JJG 705-2002 液相色谱仪.pdf

JJG 705-2002 本规程主要起草人：本规程主要起草人：赵 敏 （国家标准物质研究中心）参加起草人：参加起草人：吴方迪 （国家标准物质研究中心）何雅娟 （国家标准物质研究中心）JJG 705-2002 1 液相色谱仪检定规程液相色谱仪检定规程 1 范围 1 范围 本规程适用于配有紫外-可见光检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器和示差折光率检测器的液相色谱仪的首次检定、后续检定和使用中检验。液相色谱仪样机试验和定型鉴定中有关计量性能试验可参照本规程进行。2 概述 2 概述 液相色谱仪（以下简称仪器）是由输液系统、进样器、色谱柱（柱温箱）、检测器和数据处理装置等部分组成的分析仪器，图 1 是其组成的方框图。液相色谱仪利用式样中各组分在色谱柱内固定相和流动相间分配或吸附特性的差异，由流动相将试样带入色谱柱中进行分离，经检测器检测，依据组分的保留时间和响应值（峰面积或峰高）进行定性和定量分析。图 1 液相色谱仪组成方框图 3 计量性能要求 3 计量性能要求 3.1 输液系统 3.1.1 输液管路接口紧密牢固，在规定的压力范围内无泄漏。3.1.2 流量设定值误差 SS和流量稳定性误差 SR应符合表 1 的要求。3.1.3 梯度误差 GC：不超过3%。3.2 柱温箱 3.2.1 柱温箱温度设定值误差TC：不超过2。3.2.2 温度稳定性 TC：不超过 1。3.3 检测器 液相色谱仪检测器的主要技术指标见表 2。JJG 705-2002 4 表 3（续）表 3（续）序号 检定项目 首次检定 后续检定 使用中检定 柱箱温度设定值误差 T+-2 柱箱温度稳定性 T+-检测器：基线噪声+基线漂移+-+最小检测浓度+波长示值误差和重复性+-线性范围+-3 换档误差+-4 整机：定性定量重复性+注：“+”表示应检定项目，“-”表示可不检定项目。无梯度洗脱装置和无恒温柱箱得仪器，此项目不检定。紫外-可见光，二极管阵列和荧光检测器检定此项目，示差折光率检测器不检定此项目。5.2.2 检定方法 5.2.2.1 通用技术要求的检查 按第 4.1，4.2 条的要求，目视、手动检查。5.2.2.2 输液系统的检定 a)泵耐压的检定 将仪器各部分连接好，以 100%甲醇为流动相，流量为 1mL/min，按说明书启动仪器，压力平稳后保持 10min，用滤纸检查各管路接口处应无湿迹。卸下色谱柱，堵住泵出口端（压力传感器以下），使压力达到最大允许值的 90%，保持 5min 无泄漏。b)泵流量设定值误差 SS、流量稳定性误差的检定 SR的检定 按表 1 的要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集表 1 规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、式（2）计算 SS和 SR。%100/)(=SSmSFFFS (1)%100/)(minmax=mRFFFS (2)式中：Fm )/()(12tWWFm=，流量实测值，mL/min；W2 容量瓶+流动相的质量，g；W1 容量瓶的质量，g；试验温度下流动相的密度，g/mL；t 收集流动相的时间，min；JJG 705-2002 5 Fm 同一组测量的算术平均值，mL/min；FS 流量设定值，mL/min；Fmax 同一组测量中流量最大值，mL/min；Fmin 同一组测量中流量最小值，mL.min。c)梯度误差的检定 由梯度控制装置设置阶梯式的梯度洗脱程序，A 溶剂为纯水，B 溶剂为含 0.1%丙酮的水溶液，B 经由 5 个阶梯从 0 变到 100%，如图 2 所示。将输液泵和检测器连接（不接色谱柱），开机以后以 A 溶剂冲洗系统，基线平稳后开始执行梯度程序，画出梯度变化曲线。求出 A，B 溶剂不同比例时的输出信号值（或记录仪读数），重复测量 2 次，计算平均值。从 B 溶剂的含量及对应的输出信号值（或记录仪读数），按式（3）计算梯度误差 Gci，取 Gci最大者作为仪器梯度误差。%100/)(=mmiciLLLG (2)式中：Gci 第i段梯度误差(%)；Li 第i段输出信号值（或记录仪读数）平均值；Lm 各段输出信号（或记录仪读数）平均值的平均值。时间 t 图 2 梯度误差检定示意图 5.2.2.3 柱箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定 将数字温度计探头固定在柱温箱内，选择35和45（也可根据用户使用温度设定）进行检定。按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值。平均值与设定值之差为TS，7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性TC。5.2.2.4 紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器的检定 a)波长示值误差和重复性检定 输出信号值或记录仪读数