TCYS 001-2023 永川香珍生产技术规范.pdf

ICS 65.020.01B 39团 体 标 准T/CYS 001-2023 代替 T/CYS 001-2020永 川 香 珍 生 产 技 术 规 范Sweet Mushroom of Yongchuan Production Technical Specification2023-01-15 发布2023-02-01 实施重庆市永川区食用菌行业协会发布全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台T/CYS 001-2023I目录前言.II永川香珍生产技术规范.11 范围.12 规范性引用文件.13 产地范围.14 术语和定义.15 菌种场的设置与技术要求.36 母种制作.47 原种制作.48 栽培种制作.59 液体菌种制作.510菌种质量要求.611抽样及菌种质量检验.612菌种的标签、标志、包装、运输及贮存.613栽培技术要求.614 病虫害防治.815 采收与分级.816 卫生指标.9附 录 A（规范性）永川香珍常用原种和栽培种培养基及其配方.10附 录 B（规范性）永川香珍生产环境、接种器具可选用的化学消毒剂.11附 录 C（规范性）永川香珍常用栽培基质及其配方.12全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台T/CYS 001-2023II前言本标准按照 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。本文件代替 T/CYS 001-2020永川香珍，与 T/CYS 001-2020 相比，主要技术变化如下：a)增加了规范性引用文件：“GB 2762-2017 食品中污染物限量”和“GB 2763-2021 食品中农药最大残留限量”；b)增加了要素卫生指标：“污染物限量”和“农药残留限量”。本标准由重庆市永川区食用菌行业协会提出。本标准由重庆市永川区食用菌行业协会归口。本标准主要起草单位：重庆市上发食用菌种植有限公司、重庆市佳和食用菌种植有限公司、重庆市菌易农业开发有限公司、重庆市永川区绿秀菌业有限公司、重庆市永川区食用菌行业协会、重庆市农业科学院。本标准主要起草人：曹继岗、吴秀农、程治全、熊彬、黄建坤、张权利、黄英、陈红霞、龙琦、韦静宜、田时炳。全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台T/CYS 001-20231永川香珍生产技术规范1范围本标准界定了永川香珍相关的术语和定义，规定了永川香珍菌种的制作、菌种场的设置与技术要求、母种制作、母种制作、栽培种制作、液体菌种制作、菌种质量要求、抽样及菌种质量检验、菌种的标签、标志、包装、运输及贮存、栽培技术要求、病虫害防治以及采收与分级技术要求。本标准适用于室内栽培的永川香珍秀珍菇鲜品。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 5749-2006 生活饮用水卫生标准GB 19172-2003 平菇菌种GB/T 12728-2006 食用菌术语NY 5099-2002 无公害食品 食用菌栽培基质安全技术要求NY/T 391-2013 绿色食品 产地环境质量NY/T 528-2010 食用菌菌种生产技术规程NY/T 1846-2010 食用菌菌种检验规程NY/T 1935-2010 食用菌栽培基质质量安全要求GB 2762-2017 食品中污染物限量GB 2763-2021 食品中农药最大残留限量3产地范围永川香珍生产地域的自然地理范围为：东经 1053810605，北纬 28562934之间，幅员总面积 1576 平方千米。永川香珍生产地域的行政区划为辖区内全部 23 个镇街。4术语和定义下列术语和定义适用于本文件。4.1 永川香珍 Sweet Mushroom ofYongchuan是永川区春早、秋迟、冬暖、无霜期长，雾多风小日照短，空气湿润阴雨多的独特气候环境条件下生产的秀珍菇，其菌盖呈扁半球至平展，倒卵形或近扇形，光滑，边缘平滑或稍呈波状，直径4 cm10 cm，白色、灰色至灰褐色；菌柄偏生或侧生，内实，光滑，短或无，有绒毛，后期近光滑，内部实心至松软，白色；菌褶延生，稍密，不等长，白色；菌肉靠近基部稍厚，白色；孢子印灰白色；孢子近圆柱形，光滑，（8.1m全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台T/CYS 001-2023210.7m）（3m5.1 m），无色透明。具有菇形好，菇肉厚实，菇香浓郁，口感鲜嫩，营养价值和保健价值高的独特品质。4.2 母种经选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，以玻璃试管为培养容器和使用单位，也称一级种、试管种。来源：NY/T 528-2010，3.34.3 原种由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以玻璃菌种瓶或塑料菌种瓶或聚丙烯塑料袋为容器。来源：NY/T 528-2010，3.44.4 栽培种由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以玻璃菌种瓶或塑料袋为容器。栽培种只能用于栽培，不可再次扩大繁殖菌种。来源：NY/T 528-2010，3.54.5 接种菌种移植到培养基物中的操作。来源：GB/T 12728-2006，2.4.414.6 无菌操作在无菌条件下的操作过程。来源：GB/T 12728-2006，2.5.144.7 液体菌种培养基为液体状态的菌种。来源：GB/T 12728-2006，2.5.304.8 PDA马铃薯葡萄糖培养基。4.9 培养平板固体培养基在无菌培养皿中冷却凝固形成的平面培养基称为培养平板，简称平板。4.10 添加剂泛指培养料中的各种化学用品，包括化肥类、无机盐类、植物生长调节剂、杀虫剂、杀菌剂等。来源：GB/T 12728-2006，2.6.414.11 转潮期子实体在一定时间内大量发生的现象称为菇潮，菇潮在一个生长周期内可以发生若干次，一个菇潮至下一菇潮的间隔期,称为转潮期。全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台T/CYS 001-202335菌种场的设置与技术要求5.1 选址场址应距离禽畜场、垃圾场和医院等污染源1000 m以上，交通方便。5.2 能源供应场内有稳定的水源、电源、供热设备。5.3 设计要求各作业室干净整洁，布局利于无菌作业的流程，做到既相连又相隔。5.4 菌种场作业室及主要设施设备要求菌种场作业室及主要设施设备要求见表1。表 1菌种场作业室及主要设施设备序号名称用途设施及条件主要仪器设备1母种实验室母种的扩繁通自来水，220 V 电源，洁净等级为十万级，建筑面积按实际需要确定超净工作台、培养箱、普通光学显微镜、高压灭菌器、玻璃器皿、电子天平、电炉、微波炉、摇床、小型发酵罐2备料室培养料配制、分装通自来水，220 V 及 380 V 电源，建筑面积按实际需要确定拌料机、装袋机3灭菌室培养料灭菌通自来水，220 V 及 380 V 电源，建筑面积按实际需要确定高压灭菌器或常压灭菌器4冷却室灭菌后培养料的冷却220 V 及 380 V 电源，建筑面积按实际需要确定，洁净等级为千级空调系统、臭氧消毒机、新风系统5缓冲间进入无菌操作室前的准备工作220 V 电源，建筑面积按实际需要确定，洁净等级为千级洗手台、空调系统、臭氧消毒机、新风系统、作业服装专用柜6接种室接种作业220 V 及 380 V 电源，建筑面积按实际需要确定，洁净等级为百级层流罩、接种操作台面、空调系统、新风系统、臭氧消毒机7菌种培养室培养菌种220 V 电源，建筑面积按实际需要确定，洁净等级为十万级培养架、空调系统、臭氧消毒机、新风系统8菌种保存库贮存菌种220 V 及 380 V 电源，建筑面积按实际需要确定，温度要求：15制冷机组、保温库全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台T/CYS 001-202346母种制作6.1 试管规格及要求宜采用18mm180mm的玻璃试管。6.2 试管培养基制作新鲜无病害马铃薯洗净去皮，切成小薄片，取200g，加自来水1000mL，置于容器内煮沸20min后过滤，取滤汁加葡萄糖20g、蛋白胨1g2g、KH2PO40.1g0.2g、琼脂20 g，煮溶后用水补足至1000mL。将培养基分装至试管的2/5处，擦拭干净沾在试管口上培养基，塞上试管塞，用牛皮纸或报纸包装后灭菌，不可过夜放置。也可选用商品马铃薯葡萄糖培养基（PDA培养基）。将包好的试管（试管塞朝上）垂直放入高压灭菌器，在0.105MPa压力下，121灭菌20min。灭菌后的试管后趁热倾斜摆放形成斜面，斜面顶端应距离试管塞40mm50mm，培养基未凝固前不宜再移动。6.3 接种室消毒接种前1 d应用臭氧消毒机对接种室消毒20min30min，接种前60 min再消毒20min30min。臭氧消毒结束30min后操作人员方可进入接种室，防止臭氧中毒。6.4 接种6.4.1 准备工作操作人员进入缓冲间，应更换已消毒的洁净衣帽，戴上口罩，用消毒液清洁手部。6.4.2 操作方法在超净工作台内，按照无菌操作要求，用灼烧冷却后的接种工具从母种管切取3mm见方菌种块，迅速转接入待转接试管的培养基上，用酒精灯火焰灼烧试管口和试管塞后塞紧管口。1支母种管的转接量宜控制在30支50支。接种后应及时贴上菌种标签，注明菌种名称（代号）、接种人、接种日期。6.5 母种培养及保存转接后的试管，251恒温培养至菌丝满管。满管后应及时置于4冰箱中，存放时间不超过180d。7原种制作7.1培养料配制7.1.1 配方见附录A。7.1.2 配制方法将配方表中的原材料混合拌匀，补足水分，使培养料含水量达到60%70%。全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台T/CYS 001-202357.2 装瓶（袋）消毒液或洁净剂洗净容器后用清水冲刷干净。配制好的培养料及时装瓶（袋）至容器肩部，750mL菌种瓶培养料填充量不超过400g（湿重）；18cm直径的菌袋，装袋高度不应超过18cm，填充量不超过1200g。装瓶（袋）完成后用干净毛巾将容器璧擦拭干净，容器口盖上透气盖或用棉花塞紧。7.3 灭菌宜高压蒸汽灭菌，0.105Mpa121下灭菌180min。常压灭菌1001灭菌12h。7.4 接种室消毒同6.3。7.5 原种接种7.5.1 操作方法在超净工作台或层流罩内，按照无菌操作要求，用接种工具将母种切取成8mm10mm的菌种块后迅速转转移到原种培养料表面上，或放入培养料接种孔内，盖上封口物，转接结束。1支母种管转接不超过20瓶（袋）原种。接种后应及时贴上菌种标签，注明菌种名称（代号）、接种人、接种日期。7.5.2 培养及保存原种应在24 1，空气相对湿度55%65%，CO2浓度2000ppm50ppm下避光培养。满瓶后的原种应尽快使用，在不超过25、空气相对湿度50%70%、避光室内存放不超过14 d。4下贮存不超过45d。8栽培种制作宜在超净工作台或层流罩内，按照无菌操作要求，用接种工具将瓶（袋）口的老化菌种块去掉，取出2 cm见方的菌种块迅速转转移到栽培种培养料上，盖上封口物，转接结束。依次操作剩余的菌种袋。1瓶（袋）原种的转接量不应超过50瓶（袋）。接种后应及时贴上标签，注明菌种名称（代号）、接种人、接种日期。栽培种应尽快使用，在温度不超过25、相对湿度50%70%、避光的室内存放不超过15d。在16下贮存时，贮存期不超过45d。9液体菌种制作9.1 菌种活化取5mm见方秀珍菇母种接种于90mm PDA培养平板中央，于25恒温培养7d。9.2 一级液体菌种培养250mL三角瓶内分装100mL液体培养基，灭菌冷却。取1.5cm见方母种分割成为1mm见方菌种块，通过无菌操作接种于前述三角瓶内，于25、150r/min200r/min下振荡培养7d。培养基配方：马铃薯200g、葡萄糖20g、蛋白胨1g2g、KH2PO40.1g0.2g。9.3 二级液体菌种培养全国团体标准信息平台全国团体标准信息平台T/CYS 001-20236按10%接种量将一级液体菌种接种于发酵罐内，通气量4.0 L/min，转速 200r/min350 r/min，25下培养7d。液体