DB21T 3060-2018 饲料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量测定 气相色谱法.pdf

ICS 65.120 B 46 DB21 辽宁省地方标准 DB21/T 30602018 饲料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量测定 气相色谱法 Detection of vanillin,ethyl vanillin,cinnamaldehyde,peach aldehyde,isoamyl acetate,gamma-nonanolactone,methyl cinnamate，ethylmaltol and anethole in feedstuffs by gas chromatography 2018-10-30 发布 2018-11-30 实施 辽宁省市场监督管理局 发 布 DB21/T 30602018 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 和 GB/T 20001.4-2015 给出的规则起草。本标准由辽宁省畜牧兽医局提出并归口。本标准起草单位：辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心。本标准主要起草人：郭国贤、张明、张秀芹、王丽娜、刘雪红、张雪娇、苗翠、兰雨濛、侯广正。DB21/T 30602018 1 饲料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量测定 气相色谱法 1 范围 本标准规定了配合饲料、复合预混合饲料、浓缩饲料、精料补充料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的气相色谱测定方法。本标准适用于配合饲料、复合预混合饲料、浓缩饲料、精料补充料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量测定。本方法的检出限为20 mg/kg，定量限为50 mg/kg。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB/T 14699.1（ISO 6497 IDT）饲料 采样 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 试样中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑用无水乙醇超声提取，提取液过滤膜后以氮气作为载气，使用气相色谱氢火焰检测器测定，外标定量法。4 试剂或材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。4.1 化学试剂：无水乙醇。4.2 标准品：香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑纯度均98.5%。4.3 混合标准贮备溶液：分别称取香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑标准品 100 mg（精确至 0.1mg），置于同一棕色 10 mL 容量瓶中，用无水乙醇（4.1）溶解并定容，配成浓度为 10 mg/mL 的标准贮备溶液。28密封保存，有效期为 3个月。4.4 混合标准中间溶液：准确移取香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑混合标准贮备溶液（4.3）1 mL 置于 10 mL 棕色容量瓶中，用无水乙醇（4.1）定容至刻度。该溶液的浓度为 1mg/mL。28密封保存，有效期为 1 个月。DB21/T 30602018 2 4.5 混合标准工作溶液：准确移取香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑混合标准中间溶液(4.4)适量，用无水乙醇（4.1）稀释成浓度分别为 5、10、20、50、100、200、500 g/mL 的标准工作溶液。现用现配。5 仪器设备 5.1 分析天平：感量为 0.1 mg；5.2 气相色谱仪：配氢火焰检测器(FID)和程序升温的柱温箱；5.3 微孔滤膜：0.45 m，有机相。6 试样制备 制样过程中应防止样品受到污染或含量发生变化。按GB/T 14699.1的规定，取饲料样品500 g，按GB/T 20195规定制备试样，粉碎过0.45 mm孔径筛，充分混匀，装入磨口瓶中备用。7 分析步骤 7.1 提取 称取试样约1 g（精确至0.1 mg），置于10 mL棕色容量瓶中，加5 mL无水乙醇（4.1），超声20min，降至室温后，用无水乙醇（4.1）定容至刻度。混匀后静置。取上清溶液，溶液过0.45 m的微孔滤膜，供上机测定。同时做试剂空白试验。7.2 测定 7.2.1 气相色谱参考条件 色谱柱：DB-5毛细管柱，长60 m，内径0.25 mm，膜厚0.25 m，或性能类似的色谱柱；载气：高纯氮气，2.0mL/min；分流比：10:1；进样口温度：270；检测器：氢火焰检测器；检测器温度：290；柱温箱温度：起始温度90，保持2min，以15/min升至200，保持8min；进样量：1.00 L。7.2.2 测定 在仪器最佳工作条件下，取混合标准工作溶液（4.5，从低浓度到高浓度）和试样溶液分别上机测定，以混合标准工作液中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准工作曲线，对样品进行定量。试样溶液中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的响应值应在标准工作曲线测定的线性范围内。超出线性范围的则用无水乙醇（4.1）适当稀释后再DB21/T 30602018 3 进样分析。在上述色谱条件下，香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑标准溶液色谱图见附录A。8 试验数据处理 试样中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量以质量分数Xi计，单位为毫克每千克(mg/kg)，按式(1)计算：niC VXm =（1）式中：C 由标准曲线计算所得的试样中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；m试样的质量，单位为克（g）；n稀释倍数；V样品定容体积，单位为毫升（mL）。平行测定结果用算术平均值表示，结果保留3位有效数字。9 精密度 在同一实验室，由同一操作人员完成的两个平行测定结果，相对偏差不大于20%。DB21/T 30602018 4 A A 附 录 A（资料性附录）9 种香味剂标准溶液的色谱图 图A.1给出了9香味剂标准溶液的色谱图 1乙酸异戊酯 2乙基麦芽酚 3肉桂醛 4大茴香脑 5壬内酯 6肉桂酸甲酯 7香兰素 8乙基香兰素 9桃醛 图 A.1 9香味剂标准溶液的色谱图（浓度为50 g/mL）空白饲料色谱图 图 A.2给出了9种香味剂空白的色谱图 DB21/T 30602018 5 图A.2空白饲料色谱图 图 A.3给出了添加混合标样的样品色谱图 1乙酸异戊酯 2乙基麦芽酚 3肉桂醛 4大茴香脑 5壬内酯 6肉桂酸甲酯 7香兰素 8乙基香兰素 9桃醛 图 A.3 添加混合标样（20g/mL）的样品色谱图 _