GBZT 240.4-2011 化学品毒理学评价程序和试验方法 第4部分：急性吸入毒性试验.pdf

ICs 13.100C52中华人 民共 和 国国家职业 卫生标准GBz/T240。H-z 011化学品毒理学评价程序和试验方法第4部分:急性吸入毒性试验Pr o c e d u r e s a n d t e s t s Fo r t x i c o Io g i c a l e v a Iu a t i o n s o F c h e m i c a 1s Pa r t 4:Ac u t e i n h a Ia t i o n t o x i c i t y t e s t11-019发布2012-03-01 实 施中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部发布GBz/T240.4-2011口根据 中华人民共和国职业病防治法 制定本部分。GBz/T240化学品毒理学评价程序和试验方法 现分为以下四十四部分:第1部分:总则;第2部分:急性经口毒性试验;第3部分:急性经皮毒性试验;第4部分:急性吸人毒性试验;第5部分:急性眼刺激性/腐蚀性试验;第6部分:急性皮肤刺激性/腐蚀性试验;第7部分:皮肤致敏试验;第8部分:鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验;第9部分:体外哺乳动物细胞染色体畸变试验;第10部分:体外哺乳动物细胞基因突变试验;第11部分:体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验;第12部分:体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验;第13部分:哺乳动物精原细胞/初级精母细胞染色体畸变试验;第14部分:啮齿类动物显性致死试验;第15部分:亚急性经口毒性试验;第16部分:亚急性经皮毒性试验;第17部分:亚急性吸人毒性试验;第18部分:亚慢性经口毒性试验;第19部分:亚慢性经皮毒性试验;第20部分:亚慢性吸人毒性试验;第21部分:致畸试验;第22部分:两代繁殖毒性试验;第23部分:迟发性神经毒性试验;第24部分:慢性经 口毒性试验;第25部分:慢性经皮毒性试验;第26部分:慢性吸人毒性试验;第27部分:致癌试验;第28部分:慢性毒性/致癌性联合试验;第29部分:毒物代谢动力学试验;第30部分:皮肤变态反应试验-局部淋巴结法;第31部分:大肠杆菌回复突变试验;第32部分:酵母菌基因突变试验;第33部分:果蝇伴性隐性致死试验;第34部分:枯草杆菌基因重组试验;第35部分:体外哺乳动物细胞程序外DNA合成(UDS)试验;第36部分:体内哺乳动物外周血细胞微核试验;亠刖GBz/T240.4-20第37部分:体外哺乳动物细胞姊妹染色单体交换试验;第38部分:体内哺乳动物骨髓细胞姊妹染色体交换试验;第39部分:精子畸形试验;第40部分:繁殖/生长发育毒性筛选试验;第狃部分:亚急性毒性合并繁殖/发育毒性筛选试验;第42部分:一代繁殖试验;第43部分:神经毒性筛选组合试验;第44部分:免疫毒性试验。本部分为GBz/T240的第本部分由卫生部职业卫本部分 由中华人民共本部分起草单位:本部分主要起草与中毒控制所。i凵预防控制中心、中国疾病GBz/T240.4-2011化学品毒理学评价程序和试验方法第4部分:急性吸入毒性试验1 范围GBz/T240的本部分规定的、试验概述、试验方法、结果评价、评价报告和结果解释。本部分适用于评价吸人毒性作用。2 规范性引用文件下列文件对日期的版本适用于本文件。凡是不GBZ/T22GBZ/T术语和定GBZ/T24 试验 目的检测化学品性试验提供剂量5 试验掇述急性、慢性等吸人毒各试验组动物在一定选择可通过预试验确定。染毒后观察动物的毒性反应和死亡,试验结束时仍存活的动物进行大体解剖。6 试验方法6.1 实验动物首选健康成年小鼠(18g 22D和大鼠(180g 220D,雌雄各半,也可选用其他敏感动物。同性别各剂量组个体间体重相差不得超过平均体重的20%。试验前动物要在试验环境中至少适应3d 时间。6.2 剂设计根据所选方法的要求,原则上应设4个 5个剂量组,每组动物一般为10只,雎雄各半。各剂量组1急性吸人毒性试验的试吸人不间逖皮 的受蜘毒浓试验期间死亡的动物大质或气溶胶/颗粒物引用文卫生名学品毒nGBz/T240.4-2011间距大小以兼顾产生毒性大小和死亡为宜,通常以较大组距和较少量动物进行预试。如果受试样 品毒性很低,也可采用最大限量法,即用z O只动物(雌雄各半),一 般情况下,2000m g/m 3吸人4h,如未引起动物死亡,则不再进行多个剂量的急性吸人毒性试验。需要时也可做5000m g/m 3或更高浓度吸人4h,或以最大可能发生的浓度进行试验。6.3 染毒染毒可采用静式染毒法或动式染毒法。6.3.1 静式染毒法静式染毒是将实验动物放在一定体积 的密闭容器(染毒柜)内,加人一定量 的受试样 品,并使其挥发,造成试验需要的受试样品浓度的空气,一次吸人性染毒4h。6.3.1.1 染毒柜的容积以每只染毒小 鼠每小时不少于3L空气计,每只大鼠每小时不少于30L计。6.3.1.2 染毒浓度的计算;染毒浓度一般应采用实际测定浓度。在染毒期间一般可测4次 5次,求其平均浓度。在无适当测试方法时。可用式(1)计算染毒浓度:c=(色d/V)106式 中:c 染毒浓度,单位为毫克每立方米(m g/m 3);加人受试样品的量,单位为毫升(m L);J受试样品;V 染毒柜容积,单位为升(D。(1)6.3.2 动式染毒法动式染毒是采用机械通风装置,连续不断地将含有一定浓度受试样品的空气均匀不断地送人染毒柜,空气交换量大约为12次/h 15次/h,并排出等量的染毒气体,维持相对稳定的染毒浓度(对通过染毒柜的流动气体应不间断地进行监测,并至少记录2次)。一次性吸人染毒4h。当受试化合物有需要特殊要求时,也可应用其他的气流速率。染毒时,染毒柜内应确保至少有19%的氧含量和均衡分配的染毒气体。一般情况下,为确保染毒柜内空气稳定,实验动物的体积不应超过染毒柜体积的5%。且染毒柜内应维持微弱的负压,以防受试样品泄露污染周围环境。同时,应注意防止受试样品爆炸。6.3.2.1 受试样品气化(雾化)和输入的常用方法受试样品气化(雾化)和输人常用以下方法:o 气体受试样品,经流量计与空气混合成一定浓度后,直接输人染毒柜。b)易挥发液体受试样品,通过空气鼓泡或适当加热促使挥发后输人染毒柜。o 若受试样品现场使用时采取喷雾法时,可采用喷雾器或超声雾化器使其雾化为气溶胶后输人染毒柜。6.3.2.2 染毒浓度计算染毒浓度一般应采用动物呼吸带实际测定浓度,至少每30m i n 一次,取其平均值。各测定浓度值应在其平均值的25%以内。若无适当的测试方法,也可采用式(2)计算染毒浓度:c=E夕 d/(Vl+V2)106式中:c 染毒浓度,单位为毫克每立方米(m g/m 3);气化或雾化受试样品的量,单位为毫升(m L);GBz/T240.4-2011d 受试样品密度;VI输人染毒柜风量,单位为升(L);V2染毒柜容积,单位为升(D。6.4 观察期限及指标观察并记录染 毒过程 和观察期 内的动物 中毒 和死 亡情 况。观察期 限一般 为14d,观察 指标见GBz/T240.1的附录A,LC5。的计算见GBz/T240.1的附录B。对死亡动物进行尸检。观察期结束后,处死存活动物并进行大体解剖,如有必要,进行病理组织学检查。7 试验结果评价评价试验结果时,应将LCs。与观察到的毒性效应和尸检所见相结合考虑,LC5值是受试样 品急性毒性分级和标签标识 以及判定受试样 品经呼吸道吸人后引起动物死亡可能性大小 的依据。引用LC50值时一定要注明所用实验动物的种属、性别、染毒方式及时间长短、观察期限等。评价应包括动物接触受试样品与动物异常表现(包括行为和临床改变、大体损伤、体重变化、致死效应及其他毒性作用)的发生率和严重程度之间的关系。急性吸人毒性分级可按GBZ/T240.1附录C进行。8 评价报告除GBz/T2 0.1规定的一般项 目外,评价报告还应包括如下 内容:o 受试样品名称、配制方法、所用浓度;b)动式染毒设各中的气流速度;c)实验动物的种属、品系和来源、02分压(注明合格证号和动物级别);d)实验动物饲养环境,包括饲料来源、室温、相对湿度、动物实验室合格证号;所用染毒浓度和动物分组,每组所用动物性别、数量及体重范围;f)计算LC50的方法;g)染毒后动物中毒表现及 出现时间和恢复情况、死亡时间、大体解剖所见;h)列表报告结果,计算的LCs。及其95%可信 区间;i)结论。9 结果解释通过LC50的测定,可评价受试样品的急性吸人毒性及其毒性分级,可按GBZ/T240.1的附录C进行,但其结果外推到人类 的有效性是有限的。