DB32T 932-2006 水果、蔬菜及制品中24-二氯苯氧乙酸残留量的测定 高效液相色谱法.pdf

DB32/T932-2006前言本标准按GB/T1.1-2000标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则和GB/T20001.4-2001标准编写规则第4部分：化学分析方法编制。其中测定方法是参考国内外有关文献，经研究、改进和验证后制定的。本标准由江苏省农业科学院提出。本标准主要起草单位：江苏省农业科学院食品质量与安全检测研究所。本标准主要起草人：耿志明、陈明、王冉。DB32/T932-20066测定步骤6.1试样的制备6.1.1液体样品（汁液）和粘稠的样品（果酱），将样品混合均匀。6.1.2固体样品（水果、蔬菜），将样品切成小块，捡出种子和果壳，混匀，取约100g放入捣碎机中捣碎。6.2提取称取约5g样品（精确至0.01g),放入50mL离心管中，加入20L水，用1M氢氧化钠溶液调pH至10，漩涡振荡1min后，离心10min(5000r/min)。将上清液转移至125mL分液漏斗中，残渣加入15L水，重复上述操作，合并上清夜。用磷酸调节上清夜pH至2.5，加入20mL二氯甲烷，振荡、静置，分离。上层液中再加入15mL二氯甲烷提取。合并下层溶液并转移至50mL圆底烧瓶中，在35水浴中旋转蒸发至近干，残渣用5mL丙酮溶解，待净化。6.3净化在10mL聚乙烯针筒底部放置一片醋酸纤维过滤板（直径略小于针筒内径），加入0.5g硅胶，再在硅胶上面覆盖一片醋酸纤维过滤板，并用活塞轻轻压实，然后依次用5mL水、5mL甲醇和5mL丙酮预淋洗硅胶固相萃取小柱，弃去预淋液。将待净化的丙酮溶液小心倒入准备好的硅胶固相萃取小柱中，过柱（流速：3mL/min),然后用5mL丙酮洗涤（流速：35mL/min),弃去洗涤液，抽干小柱。用5mL甲醇洗脱（流速：3mL/min),洗脱液在45水浴中氮气吹至近干，用80%的甲醇水溶液（磷酸调pH至3)溶解、定容，过0.45m滤膜，供色谱分析。6.4色谱条件6.4.1色谱柱：C18(250mm4.6mm,5m)。6.4.2检测波长：282nm。6.4.3流动相：80%的甲醇水溶液（磷酸调pH至3）6.4.4柱温：30。6.4.5流速：1.0mL/min。6.4.6进样量：204L。6.5色谱测定6.5.1标准曲线：用流动相稀释标准储备液，配制系列浓度的标准工作溶液：0.1g/mL、0.2g/mL、0.5g/mL、1.0g/mL、2.0g/mL。在上述色谱条件下测定，以峰面积为纵坐标、相应的标准工作溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。2,4-二氯苯氧乙酸的高效液相色谱图，见图1。6.5.2将净化后的试样溶液在上述色谱条件下测定，用峰面积在标准曲线上查得试样溶液中2,4-二氯苯氧乙酸的浓度。6.6计算按式(1)计算试样中2,4-二氯苯氧乙酸残留含量：X=C X V/m(1）式中：X一试样中2,4-二氯苯氧乙酸含量，单位为毫克每千克(mg/kg):C一试样溶液中2,4-二氯苯氧乙酸的浓度，单位为微克每毫升(g/L):V一试样溶液定容体积，单位为毫升(L):m一试样质量，单位为克(g)。2