农业部1025号公告-19-2008 动物源性食品中玉米赤霉醇类药物残留检测 液相色谱-串联质谱法.pdf

ICs67.040X00中华人民共和国国家标准农业部1025号公告一19一2008动物源性食品中玉米赤霉醇类药物残留检测液相色谱一串联质谱法Determination of zeranols residues in animal derived foodHPLC-MS/MS Method2008-04-29发布2008-04-29实施中华人民共和国农业部发布农业部1025号公告一19一20085min,弃上层正己烷。再加正己烷20mL.重复脱脂一次。下层转至100mL鸡心瓶中，50旋蒸至近干，加乙酸乙酯5mL,涡动1min,静置10s,上清液转移至50mL离心管。鸡心瓶中加正己烷10mL,涡动30s,静置10s,上清液转移至同一个离心管。再用正己烷10mL洗涤鸡心瓶一次，合并3次残余物溶解液，备用。氨基固相萃取柱上加无水硫酸钠2g,用玻璃棒敲匀。依次用乙酸乙酯和正己烷各5L活化，取备用液全部过柱，再依次用正己烷、正己烷乙酸乙酯(60十40，v/v)各5mL淋洗。依次用正己烷-乙酸乙酯(20十80，v/v)和乙酸乙酯各4mL洗脱，合并两次洗脱液，50氮气吹干。残余物中加乙睛0.5ml,涡动1min,加水0.5mL,混匀，过0.2um有机滤膜，供液相色谱串联质谱仪测定。注：固相萃取上样液流速不超过1mL/min4.4.2.2肝脏组织样品称取5g士0.02g试料于50mL离心管中，加甲醇10ml,涡动1min,4000r/min离心5min,取上清液于另一离心管中。重复提取一次，合并两次提取液。加正己烷10mL,手摇20次，4000r/mi离心5min,弃上层正己烷。下层于50氮气下吹干，加乙酸乙酯5mL,涡动1min,再加正己烷20mL,涡动30s,4000r/min离心5min,取上清液备用。氨基固相萃取柱上加无水硫酸钠2g,用玻璃棒敲匀。依次用乙酸乙酯和正己烷院各5l.活化，取备用液全部过柱，再依次用正己烷、正己烷-乙酸乙酯(45+55，v/v)各5mL淋洗。依次用正己烷-乙酸乙酯(20十80，v/v)和2%甲醇-乙酸乙酯各5mL洗脱，合并两次洗脱液，50氮气吹干。残余物中加乙青0.5mL,涡动1min,加水0.5mL,混匀，加正己烷2mL,涡动30s,9000r/min离心5min,取下层清液，过0.2am有机滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。注：固相萃取上样液流速不超过1ml/min。4.4.2.3牛奶样品量取5.0ml试料于50mL离心管中，加18%的硫酸溶液0.1mL,涡匀，静置10min,加正己烷10mL和乙睛20mL.3000r/min振荡10min,4000r/min离心10min,弃正己烷层。取提取液12.5mL于离心管中，50下氮吹至小于0.1mL。加水10mL,用5moL/L NaOH调节pH至11.0，9000r/min离心5min,备用。MAX固相萃取柱依次用甲醇、水各2mL活化和平衡，将备用液过柱，依次用甲醇-氨水-水(5+5+90,v/v/v)1mL和甲醇0.5mL洗涤，用2%乙酸乙睛4mL洗脱，收集洗脱液，50下氨气吹干。残余物中加乙腈0.5mL,涡动1min,加水0.5mL,混匀，过0.2m有机滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。4.4.2.4鸡蛋样品称取5g士0.02g试料于50mL离心管中，加乙腈10mL,涡动1min,9000r/min离心5min,取上清液于另一离心管中。重复提取一次，合并两次提取液。取12.5mL于离心管中，50下氮吹至小于0.1ml。加水10ml,用5moL/LNa(0H调节pH至11.0,9000r/min离心5min,备用。MAX固相萃取柱依次用甲醇、水各2mL活化和平衡，将备用液过柱，依次用甲醇氨水-水(5+5+90,v/v/v)1mL和甲醇0.5ml洗涤，用2%乙酸乙腈4mL洗脱，收集洗脱液，50下氮气吹干。残余物中加乙腈0.5mL,涡动1min,加水0.5mL,混匀，过0.2um有机滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。4.4.3空白添加标准曲线的制备分别精密量取6种玉米赤霉醇类药物混合标准贮备液适量，添加到5g(L)空白试料中，制得浓度在0g/kg(L)100g/kg(1)范围内的57个不同添加浓度的试料，按4.4.2步骤操作，供液相色谱串联质谱仪测定。4.4.4测定3