LST 6133-2018 粮油检验 主要谷物中16种真菌毒素的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

LS/T6133-20184.5提取液乙腈-水-乙酸混合液(70：29：1，体积比)。4.6标准曲线溶剂乙腈-水-乙酸混合液(35：64.5：0.5，体积比)。4.7标准品4.7.1真菌毒素标准品：16种真菌毒素的固体粉末（纯度99%），16种真菌毒素标准品的信息见附录B表B.1。4.7.2真菌毒素稳定同位索标准品：除脱氧雪腐镰刀菌烯醇-3葡萄糖和15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇外的14种真菌毒素稳定同位素标准品的固体粉末（纯度99%），14种真菌毒素稳定同位素标准品的信息见表B.14.8标准溶液配制4.8.1单标标准储备液准确称取（精确至0mg真菌毒素标准品(4,71分别于10L容量瓶中，按照表B.2所示浓度及溶剂配制标准储备液此溶液20C密封避光保存，有效期6个月4.8.2混合标准中间液：准确移取定体积的1种真菌毒素单标标准储备液(4.8.1)于10mL容量瓶中，按照表B.3所示浓度配制混合标准溶液用外定容至刻度，此溶液20密封避光保存，有效期1个月。4.8.3系列标准工作溶液准确移取16种真菌毒素混合标准溶液（.8.2）25150gL、100L、250uL、500:1000L分别年10L容量瓶中，用标准曲线溶剂(46定容至刻度，配制标准曲线溶液浓度见表B.此溶液4避光密封保存，有效期周。4.8.4稳角同位紫单标储备液准确称取精确至0mg)真菌毒素稳定同位素标准品(4.7.2)分别于10mL容量瓶中，按照表B,5所示浓度及溶剂配制标准储备液，此溶液20密封避光保存，有效期6个月。4.8.5稳定同位素内标混合工作液：准确移取一定体积的14种真菌毒素稳定同位素单标储备液(4.8.4)于10L容量瓶中，用水定容至刻度，此溶液一20密封避光保存，有效期1个月，14种真菌毒素稳定同位素混合溶液浓度见表B.6。注：为便于操作，可采用满足要求的商品化稳定同位素内标试剂盒5仪器和设备5.1高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2冷冻离心机：转速12000r/min,可设4。5.3天平：感量0.1mg和0.01g。5.4涡旋混合器：转速100r/min。5.5振荡器：振荡频率50次/min。5.6粉碎机：电机转速1000r/min。5.7筛网：1mm孔径试验筛。5.8塑料离心管：50mL和1.5mL5.913mm聚四氟乙烯针头过滤器，孔径0.2um。5.10玻璃内插管：400uL。2LS/T6133-20185.11色谱进样瓶：2mL。5.12塑料无菌注射器：2mL。5.13容量瓶：10mL。6扦样与分样按GB/T5491执行，在采样过程中，注意防止样品污染。7分析步骤7.1样品粉碎样品经粉碎机粉碎，过500um孔径试验筛，混匀，待测。7.2提取准确称取5g(精确到0.01g)样品于50mL离心管(5.8)中，加入20mL提取液(4.5)，涡旋或振荡提取30min,然后以6000r/min离心10min,吸取0.5mL上清液于1.5mL离心管(5.8)中，加入0.5mL水并涡旋混匀，在4下以12000r/min离心10min,上清液过0.2um的聚四氟乙烯滤膜(5.9),收集滤液A。7.3添加稳定同位素内标准确吸取1804L滤液A(7.2)和标准系列工作溶液(4.8.3)于400L内插管(5.10)中，加人204L稳定同位素内标混合工作液(4.8.5)涡旋混匀，供液相色谱-串联质谱测定。注：采用商品化稳定同位素内标试剂盒时，按照其使用说明进行。7.4仪器参考条件7.4.1液相色谱参考条件色谱柱：C1s柱，100mm2.1mm,1.8um,或相当者。柱温：35。进样量：2L。流速：0.3mL/min。流动相组成及梯度洗脱参考条件参见附录C。7.4.2质谱参考条件离子源：电喷雾离子源。质谱扫描方式：多反应监测模式(MRM)。毛细管电压：3.5kV(+),3.5kV(-)。干燥气：300，7L/min。雾化气压力：241kPa(35psi)。鞘流气：350，11L/min。其他质谱参考条件参见附录C。16种真菌毒素的总离子流图和多反应监测图(MRM)参见附录D。3