细菌的生理、分布、消毒灭菌.ppt

第二节 细菌的生理 一、细菌生长繁殖条件 1.营养物质 水、碳源、氮源、生长因子等 2.pH 多数在7.27.6 3.温度 最适温度37 4.气体：CO2，O2 根据细菌对氧的要求不同将细菌分为四类：（1）专性需氧菌：结核杆菌 （2）微 需 氧 菌：幽门螺杆菌 （3）兼性厌氧菌：大多数病原菌 （4）专性厌氧菌：破伤风杆菌 二、细菌生长繁殖的方式、速度及规律 1.细菌个体的生长繁殖 二分裂方式繁殖 2.细菌群体的生长繁殖 生长曲线:培养时间为横坐标，细菌数目的对数为纵坐标 （1）迟缓期：适应阶段，几乎不繁殖，代谢活跃，体积增大，积极合成各种酶类及代谢产物，为繁殖做准备。（2）对数期：研究细菌的生物学性状在此期 生物血特性典型，对外界因素的作用敏感 （3）稳定期：细菌代谢产物多在此期产生 繁殖数与死亡数基本平衡 （4）衰亡期：三、细菌的人工培养 培养基 由人工方法配制，专供微生物生长繁殖使用的营养物制品 类型：按照用途：基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基 按照物理形态：液体培养基、固体培养基、半固体培养基 细菌在培养基中的生长现象 1.液体培养基：菌膜生长 枯草芽胞菌 混浊生长 大多数细菌 沉淀生长 链球菌 菌膜生长 混浊生长 沉淀生长 2.固体培养基：菌 落 菌 苔 菌菌 落落 菌菌 苔苔 3.半固体培养基：无鞭毛 有鞭毛 培养基的用途 液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种 细菌人工培养的意义 1.在医学中的应用：诊断和治疗；细菌鉴定和研究；生物制品。2.在工农业生产中的应用：发酵等 3.在基因工程中的应用：外源DNA的重组 细菌代谢产物（一）与致病性有关的代谢产物（二）与治疗有关的代谢产物（三）与鉴别细菌有关的代谢产物 三、细菌的代谢产物及意义 （一）与致病性有关的代谢产物 1热原质（pyrogen）菌体中细胞壁的脂多糖，大多是革兰氏阴性菌产生的。注入人或动物体内能引起发热反应，故名热原质 特点：耐高温；去除方法：250干烤、蒸馏等 2毒素 内毒素 外毒素 3侵袭性酶 侵袭性酶 病原菌在代谢过程中合成的具有侵袭病原菌在代谢过程中合成的具有侵袭性的酶类，这些物质一般性的酶类，这些物质一般不损伤机体组织不损伤机体组织细胞，但能协助病原菌在机体内的定植、细胞，但能协助病原菌在机体内的定植、繁殖及扩散。繁殖及扩散。常见的侵袭性酶主要有透明常见的侵袭性酶主要有透明质酸酶、硫酸软骨素酶、链激酶、胶原酶质酸酶、硫酸软骨素酶、链激酶、胶原酶等。等。它们的共性是使机体组织结构疏松，它们的共性是使机体组织结构疏松，通透性增强，从而有助于病原菌及其毒素通透性增强，从而有助于病原菌及其毒素迅速扩散。迅速扩散。（二）与治疗有关的代谢产物 1.抗生素 能抑制或杀死某些微生物或肿瘤细胞的物质。2.维生素（三）与鉴别细菌有关的代谢产物 1.色素 水溶性和脂溶性 2.细菌素 具有抑菌作用的蛋白质，只对与细菌素的产生菌有近缘关系的细菌 才有杀菌作用，抑菌范围窄，种和型特异性，用于细菌分型。3.糖分解产物 糖发酵实验 4.蛋白质分解产物 VP实验 H2S实验 第三节 细菌的分布与消毒灭菌 一、细菌的分布（一）在自然界的分布 水、空气、土壤（二）正常人体的分布 正常菌群：指存在于机体一定部位，具有一定的种类和数量，在正常条件下对机体有利无害的微生物群或细菌群。作用：生物拮抗作用 生物屏障，阻止外来细菌入侵 营养作用；参与营养物质代谢，促进营养的消化与吸收，免疫促进作用；刺激机体免疫系统发育成熟，增强防御能力 抗衰老作用；抑瘤作用。致癌物质转换为非致癌物质 鼻鼻咽咽腔腔葡萄球菌、甲，丙型链球菌肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等外外耳耳道道葡萄球菌、类白喉杆菌绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌表皮葡萄球菌口口腔腔甲，丙型链球菌类白喉杆菌、肺炎球菌奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌螺旋体、放线菌、白念珠菌肠肠道道大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细菌真菌、乳杆菌，双歧杆菌等阴阴道道大肠杆菌、乳杆菌白念珠菌、类白喉杆菌非致病性分枝等皮皮肽肽葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌丙酸杆菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌人体内正常菌群的分布眼眼结结膜膜白色葡萄球菌、干燥杆菌尿尿道道白色葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌 条件致病菌：指正常菌群在某些非正常条件下（如机体免疫机能下降、使用抗菌药物、改变寄居部位等）也能导致机体致病。菌群失调：指一定范围的正常菌群的种类和数量的比例发生失调。菌群失调症：指因菌群失调所导致的临床症状，又称二重感染。二、消毒灭菌 1.消毒:杀死物体上病原微生物，针对繁殖体，不一定杀死芽胞 2.灭菌:杀灭物体上所有微生物（病原微生物，非病原微生物，细菌芽孢）3.防腐:抑制或防止微生物繁殖 4.无菌：没有活的微生物存在。5.无菌操作：防止微生物进入机体或物体的方法 6.清洁：减少微生物达到安全状态 消毒灭菌的方法 1、物理灭菌法 物理灭菌法 温 度 日光、紫外线 滤过除菌 电辐射 超声波 低温 高温（热力）（1）热力灭菌 高温加热 干热灭菌法 热空气为导热介质 焚烧 烧灼 干烤（160170/2h）红外线 巴氏消毒法 低温、营养成分不被破坏 煮沸法 流动蒸气消毒法 间歇蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法 高温的水或水高温的水或水 蒸气为导热介质蒸气为导热介质 同一温度下,湿热比干热效果好 穿透力、受热均匀、水分多蛋白易变性，潜热 高压蒸汽灭菌法 在高压蒸汽灭菌器里进行，在蒸汽不外溢的情况下，随着灭菌器压力的增高，温度液逐渐上升。适用于耐高温、不怕潮湿的物品灭菌，如基础培养基手术器械。121.3,15-30分钟 最常用、最有效 间接灭菌法 100加热30分钟（杀死繁殖体，为杀死芽孢）后37温箱过夜（芽孢繁殖），再于100加热30分钟，重复3次，可达灭菌效果。适用于不耐高温的物品，如含有糖，鸡蛋，血清的培养基。（2）辐射杀菌法 紫外线 杀菌作用与波长有关，200-300nm有杀菌作用 265266nm杀菌最强 原理：细菌DNA吸收紫外线后，DNA构型发生改变，从而干扰DNA复制，导致细菌死亡 局限性：穿透力弱，室内空气的消毒或物品表面的消毒 如手术室，微生物室 电离辐射 X、射线 原理：水分被解离为H+和OH-，为强烈的氧化剂和还原剂，可破坏细菌核酸，酶，蛋白质，是细菌死亡 （3）滤过除菌法 采取机械性阻流的方法，利用滤菌器除去液体或空气中细菌。滤菌器含有微细小孔，小于孔径物质可以通过，故可除菌。但衣原体、立克次体、病毒可以通过滤菌器。适用于不耐热、不能用化学方法消毒的液体。如血清等 （4）超声波杀菌法 裂解细菌 （5）干燥与低温抑菌法 使细菌脱水，蛋白变性，盐类浓缩，从而妨碍其代谢生长，繁殖。低温抑制细菌生长繁殖。冷冻真空干燥保存菌种 2、化学消毒灭菌法（外用）常用消毒剂的杀菌机制：使菌体蛋白变性或凝固；干扰微生物酶系统和影响其代谢；损伤细胞膜或改变其通透性。类别类别 作用机制作用机制 常用种类常用种类 酚类 蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸 醇类 蛋白变性 乙醇 氧化剂 氧化、蛋白沉淀 高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒 重金属盐 氧化、蛋白酶变性 红汞、硫柳汞 表面活性剂 蛋白变性，细胞膜损伤 新洁而灭 染料 干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫 酸碱类 破坏膜、壁，蛋白凝固 醋酸、生石灰 烷化剂 蛋白质、核酸烷基化 环氧乙烷 影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度 酸碱度 有机物 噬菌体 噬菌体是感染细菌，真菌等微生物的病毒。因部分噬菌体能引起宿主细胞裂解，故称噬菌体。其个体微小，结构简单，只含一种核酸，严格胞内寄生，复制方式繁殖。感染过程：吸附、穿入、生物合成、装配、成熟、释放 噬菌体在宿主菌体内的增殖过程 谢 谢！