ICS65.120B46DB13河北省地方标准DB13/T1090-2009饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定—分光光度法2009-06-17发布2009-07-02实施河北省质量技术监督局发布DB13/T1090-2009前.占.曰本标准由河北省畜牧兽医局提出。本标准起草单位:河北省饲料产品质量监督检验站、石家庄市畜产品质量监测中心、河北省畜牧本标准主要起草人:武英利、王萍、左晓磊、闺超、王作艳、李广东。DB13/T1090-2009饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定分光光度法1范围本标准规定了饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的单位定义和测定方法。本标准适用于饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定，不适用于饲料中木聚糖酶活力的测定。2规范性引用文件下列文件通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1木聚糖酶活力单位在500C,pH5.5的条件下，1min水解木聚糖生成15mol木糖所需的酶的量，规定为一个酶活力单位。4原理木聚糖酶水解木聚糖生成木糖和木二糖等低聚糖，生成的木糖在沸水浴条件下还原3,5一二硝基水杨酸，生成棕红色的3-氨基一5一硝基水杨酸，溶液颜色与酶解产生的木糖量成正比，而木糖的生成量与酶的活力成正比，用分光光度计测定其吸光度值，依据吸光度值计算其酶活力。5仪器和设备5.，分析天平:感量0.0001g05.2研钵。5.3容量瓶:50mL,100mL05.4电炉:温度可调。5.5恒温水浴摇床:温控范围30℃土0.20C'--60℃土0.20C.5.6烧杯:200mL,250mL05.7砂芯玻璃滤器:孔径0.455m05.8酸度计:精确至0.0105.9秒表。5.10离心机:6000r/min05.11移液器:精度105l05.12分光光度计。5.13比色管:25mL06试剂DB13/T1090-2009方法中所用试剂，除另有规定外均为分析纯试剂，所用水应符合GB/T6682-2008三级以上用水要求。6.1氢氧化钠。6.2冰乙酸。6.3三水乙酸钠(CH3COONa"3H2O)06.43,5一二硝基水杨酸。6.5四水酒石酸钾钠(C4H刀6.4H刃)。6.6苯酚。6.7无水硫酸钠。6.8木糖:含量大于99%06.9木聚糖。7溶液7.1氮氧化钠溶液，浓度200g/L称取20.0g氢氧化钠，加水溶解，用水定容至100mL07.2乙酸溶液，浓度0.1mo比吸取冰乙酸0.60mL，加水溶解，用水定容至100mL07.3乙酸钠溶液，浓度0.1mo巩称取三水乙醚钟1.36g，加水溶解，用水...
