馏水加入蒸馏水 30mL,摇匀、摇匀、加热、待沸腾后加热、待沸腾后,从滴定管迅速滴入上述葡萄糖液。滴定时从滴定管迅速滴入上述葡萄糖液。滴定时,保持溶液微沸状态保持溶液微沸状态,待溶液待溶液 变色时变色时,加入次甲基蓝指示剂加入次甲基蓝指示剂 2 滴滴,再继续滴入葡萄糖溶液再继续滴入葡萄糖溶液,直至蓝色完全消失为终点。记直至蓝色完全消失为终点。记 下耗用葡萄糖溶液毫升数。下耗用葡萄糖溶液毫升数。滴定滴定:吸取费林氏甲、乙液各吸取费林氏甲、乙液各 5mL 移入移入 150mL 锥形瓶中锥形瓶中,混匀混匀,加入蒸馏水加入蒸馏水 30mL,然后然后 加入比预备滴定少加入比预备滴定少 1mL 的葡萄糖溶液的葡萄糖溶液,摇匀后摇匀后,准确沸腾准确沸腾 2min,加入次甲基蓝指示剂加入次甲基蓝指示剂 2 滴滴,再匀速滴入葡萄糖液再匀速滴入葡萄糖液,滴至蓝色完全消失为终点滴至蓝色完全消失为终点,记下耗用葡萄糖溶液毫升数。记下耗用葡萄糖溶液毫升数。计算计算:gV G (2)250 式中式中:G10mL 费林氏甲、乙液相当于葡萄糖数费林氏甲、乙液相当于葡萄糖数,g;g称取葡萄糖数称取葡萄糖数,g;V滴定时耗用葡萄糖溶液数滴定时耗用葡萄糖溶液数,mL;250葡萄糖液定容体积葡萄糖液定容体积,mL。2.2 操作方法操作方法 2.2.1 预备滴定预备滴定:吸取费林氏甲、乙液各吸取费林氏甲、乙液各 5mL 移入移入 150mL 锥形瓶中锥形瓶中,加入蒸馏水加入蒸馏水 30mL,混匀混匀,加热。待沸腾后加热。待沸腾后,从滴定管迅速滴入从滴定管迅速滴入 10%样品稀释液样品稀释液,滴定时滴定时,保持溶液微沸状态保持溶液微沸状态,待待 溶液变色时溶液变色时,加入次甲基蓝指示剂加入次甲基蓝指示剂 2 滴滴,再继续滴入样品稀释液再继续滴入样品稀释液,直至蓝色完全消失为终直至蓝色完全消失为终 点。记下耗用样品稀释液毫升数。点。记下耗用样品稀释液毫升数。2.2.2 正式滴定正式滴定:吸取费林氏甲、乙液各吸取费林氏甲、乙液各 5mL 移入移入 150mL 锥形瓶中锥形瓶中,混匀混匀,加入蒸馏水加入蒸馏水 30 mL,然后加入比预备滴定少然后加入比预备滴定少 1mL 的被测样品的被测样品(10%稀释液稀释液)摇匀后摇匀后,准确沸腾准确沸腾 2min,加入次甲加入次甲 基蓝指示剂基蓝指示剂 2 滴滴,再匀速滴入再匀速滴入 10%样品稀释液样品稀释液,滴至蓝色完全消失为终点。记下耗用稀释滴至蓝色完全消失为终点。记下耗用稀释 液毫升数。液毫升数。做平行测定做平行测定,二次相差不超过二次相差不超过 0.1mL。2.3 计算计算 G 还原糖还原糖(以葡萄糖计以葡萄糖计,g/100mL 或或 g)100(3)V 10%式中式中:G10mL 费林氏甲、乙液相当于葡萄糖数费林氏甲、乙液相当于葡萄糖数,g;V滴定费林氏溶液所耗用稀释液数滴定费林氏溶液所耗用稀释液数,mL。2.4 注意事项注意事项 与本法与本法 1.4 相同。相同。附加说明附加说明:本标准由商业部副食品局提出。本标准由商业部副食品局提出。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。本标准主要起草人须凤高。中华人民共和国商业部中华人民共和国商业部 1987-11-20 批准批准 1988-07-01 实施实施