农业部1163号公告-2-2009 动物性食品中林可霉素和大观霉素残留检测 气相色谱法.pdf

农业部1163号公告一2一20094.2.13乙酸：优级纯。4.2.1440%氢氧化钾溶液：称取氢氧化钾40g,加水溶解并稀释至100mL。4.2.1510%氢氧化钾溶液：称取氢氧化钾10g,加水溶解并稀释至100mL。4.2.161mol/L的盐酸：量取浓盐酸9mL,加水稀释至100mL。4.2.17提取液：称取磷酸二氢钾1.36g,加水溶解并稀释至1000L,磷酸调节pH至4.0，加入三氯乙酸30g。4.2.18十二烷基磺酸钠溶液：称取十二烷基磺酸钠2.78g,加水溶解并稀释至50mL。4.2.19十二烷基磺酸钠缓冲液：称取十二烷基磺酸钠2.78g,用水溶解，加入乙酸1mL,并稀释至500mL4.2.20标准贮备液：称取林可霉素对照品约10mg(以纯品计算)于10L容量瓶中，用甲醇溶解、定容，制成l.0mg/mL的标准贮备液。称取大观霉素对照品约10mg(以纯品计算)于10mL容量瓶中，用超纯水溶解、定容，制成1.0mg/ml的标准贮备液。配制完毕后移至10L聚四氟乙烯管中储存。以上2一8避光保存，有效期6个月。4.2.21标准工作液：准确量取林可霉素和大观霉素标准贮备液适量，用甲醇稀释成适宜浓度的标准工作液，2一8避光保存，有效期1周。4.3仪器和设备4.3.1气相色谱仪：配氮磷检测器。4.3.2分析天平：感量0.00001g,感量0.01g。4.3.3离心机。4.3.4电热恒温水浴锅。4.3.5旋涡混合器。4.3.6组织匀浆机。4.4测定步骤4.4.1试料的制备试料的制备包括：取混合均匀后的供试样品，作为供试试料；取混合均匀后的空白样品，作为空白试料。4.4.2提取称取试料(20.05)g于50mL聚四氟乙烯离心管中，加提取液15mL。漩涡混匀，摇床振荡30min,5000r/min离心10min。取上清液，残渣用提取液10mL重复提取一次。合并上清液，5000r/min离心15min。水层（用40%、10%氢氧化钾和1mol/L盐酸）调节pH到5.8士0.2。加十二烷基磺酸钠溶液2mL,漩涡混匀后静置15min,备用。牛奶样品的提取：量取试料(2士0.05)mL置于50mL聚四氟乙烯离心管中，加提取液10mL。漩涡混匀，摇床振荡30min,5000r/min离心10min。取上清液，残渣用提取液10mL重复提取一次。合并上清液，加正己烷5mL,5000r/min离心15min,弃有机层。提取液调节pH至5.8士0.2。加十二烷基磺酸钠溶液2mL,漩涡混匀后静置l5min,备用。4.4.3净化固相萃取柱依次用甲醇、水、十二烷基磺酸钠缓冲液各3mL预洗，取备用液过柱，用水3L淋洗2次，甲醇4L洗脱，收集洗脱液，水浴40下氮气吹干至约100L左右时取出，室温下吹干。加500L硅烷化试剂(BSTFA)和100L乙睛，涡旋混合1in,密封，75恒温箱中，衍生反应1h;于室温2