DB13T 1482-2011 病死动物产品鉴别技术规范.pdf

ICS 11.220 B 41 DB13 河北省地方标准 DB13/T 14822011 病死动物产品鉴别技术规范 2011-12-13 发布 2011-12-30 实施河北省质量技术监督局 发 布 DB13/T 14822011 I 前 言 本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。本标准由唐山市质量技术监督局提出。本标准起草单位：唐山市动物卫生监督所。本标准主要起草人：张绍军、王诚、刘润东、张玉新、李杏媛、张建军、孙敬军、贾久满、范炜、回新彩、贾浩程、张立良、张国清、丁红田、邵力、王建红、朱利华、李敬阳、李静、高振永。DB13/T 14822011 1 病死动物产品鉴别技术规范 1 范围 本标准规定了鉴别病死动物产品的感官检查、快速检测、实验室检验、特殊检验、检查结果判定等。本标准适用于动物卫生监督管理过程中对病死动物产品的鉴别。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 16548 病害动物和病害动物产品生物安全处理规程 中华人民共和国动物防疫法（中华人民共和国第十届全国人民代表大会常务委员会第二十九次会议通过，2008 年 1 月 1 日起施行）3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。3.1 病死动物产品 指猪、牛、羊及家禽等动物病死前急宰，或者死后冷宰的胴体或分割成块的肉品及其内脏器官。3.2 急宰 指对患病的猪、牛、羊及家禽等动物，在濒死期或临近濒死期为避免其自然死亡而进行的紧急宰杀。3.3 冷宰 指对病死的猪、牛、羊及家禽等动物肉尸所施行的宰杀、解体。3.4 血液沉积 指濒死期或死亡的动物体内血液循环不良或不循环，血液因重力作用向卧地一侧沉积，形成的特有充血或血液浸润现象。3.5 尸斑 指动物死后血液循环停止，血液因重力作用向卧地一侧沉积，透过皮肤呈现出来的暗红色、暗紫色、DB13/T 14822011 2 黑紫色斑痕。4 样品选择 病死动物产品鉴别样品应选择未经浸泡、熟制及化学药品处理的猪、牛、羊及家禽等动物胴体、分割肉品、内脏器官及头等。5 感官检查 5.1 胴体检查 a)宰杀刀口切面平整不外翻。b)刀口周围组织无血液浸润。c)一侧性血液沉积。d)出现尸斑。e)淋巴结肿大，切面紫红色、暗红色或黑红色。5.2 肉品检查 a)肌肉暗红色或黑红色。b)肌肉切面暗红色或黑红色血液浸润。C)肌肉切面渗出暗红色或黑红色血珠。5.3 内脏检查 5.3.1 胃肠 a)弥漫性潮红、暗红色、紫红色或蓝紫色。b)弥漫性肿胀。c)弥漫性点状或斑块状出血。d)黏膜糜烂、溃疡或穿孔。e)黏膜下水肿、血肿。f)黏膜坏死、脱落。5.3.2 脾脏 a)肿大，质地柔软。b)失去固有色泽（公牛蓝紫色、母牛灰色，羊紫红色，猪暗红色）。c)切面外翻。d)固有结构模糊不清。DB13/T 14822011 3 e)刀刮切面时附着粥样脾髓。5.3.3 心脏 a)心外膜点状或条状出血。b)心肌呈灰红色似水煮，质地柔软。c)虎斑心。d)心肌斑块状出血。e)菜花样赘生物。f)寄生虫。5.3.4 肝脏 a)肿大，腹侧缘变钝。b)质地变脆。c)固有色泽（牛羊棕黄色、猪红褐色）改变，呈黄褐色、灰黄色、淡黄色、灰白色。d)弥漫性坏死。5.3.5 肺脏 a)重量增加，水浮试验完全下沉。b)色泽呈紫红色、红褐色、暗红色、灰红色、灰黄色。c)手压肺脏切面流出血样泡沫、浑浊液体或脓性渗出物。5.3.6 肾脏 a)明显肿大。b)颜色呈紫红、苍白或土黄色。c)切面隆起。d)肾盂充血、出血、溃疡、坏死。5.4 禽的检查 a)皮肤紫红色、暗黑色、铁青色。b)冠、髯紫红色、青紫色、紫黑色。c)眼部污秽不洁，眼球下陷。d)肛门松弛，淤血、出血。e)一侧性血液沉积。6 快速检测 DB13/T 14822011 4 6.1 滤纸条血液浸润法 操作方法及结果判定见附录 A 中 A.1.1。6.2 愈创木脂酊反应法 操作方法及结果判定见附录 A 中 A.1.2。6.3 过氧化物酶快速法 操作方法及结果判定见附录 A 中 A.1.3。7 实验室检验 7.1 过氧化物酶反应法 操作方法及结果判定见附录 A 中 A.2.1。7.2 硫酸铜肉汤反应法 操作方法及结果判定见附录 A 中 A.2.2。7.3 微生物毒素呈色反应法 操作方法及结果判定见附录 A 中 A.2.3。8 特殊检验 病死动物产品需要作动物疫病诊断的，应当向具有资质的动物疫病检验机构送检，其中口蹄疫、高致病性禽流感的检验须向区域性（省级）专业实验室或国家参考实验室送检。9 检查结果判定 9.1 感官检查中病死动物产品基本特征符合 5.1、5.2、5.3.1-5.3.6、5.4 中规定项目之一的，判定为病死动物产品。9.2 感官检查中病死动物产品基本特征不典型但可疑的，判定为疑似病死动物产品。疑似病死动物产品应进行快速检测和实验室检验。9.3 疑似病死动物产品快速检测，符合下列条件之一的，可初步判定为病死动物产品。a)6.1 或 6.2 检测结果为阳性（）的。b)6.3 检测结果为阴性（）的。9.4 疑似病死动物产品实验室检验，符合下列条件之一的，判定为病死动物产品。a)7.1 检验结果为阴性（）的。b)7.2 或 7.3 检验结果为阳性（）的。9.5 特殊检验送检结果诊断为动物疫病的，判定为病死动物产品。10 处理 确认为病死动物产品的处理，执行 GB 16548、中华人民共和国动物防疫法等规定。DB13/T 14822011 5 A A 附 录 A（规范性附录）病死动物产品检测方法 A.1 快速检测 A.1.1 滤纸条血液浸润法 A.1.1.1 操作方法 将试验用干滤纸条裁成长 5 cm、宽 0.5 cm 的滤纸条，取滤纸条一张将其一端插入被检肉品的新切口内 1 cm-2 cm 深，经 2 min-3 min 观察浸润情况。A.1.1.2 结果判定 滤纸条被血样液浸润且超出插入部分 2 mm 以上为阳性（）；无血样浸润为阴性()。A.1.2 愈创木脂酊反应法 A.1.2.1 操作方法 从采样肉品切取片状肌肉（3 cm2 cm0.5 cm）一块，新鲜切面朝上平置于培养皿中，在肉片上滴加 5愈创木脂酊 5ml、3过氧化氢溶液 5-10 滴。A.1.2.2 结果判定 被检肉片变为深蓝色，肉片周围溶液呈深蓝色为阳性（）；被检肉片不变颜色，肉片周围溶液呈淡蓝色环或无变化为阴性（）。A.1.3 过氧化物酶快速法 A.1.3.1 操作方法 自采样肉品切取片状肌肉（3 cm2 cm0.5 cm）一块，新鲜切面朝上平置于培养皿中，在肉片上滴加 1过氧化氢溶液 2 滴、0.2联苯胺乙醇溶液 5 滴。A.1.3.2 结果判定 被检肉片出现蓝绿色斑点为阳性（）；被检肉片无斑点出现为阴性（）。A.2 实验室检验 A.2.1 过氧化物酶反应法 A.2.1.1 操作方法 DB13/T 14822011 6 A.2.1.1.1 称取样品肌肉10 g，研碎，置于100 ml烧杯中，加入蒸馏水30 ml，浸泡15 min，期间振摇数次，过滤，即为10：30肉浸液，待检。已知健康动物肉品肉浸液制作方法同被检样品肉浸液。A.2.1.1.2 取试管3支，分别设定为试验管、对照管、对照管：A.2.1.1.3 试验管加入被检肉品肉浸液2毫升，对照管加入已知健康动物肉品肉浸液2 ml，对照管加入蒸馏水2 ml。A.2.1.1.4 分别向3支试管加入0.2联苯胺乙醇溶液5滴，充分振荡。A.2.1.1.5 分别向3支试管加入1过氧化氢2滴，稍加振荡，观察颜色变化。A.2.1.2 结果判定 A.2.1.2.1 试管内肉浸液在0.5 min-1.5 min内呈蓝绿色、灰绿色为阳性（）。A.2.1.2.2 试管内肉浸液颜色变为浅灰色、灰褐色，浑浊为阴性（）。A.2.1.2.3 加入蒸馏水的试管内液体颜色不发生变化。A.2.2 硫酸铜肉汤反应法 A.2.2.1 操作方法 A.2.2.1.1 称取样品肌肉10 g，剪碎，置于100 ml三角烧瓶中，加入蒸馏水30 ml，搅均后加塞，置水浴中煮沸10 min，趁热过滤，即为10：30肉汤，冷却至室温，待检。已知健康动物肉品肉汤制作方法同被检样品肉汤。A.2.2.1.2 取试管3支，分别设定为试验管、对照管、对照管：A.2.2.1.3 试验管加入被检肉品肉汤2毫升，对照管加入已知健康动物肉品肉汤2毫升，对照管加入蒸馏水2 ml。A.2.2.1.4 分别向3支试管加入5硫酸铜溶液5滴，混均，静置，观察反应。A.2.2.2 结果判定 A.2.2.2.1 试管内肉汤出现明显浑浊为阳性（）。A.2.2.2.2 试管内肉汤澄清透明为阴性（）。A.2.2.2.3 加入蒸馏水的试管内液体颜色不发生变化。A.2.3 微生物毒素呈色反应法 A.2.3.1 操作方法 A.2.3.1.1 无菌称取样品肌肉10 g，剪碎；加入灭菌生理盐水20 ml，4氢氧化钠溶液10滴，研磨成粥状；置于100 ml三角烧瓶中，加热至沸，冷却，滴加5草酸溶液5滴，过滤，即为10：20提取液，待检。已知健康动物肉品提取液制作方法同被检样品提取液。A.2.3.1.2 取灭菌试管3支，分别设定为试验管、对照管、对照管：A.2.3.1.2.1 试验管加入待检样品提取液2 ml、对照管加入健康动物肉品提取液2 ml、对照管加入灭菌生理盐水2 ml；DB13/T 14822011 7 A.2.3.1.2.2 分别向3支试管滴加1甲酚蓝乙醇溶液1滴；A.2.3.1.2.3 分别向3支试管滴加0.5硝酸银溶液3滴；A.2.3.1.2.4 分别向3支试管滴加40盐酸溶液1滴；A.2.3.1.2.5 将3支试管振摇混均后，分别滴加1高锰酸钾溶液2-3滴，振摇混均，观察结果。A.2.3.2 结果判定 A.2.3.2.1 试管内肉品提取液显示蓝紫色或蓝绿色为阳性（）。A.2.3.2.2 试管内提取液猪肉显红紫色或红褐色，牛、羊肉显浅褐色，禽肉显灰白色为阴性（）。病死动物肉品：显示蓝色或蓝绿色。A.2.3.2.3 加入蒸馏水的试管内液体颜色不发生变化。_