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农业部953号公告-12.1-2007
转基因植物及其产品环境安全检测
抗虫棉花
第1部分:对靶标害虫的抗虫性
农业部
农业部953号公告一12.1一2007放于2528的养虫室或培养箱中饲养。5.3.1.3.结果记录接虫后第5d检查幼虫取食状况和幼虫死亡状况。记录幼虫死亡虫数和活虫数,目测幼虫取食状况,幼虫取食状况级别按附录表A.1、A.2执行。幼虫死亡率按公式(1)计算:X=2X100(1)A式中:X一幼虫死亡率,单位为%;n一死虫数,单位为头;A接虫数,单位为头。校正死亡率按公式(2)计算:X=1之9X100(2)式中:X幼虫校正死亡率,单位为%;X1一处理死亡率,单位为%;X。一一对照死亡率,单位为%。5.3.1.4结果分析判定转基因抗虫棉的抗虫性。转基因抗虫棉抗虫性级别判定标准按附录A执行。5.3.2对靶标害虫抗性的稳定性与纯合度生物测定5.3.2.1取样方法对靶标害虫抗性的稳定性生物测定:分别于棉花生长的苗期、蕾期、花铃期从转基因抗虫品种田、对应的非转基因棉花品种田和当地主栽转基因抗虫棉品种田采集棉花的上部倒数第三片展开叶,每处理每小区随机采集20张叶片。对靶标害虫抗性的纯合度生物测定:分别于棉花生长的苗期、蕾期、花铃期从转基因抗虫品种田、对应的非转基因棉花品种田和当地主栽转基因抗虫棉品种田采集棉花的上部叶片,每处理每小区随机选择20株棉株,每株采3张叶片。5.3.2.2操作见本部分5.3.1.2。5.3.2.3结果记录接虫后第5检查幼虫死亡状况。记录幼虫死亡虫数和活虫数。幼虫死亡率和校正死亡率的计算公式同5.3.1.3中(1)和(2)。计算每处理每小区20张叶片对靶标害虫抗性的校正死亡率平均值,用于对靶标害虫抗性稳定性的统计分析。计算每处理每小区每株3张叶片对靶标害虫抗性的校正死亡率平均值,然后计算20株棉株对靶标害虫抗性的校正死亡率平均值(y)和标准差(s)。计算变异系数CV,用于对靶标害虫抗性纯合度的统计分析。变异系数按公式(3)计算:CV=(s/y)X100(3)5.3.2.4结果分析比较转基因抗虫棉苗期、蕾期和花铃期对靶标害虫抗性的校正死亡率差异,并比较转基因抗虫棉和当地主栽抗虫棉品种相同时期对靶标害虫抗性的校正死亡率差异,分析转基因抗虫棉对靶标害虫的抗