ICS65.120B46DB13河北省地方标准DB13/T1095-2009饲料用酶制剂中a一淀粉酶活力的测定分光光度法2009-06-17发布2009-07-02实施河北省质量技术11/.督局发布DB13/T1095-2009前吉.二刁本标准由河北省畜牧兽医局提出。本标准起草单位:河北省饲料产品质量监督检验站、河北农业大学、河北省畜牧站。本标准主要起草人:武英利、王萍、赵国先、李海龙、霍韶瑜、李广东。DB13/T1095-2009饲料用酶制剂中a一淀粉酶活力的测定—分光光度法,范围本标准规定了饲料用酶制剂中。一淀粉酶活力的单位定义和测定方法。本标准适用于饲料用酶制剂中。一淀粉酶活力的测定。64规范性引用文件下列文件通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法QB/T1803-1993工业酶制剂通用试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1a一淀粉酶活力单位在609C,pH=6.0的条件下,lh液化lg可溶性淀粉所需的酶的量,规定为一个酶活力单位。4原理。一淀粉酶能将淀粉分子链中的a-1,4葡萄糖昔键随机切断成长短不一的短链糊精、少量麦芽糖和葡萄糖,而使淀粉对碘呈蓝紫色的特异性反应逐渐消失,呈红棕色,其颜色消失的速度与酶活性有关故可通过固定反应后的吸光度计算其酶活力。仪器和设备5.1分析天平,感量为0.0001905.2研钵。5.3容量瓶,50mL,100mLo5.4电炉,温度可调。5.5恒温水浴锅,温控范围30℃土0.19C^-609C10.1℃5.6烧杯,250mL,500mLo5.7酸度计,精度0.01。5.8秒表。5.9离心机,6000r/min(2400Xg)5.10移液器,精度10LLo5.11分光光度计。5.12比色管,25mLo6试剂DB13/T1095-2009方法中所用试剂,除另有规定外均为分析纯试剂,所用水应符合GB/T6682-2008三级以上用水要求。6.1碘。6.2可溶性淀粉。6.3磷酸氢二钠(Na2HPO4.12H20)o6.4柠檬酸(C6H807"H2O)o7溶液7.1浓碘液称取碘11g、碘化钾22g,用少量水使完全溶解,然后用水定容至500mL,贮存于棕色瓶中。7.2工作用碘液吸取浓碘液2.00mL,加碘化钾20g,用水溶解并定容至500mL,贮存于棕色瓶中,现用现配。7.3可溶性淀粉溶液,浓度20叭称取105℃土2℃干燥至恒重的可溶性淀粉2.000g(精确至0.001g),用少量水调成稀糊状,在搅动状态下缓缓加入70mL沸水,继续煮沸至溶液透明,冷却,转...