DB11T 1804-2020 实验动物 繁育与遗传监测.pdf

ICS 65.020.30 CCS B 44 DB11 北京市地方标准 DB11/T 18042020 代替 DB11/T 828.32011，DB11/T 1053.32013，DB11/T 1461.12017，DB11/T 1461.22017，DB11/T 1461.32017，DB11/T 1461.42018，DB11/T 1461.52018 实验动物 繁育与遗传监测 Laboratory animalBreeding and genetic monitoring 2020-12-24 发布 2021-04-01 实施 北京市市场监督管理局 发 布 DB11/T 18042020 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 缩略语.2 5 遗传分类及命名原则.2 6 繁殖方法.4 7 遗传监测.5 附录 A（规范性）实验动物微卫星 DNA 标记遗传检测方法.8 附录 B（规范性）实验斑马鱼 SNP 遗传标记的检测方法.26 附录 C（规范性）MHC 单倍型实验鸡和实验鸭直接测序检测方法.29 参考文献.34 DB11/T 18042020 II 前 言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件替代DB11/T 828.32011实验用小型猪 第3部分:遗传质量控制、DB11/T 1053.32013实验用鱼 第3部分:遗传质量控制、DB11/T 1461.12017实验动物 遗传质量控制 第1部分:实验用猪、DB11/T 1461.22017实验动物 遗传质量控制 第2部分:实验用牛、DB11/T 1461.32017实验动物 遗传质量控制 第3部分:实验用羊、DB11/T 1461.42018实验动物 繁育与遗传监测 第4部分:实验用狨猴、DB11/T 1461.52018实验动物 繁育与遗传监测 第5部分:实验用长爪沙鼠，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：a)删除了“实验鱼命名原则”相关内容（见 DB11/T 1053.32013 的 4.2）；b)增加了“实验雪貂、实验猫、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽繁育与遗传监测”相关内容（见5、6、7、附录 A、附录 C）。本文件由北京市科学技术委员会提出并归口。本文件由北京市科学技术委员会组织实施。本文件起草单位：首都医科大学、中国食品药品检定研究院、北京市实验动物管理办公室、中国医学科学院医学实验动物研究所、中国人民解放军军事医学研究院、国家卫生健康委员会科学技术研究所、杭州医学院、吉林大学、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、北京市标准化研究院、北京华阜康生物科技股份有限公司、北京康蓝生物技术有限公司、中国科学院水生生物研究所、北京大学。本文件主要起草人：陈振文，李根平，贺争鸣，李长龙，刘云波，孙德明，岳秉飞，李奎，杨述林，冯书堂，杜小燕，向志光，王洪，董罡，任文陟，陈洪岩，陈继兰，巩薇，冯育芳，郭红刚，王锡乐，刘文菊，樊子风，萨晓婴，刘先菊，丛日旭，腾永康，肖冲，魏杰，于鹏丽,牟玉莲，公维华，张宁波，徐玲玲，崔宗斌，张博，孙荣泽，韩凌霞。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：首次发布分别为DB11/T 828.32011、DB11/T 1053.32013、DB11/T 1461.12017、DB11/T 1461.22017、DB11/T 1461.32017、DB11/T 1461.42018、DB11/T 1461.52018；本次为第一次修订。DB11/T 18042020 1 实验动物 繁育与遗传监测 1 范围 本文件规定了实验动物的遗传分类及命名原则、繁殖方法和遗传检测。本文件适用于实验小型猪、实验猪、实验牛、实验羊、实验狨猴、实验长爪沙鼠、实验猫、实验雪貂、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽、实验鱼（斑马鱼和剑尾鱼）的繁育和遗传监测。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 2416 东北细毛羊 GB/T 3157 中国荷斯坦牛 GB 14923 实验动物 哺乳类实验动物的遗传质量控制 GB/T 19166 中国西门塔尔牛 GB/T 19376 波尔山羊种羊 GB/T 22283 长白猪种猪 GB/T 22284 大约克夏猪种猪 GB/T 22285 杜洛克猪种猪 GB/T 22909 小尾寒羊 GB/Z 34792 实验动物 引种技术规程 NY/T 14 高产奶牛饲养管理规范 NY 625 迪卡配套系猪种猪 NY/T 1339 肉牛育肥良好管理规范 NY/T 1446 种公牛饲养管理技术规程 NY/T 1673 畜禽微卫星DNA遗传多样性检测技术规程 NY/T 1901 鸡遗传资源保种场保种技术规范 NY/T 2662 标准化养殖场 奶牛 NY/T 2665 标准化养殖场 肉羊 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 实验动物 laboratory animal 经人工饲育，对其携带的微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、DB11/T 18042020 2 教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。来源：GB 14925-2010，3.1 3.2 实验种群 experimental population 以远交方式进行繁殖生产的实验动物群体。3.3 封闭群 closed colony 以非近亲交配方式进行繁殖生产，在不从外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上的实验动物种群。3.4 近交系 inbred strain 通过近亲交配的繁殖方式培育，近交系数（inbreeding coefficient）高于99%的实验动物群体。3.5 单倍型群体 haplotype population 通过近亲交配繁殖方式培育出的单倍体基因型一致的实验动物群体。3.6 杂交群 hybrids 由两个不同近交系杂交产生的后代群体。注：子一代简称F1。4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。PCR：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）SNP:单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism)STR:短串联重复序列（Short Tandem Repeat）5 遗传分类及命名原则 5.1 遗传分类 根据不同品种品系动物及个体间遗传差异将实验动物分为实验种群、封闭群、近交系、单倍型群体和杂交群，具体符合表1的要求。表1 实验动物遗传分类表 实验动物群体 遗传分类 实验长白猪 实验种群 实验大约克夏猪 DB11/T 18042020 3 表 1 实验动物遗传分类表（续）实验动物群体 遗传分类 实验杜洛克猪 实验种群 实验中国荷斯坦牛 实验西门塔尔牛 实验波尔山羊 实验小尾寒羊 实验东北细毛羊 实验狨猴 实验猫 实验雪貂 实验长爪沙鼠 封闭群 实验鸡 实验鸭 实验鹅 实验鸽 实验小型猪 实验斑马鱼 实验剑尾鱼 实验小型猪 近交系 实验斑马鱼 实验剑尾鱼 实验鸡 单倍型群体 实验鸭 5.2 命名原则 5.2.1 实验种群 在原有的品种品系名称前面加上实验，如实验长白猪。5.2.2 封闭群 由24个大写英文字母命名。种群名称前标明保持者的英文缩写名称，第一个字母大写，后面的字母小写，宜不超过4个字母。保持者与种群名称之间用冒号分开。5.2.3 近交系 以大写英文字母或大写英文字母加阿拉伯数字命名，符号应简短。5.2.4 单倍型群体 以单倍体基因型英文名称（或缩写）加英文字母和阿拉伯数字命名，符号应简短。5.2.5 杂交群 DB11/T 18042020 4 以雌性亲代名称在前，雄性亲代名称在后，二者之间以符号“”相连。将以上部分用括号括起，在其后表明杂交代数，以F1Fn表示。6 繁殖方法 6.1 实验种群 6.1.1 引种 选择双亲健康、无遗传疾病、繁殖性能好、体貌符合品种特征的动物作为种用动物。6.1.2 繁育方法 实验猪按照NY 625的规定进行。实验西门塔尔牛按照NY/T 1339和NY/T 1446规定执行，实验中国荷斯坦牛按照NY/T 14和NY/T 2662的规定进行。实验羊应按照GB 14923和NY/T 2665的规定进行。实验狨猴和雪貂应按GB 14923的规定进行。实验猫按照雌雄5:1以上比例进行繁殖。6.2 封闭群 6.2.1 引种 作为繁殖用种子的封闭群动物应三代以内无共同亲代并符合GB/Z 34792对封闭群种用动物的要求。封闭群实验长爪沙鼠和实验鸽引种数量不少于25对。封闭群实验小型猪引种数量不少于13对（循环交配方式繁殖）或25对（随机交配方式繁殖）。封闭群实验鱼（斑马鱼和剑尾鱼）引种数目不少于100尾。实验鸡、实验鸭和实验鹅引种规模按照NY/T 1901执行。其他封闭群实验动物引种规模按照GB 14923规定执行。6.2.2 繁育方法 封闭群实验小型猪、实验长爪沙鼠和实验鸽繁殖方法按照GB 14923的规定执行。实验鸡、实验鸭、实验鹅应按照NY/T 1901的规定进行。6.3 近交系 6.3.1 引种 作为繁殖用种子的近交系动物应符合GB/Z 34792对近交系种用动物的要求。6.3.2 繁育方法 近交系实验动物可分为基础群（foundation stock）、血缘扩大群（pedigree expansion stock）和生产群（production stock），当近交系动物生产供应数量不是很大时，可不设血缘扩大群，仅设基础群和生产群。各基础群、血缘扩大群和生产群的繁育方式按照GB 14923执行。6.4 单倍型群体 6.4.1 引种 DB11/T 18042020 5 作为繁殖用种子的单倍型群体动物按照GB/Z 34792的规定执行。6.4.2 繁育方法 以全同胞或半同胞兄妹交配方式进行。6.5 杂交群 将不同品系实验动物的亲代雌性与亲代雄性杂交，即可得到F1实验动物。7 遗传监测 7.1 遗传要求 遗传满足以下要求：体貌符合品种特征；谱系记录清楚；繁殖方法科学；群体遗传符合品种特征；遗传质量检测合格。7.2 遗传检测 7.2.1 检测频率 每12个月至少进行一次检测。7.2.2 抽样 7.2.2.1 实验种群和封闭群抽样数量 从每个种群中随机抽取非同窝成年实验动物的血液或其他组织，雌雄各半。抽样数量按照表2规定执行。表2 实验种群和封闭群遗传检测抽样数量 群体大小（只/头/羽）抽样数量（只/头/羽）100 15 100 30 7.2.2.2 近交系实验动物抽样数量 基础群留种动物的双亲均应进行遗传检测；各生产群体采取随机抽取非同窝成年动物雌雄各半，抽样数量按照表3规定执行。表3 近交系实验动物遗传检测抽样数量 群体大小（只/头/羽/尾）抽样数量（只/头/羽/尾）100 6 100 群体数量6%DB11/T 18042020 6 7.2.3 遗传检测方法 采用群体遗传结构评估、微卫星DNA标记、SNP分子标记和直接测序等检测方法，在有检测能力的实验室进行，具体按照表4规定执行。表4 遗传检测方法适用实验动物群体 实验动物群体 遗传分类 检测方法 执行标准或方法 实验长白猪 实验种群 群体遗传结构评估 按照 GB 22283 的规定执行 实验大约克夏猪 按照 GB 22284 的规定执行 实验杜洛克猪 按照 GB 22285 的规定执行 实验中国荷斯坦牛 按照 GB/T 3157 的规定执行 实验西门塔尔牛 按照 GB 19166 的规定执行 实验波尔山羊 按照 GB 19376 的规定执行 实验小尾寒羊 按照GB/T 22909的规定执行 实验东北细毛羊 按照 GB/T 2416 的规定执行 实验狨猴 微卫星 DNA 标记检测法 按照附录 A 的规定执行 实验猫 实验雪貂 实验长爪沙鼠 封闭群 实验鸡 实验鸭 实验鹅