农业部953号公告-4-2007 转基因植物及其产品成分检测 耐除草剂油菜Oxy-235及其衍生品种定性PCR方法.pdf

农业部953号公告一4一2007转基因植物及其产品成分检测耐除草剂油菜Oxy-235及其衍生品种定性PCR方法1范围本标准规定了转基因耐除草剂油菜Oxy235转化体特异性定性PCR检测方法。本标准适用于转基因耐除草剂油菜Oxy235及其衍生品种，以及制品中Oxy-235的定性P检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适合于本标准。NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求NY/T673转基因植物及其产品检测抽样NY/T674转基因植物及其产品检测DNA提取和纯化3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1MGI/Y基因HMGI/Y gene编码高移动簇蛋白I/Y的基因。3.20 xy-235转化体特异性序列event-specific sequence of Oxy-235外源插人片段5端与油菜基因组的连接区序列，包括CMV35S启动子5端部分序列和油菜基因组的部分序列。4原理根据转基因耐除草剂油菜Oxy235转化体特异性序列设计特异性引物，对试样进行PR扩增。依据是否扩增获得预期331bp的特异性DNA片段，判断试样中是否含有转基因耐除草剂油菜Oxy235。5试剂和材料除非另有说明，仅使用分析纯试剂和重蒸馏水。5.1琼脂糖。5.210g/L溴化乙锭溶液：称取1.0g溴化乙锭(EB),溶于100mL水中。：.注：溴化乙锭有致癌作用，配制和使用时应戴一次性手套操作并妥善处理废液。5.310mol/L氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠(NaOH)80.0g,先用160mL水溶解后，再加水定容到200mL。1