ICS67.050X04备案号：37939-2013DB22吉林省地方标准DB22/T1820—2013粮食中串珠镰刀菌的PCR检测PCRdetectionofFusariummoniliformingrains2013-05-15发布2013-09-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T1820—2013I前言本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口。本标准主要起草单位：吉林省产品质量监督检验院、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局。本标准主要起草人：史艳宇、魏春艳、刘金华、王莹、初真林、刘晓晖、周亮、王潇、张涛、王颖、冷喜芳。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T1820—20131粮食中串珠镰刀菌的PCR检测1范围本标准规定了粮食中串珠镰刀菌的PCR检测方法。本标准适用于粮食中串珠镰刀菌的快速筛选检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4789.15食品微生物学检验霉菌和酵母计数GB/T4789.16食品卫生微生物学检验常见产毒霉菌的鉴定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求WS/T230临床诊断中聚合酶链式反应（PCR）技术的应用3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1串珠镰刀菌Fusariummoniliform串珠镰刀菌是一种重要的农作物病原真菌，能引起禾本科作物的根腐、茎腐和穗腐，是玉米青枯病和穗腐病的主要病原真菌之一。3.2聚合酶链式反应polymerasechainreaction，PCR模板DNA先经高温变性成为单链，在DNA聚合酶作用和适宜的反应条件下，根据模板序列设计的两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而相互结合，接着在DNA聚合酶的作用下以四种脱氧核糖核酸（dNTP)为底物，使退火引物得以延伸，然后不断重复变性、退火和延伸这一循环，使位于两段已知序列之间的DNA片段呈几何倍数扩增。4试剂和材料除特别说明以外，所用试剂为分析纯或生化试剂。4.1水：应符合GB/T6682中一级水的规格。4.2马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（Potatodextroseagar，PDA）：按GB4789.15规定。4.3CTAB缓冲液：55mmol/LCTAB、1400mmol/L氯化钠、20mmol/LEDTA、100mmol/LTris，用10%盐酸（HCl）调pH至8.0...
