DB43T 701-2012 饲料中硝呋烯腙的测定 高效液相色谱法.pdf

DB43/T701一20125仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。5.2分析天平：感量0.00001g和0.001g。5.3固相萃取装置。5.4旋涡混匀器。5.5离心机。5.6超声波清洗机。6采样6.1采样步骤：按GB/T14699.1一2005的规定执行。6.2试样的制备：将采集的饲料样品，用四分法缩减分取200g,粉碎过0.45mm孔径的筛，充分混匀，装入磨口瓶中备用。7测定步骤7.1样品提取称取试样5g(精确到0.001g),置于50mL离心管中，加入25.0mL提取液，涡旋混合均匀，超声提取l0min,6000r/min离心l0min,取上清液于具塞试管中，重复上述操作，合并两次上清液，旋涡混匀，备用。7.2净化将SPE柱依次用乙腈5mL、二甲亚砜-乙腈溶液5mL活化，取上述提取液（配合饲料15.0mL、.浓缩饲料10.0mL、添加剂预混合饲料5.0mL)过柱，用二甲亚砜-乙腈溶液5mL淋洗，真空抽千。用4%氨水-二甲亚砜-乙腈溶液5.0mL洗脱，收集洗脱液，混匀，过0.45m微孔滤膜，供高效液相色谱分析。7.3HPL0测定。7.3.1高效液相色谱条件色谱柱：C18柱(250mm4.6m,5m),或相当者。流速：1mL/min。进样量：20mL。检测波长：382nm。7.3.2高效液相色谱测定取适量试样溶液和相应的标准工作溶液，以组分的保留时间定性，以色谱峰面积积分值做单点或多点校准，外标法定量。标准工作液及试样液中硝呋烯腙的响应值均应在仪器检测的线性范围艺内。硝呋烯腙高效液相色谱图参见附录A,硝呋烯腙标准工作液色谱图参见附录A中图A.1,试样中添加硝呋烯腙对照品色谱图参见附录A中图A.2。7.3.3空白实验