DB32T 2007-2012 吡唑草胺含量的测定 色谱法.pdf

ICS 71.040.40 G 04 备案号：33217-2012 江苏省地方标准 DB32 DB32/T 2007-2012 吡唑草胺含量的测定 色谱法 Analytical Method for metazachlor by Chromatography 2012-02-10 发布 2012-04-10 实施 江苏省质量技术监督局 发布 DB32/T 2007-2012 前 言 本标准按GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第1 部分：标准的结构和编写规则编写。本标准附录A、附录B为资料性附录。本标准由江苏省产品质量监督检验研究院提出。本标准起草单位：江苏省产品质量监督检验研究院、国家农药中心产品质量监督检验中心（南京）。本标准主要起草人：包素萍、张晓强、耿宁、俞幼芬、顾爱国、武中平、孙长恩。DB32/T 2007-2012 1 吡唑草胺含量的测定 色谱法 1 范围 本标准规定了吡唑草胺原药及其悬浮制剂中有效成分吡唑草胺含量色谱测定方法。本标准适用于吡唑草胺原药及其悬浮制剂中有效成分含量的测定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 3 高效液相色谱法（仲裁法）3.1 方法提要 试样用乙腈溶解，以乙腈+水溶液为流动相，使用以 C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器，对试样中的吡唑草胺进行反相高效液相色谱分析，采用外标法定量。3.2 试剂和溶液 3.2.1 乙腈 色谱纯。3.2.2 吡唑草胺标样：已知质量分数，99.0%。3.3 仪器与设备 3.3.1 高效液相色谱仪，紫外检测器。3.3.2 分析天平：感量 0.0001g。3.3.3 色谱柱：250mm4.6mm 不锈钢柱，内装 C18（5 m）填料。3.3.4 过滤器：滤膜孔径 0.45m。3.3.5 超声波振荡器。3.4 高效液相色谱操作条件 3.4.1 流动相：乙腈/水=50/50(v/v）3.4.2 流速：0.8 mL/min。3.4.3 检测波长：230nm。3.4.4 柱温：35。3.4.5 进样体积：5L。保留时间（min）：吡唑草胺 约 8.7。上述高效液相色谱操作参数是典型的，可根据不同仪器特点，对给定操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。典型的吡唑草胺的高效液相色谱分离图参见附录B中图B.1。3.5 测定步骤 3.5.1 标样溶液的制备 DB32/T 2007-2012 2 准确称取吡唑草胺标样约 0.040g(精确至 0.0002g)于 50mL 容量瓶中,用乙腈溶解并定容至刻度，在超声波下振荡 5min 后，摇匀，用 0.45m 微膜过滤。3.5.2 试样溶液的制备 准确称取含吡唑草胺约 0.040g(精确至 0.0002g)的试样于 50mL 容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，在超声波下振荡 5min 后，摇匀，用 0.45m 微膜过滤。3.5.3 测定 在 3.4 操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针的有效成分峰面积相对变化小于 1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。3.5.4 计算 试样中被测组分质量分数1（%）按式（1）计算：21121mm (1)式中：A1 标样溶液中，吡唑草胺峰面积的平均值；A2 试样溶液中，吡唑草胺峰面积的平均值；m1 标样的质量，单位为克（g）；m2 试样的质量，单位为克（g）；标样的质量分数，数值以%表示。计算结果保留三位有效数字。3.6 允许差 两次平行测定结果之差原药不大于 1.5%，50%悬浮剂应不大于 0.6%。4 气相色谱法 4.1 方法提要 试样用丙酮溶解，以邻苯二甲酸二戊酯为内标物，使用 HP-5(30m0.32mm0.25 m)毛细管柱和氢火焰离子化检测器，对试样中的吡唑草胺进行气相色谱分析，采用内标法定量。4.2 试剂和溶液 4.2.1 丙酮，分析纯。4.2.2 吡唑草胺标样：已知质量分数，99.0%。4.2.3 内标物：邻苯二甲酸二戊酯，分析纯（不含有干扰分析的杂质）。4.2.4 内标溶液：称取邻苯二甲酸二戊酯 3.0 克，置于 500 mL 容量瓶中，用丙酮溶解并稀释至刻度，混合均匀，密封备用。4.3 仪器 4.3.1 气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器。4.3.2 色谱柱：HP-5(30m0.32mm0.25 m)毛细管柱。4.4 气相色谱操作条件 4.4.1 温度()：柱室 200,气化室 270,检测器室 260。4.4.2 气体流量(mL/min):载气(N2):4,氢气：30，空气：400，尾吹气：25，隔垫吹扫气：3。DB32/T 2007-2012 3 4.4.3 进样模式：分流。4.4.4 分流比：40：1。4.4.5 进样体积：1 L。4.4.4 保留时间（min）：吡唑草胺 约 4.0，邻苯二甲酸二戊酯（内标物）约 5.1。上述操作条件，系典型操作参数，可根据不同仪器及色谱柱特点，对给定操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。典型的吡唑草胺气相色谱图参见附录 B 中图 B.2。4.5 测定步骤 4.5.1 标样溶液的制备 称取吡唑草胺标样 0.05g(精确到 0.0002 g)置于 25 mL 容量瓶中，用移液管准确加入 8 mL 内标溶液，丙酮定容后摇匀备用。4.5.2 试样溶液的制备 称取含吡唑草胺 0.05 克的试样(精确到 0.0002 g)置于 25 mL 容量瓶中，用移液管准确加入 8 mL内标溶液，丙酮定容后摇匀备用。4.6 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针吡唑草胺相对响应值变化小于 2%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。4.7 计算 将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中吡唑草胺与内标物峰面积之比，分别进行平均。吡唑草胺的质量分数 1()，按式(2)计算：21121mrmr (2)式中：r1标样溶液中，吡唑草胺与内标物峰面积比的平均值；r2试样溶液中，吡唑草胺与内标物峰面积比的平均值；m1吡唑草胺标样的质量，g；m2试样的质量，g；吡唑草胺标样的质量分数，数值以表示。4.8 允许差 两次平行测定结果之差原药不大于 1.5%，50%悬浮剂应不大于 0.6%。DB32/T 2007-2012 4 附 录 A（资料性附录）吡唑草胺的其它名称、结构式和基本物化参数 本产品有效成分吡唑草胺（吡草胺）的其它名称、结构式和基本物化参数如下：ISO 通用名称：Metazachlor CAS 号：67129-08-2 化学名称：2-氯-N-(2,6-二甲基苯基)-N-(1H-吡唑-1-基甲基)乙酰胺。结构式：实验式：C14H16ClN3O 相对分子质量：277.8（按 2007 年国际相对原子质量计）。生物活性：除草。熔点：85。蒸汽压（20）：0.049mPa。溶解性（20）：水中 17mg/L；丙酮、三氯甲烷中1000g/Kg；乙醇中 200g/kg。稳定性：中性介质中较稳定，40放置两年稳定。DB32/T 2007-2012 5 附 录 B（资料性附录）吡唑草胺色谱分离图 图B.1 吡唑草胺高效液相色谱分离图 1.吡唑草胺 1 吡唑草胺 2邻苯二甲酸二戊酯 图B.2 吡唑草胺气相色谱分离图