DB34T 1541-2011 小麦粉中偶氮甲酰胺的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 67.050 X 40 DB34 安徽省地方标准 DB 34/T 15412011 小麦粉中偶氮甲酰胺的测定 高效液相色谱法 Determination of Azodicarbonamide in wheat flour High performance liquid chromatography method 2011-11-15 发布 2011-12-15 实施安徽省质量技术监督局 发 布 DB34/T 15412011 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由安徽省质量技术监督局、安徽省食品质量安全检验方法标准化技术委员会提出。本标准由安徽省食品质量安全检验方法标准化技术委员会归口。本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。本标准主要起草人：陈戈、房志杰、姚彦如、李丹亚、赵彬、吴启陆、聂磊、罗剑鸣。DB34/T 15412011 1 小麦粉中偶氮甲酰胺的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了小麦粉中偶氮甲酰胺的测定高效液相色谱方法。本标准适用于小麦粉中偶氮甲酰胺含量的测定 本标准适用于小麦粉的风险预警监测及相关科学研究。本标准方法对于小麦粉中偶氮甲酰胺测定的最低检出量为 4 mg/kg。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 小麦粉中偶氮甲酰胺经丙酮提取，浓缩，用正己烷除脂，高效液相色谱分析测定，外标法定量。4 试剂和材料 4.1 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的二级水。4.2 乙酸铵：色谱纯。4.3 20 mmol/L 乙酸铵溶液：称取 1.54 g 乙酸铵（4.2）溶于 1000 mL 水中。4.4 丙酮。4.5 正己烷：分析纯 4.6 二甲基甲酰胺（DMF）：优级纯。4.7 偶氮甲酰胺标准品:含量 98.0以上。4.8 偶氮甲酰胺标准储备溶液：称取 0.1 g（精确至 0.1 mg）标准品用二甲基甲酰胺（4.8）溶解并定容 100 ml，此溶液为 1 mg/mL，此储备液冷藏保存，有效期为一个月。4.9 偶氮甲酰胺标准工作溶液：用乙酸铵溶液（4.3）溶液将偶氮甲酰胺标准储备溶液（4.8）稀释至2 g/mL、4 g/mL、6 g/mL、8 g/mL、10 g/mL 偶氮甲酰胺标准溶液系列，此标准溶液现配现用。5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪：带紫外检测器。5.2 分析天平：0.01 g。5.3 涡旋混合器。DB34/T 15412011 2 5.4 离心机，转速不低于 5000 r/min。5.5 振荡器。5.6 氮吹仪。6 测定步骤 6.1 提取 称取样品 2 g（精确到 0.01 g）于 50 mL 离心管中，加 10.0 mL 丙酮（4.4），在涡旋振荡混匀器（5.3）上混匀 1 min 后，室温下振荡提取 15 min，5000 r/min 以上离心 10 min。取上层清液 5.0 mL 于常温下氮吹近干，用乙酸铵溶液（4.3）定容 2.0 mL，再加入 1.0 mL 正己烷（4.5）涡旋振荡 2 min。静置分层，取下层水相过滤膜，立即进行液相分析。6.2 标准工作曲线 取上述标准工作液（4.9）绘制以峰面积为纵坐标、工作溶液为横坐标的标准工作曲线。6.3 空白试验 取不含偶氮甲酰胺的空白试样，均按上述测定步骤进行。6.4 测定 6.4.1 参考分析条件 a)色谱柱：4.6250 mm，SB-C18 反相柱或相似类型的 C18 柱；b)检测波长：245 nm；c)流动相：100 20 mmol/L 乙酸铵溶液（4.3）；d)流速：0.8 mL/min；e)进样量：10 L。6.4.2 定量分析 待测溶液偶氮甲酰胺量应在标准曲线范围内，超过线性范围则应稀释后进样。6.4.3 平行试验 按以上步骤，对同一试样进行平行测定。6.5 结果计算 偶氮甲酰胺的含量均按下式进行计算：mcX=0.50.100.2.(1)式中：X 试样中偶氮甲酰胺的含量，mg/kg；c 试样提取溶液中测得偶氮甲酰胺的浓度，mg/L；m 试样质量，g。注：计算结果保留两位有效数字。DB34/T 15412011 3 7 检测方法灵敏度和准确度 7.1 灵敏度 偶氮甲酰胺在小麦粉中的检测限为 4 mg/kg。7.2 准确度 7.2.1 本方法在 46 mg/kg 添加范围浓度内，用空白添加标准校正，偶氮甲酰胺的回收率范围为 9193，相对标准偏差小于 10。7.2.2 本方法在 68 mg/kg 添加范围浓度内，用空白添加标准校正，偶氮甲酰胺的回收率范围为 9196，相对标准偏差小于 10。7.2.3 本方法在 1020 mg/kg 添加范围浓度内，用空白添加标准校正，偶氮甲酰胺的回收率范围为95102，相对标准偏差小于 10。DB34/T 15412011 4 A A 附 录 A（资料性附录）偶氮甲酰胺标准品色谱图 A.1 偶氮甲酰胺标准品色谱图 偶氮甲酰胺标准品色谱图见图 A.1。Minutes024681012Volts0.0000.0010.0020.003 图A.1 偶氮甲酰胺标准品色谱图 _