DB34T 2407-2015 大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 67.040 C 53 DB34 安徽省地方标准 DB 34/T 24072015 大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定 高效液相色谱法 Determination of chlorantraniliprole residue in rice by HPLC 文稿版次选择 2015-07-14 发布 2015-08-14 实施安徽省质量技术监督局 发 布 DB34/T 24072015 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所、农业部农产品质量安全风险评估实验室（合肥）、安徽科威农药重金属残留检测中心。本标准起草人：段劲生、高同春、王梅、孙明娜、董旭、褚玥、杨通、肖青青。DB34/T 24072015 1 大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了大米中氯虫苯甲酰胺残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定。本标准的方法检出限为 0.01 mg/kg。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6379.1 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分:总则与定义 GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样用乙腈和盐酸混合溶液提取后，经中性氧化铝柱层析净化，用高效液相色谱紫外检测器检测，外标法定量。4 试剂与材料 4.1 水为 GB/T 6682 规定的一级水。4.2 乙腈。4.3 丙酮。4.4 石油醚：6090。4.5 乙腈：色谱纯。4.6 浓盐酸。4.7 氯化钠。4.8 无水硫酸钠：用前在 650下灼烧 4 h 后备用。4.9 中性氧化铝：100200 目，用前 130处理 4 h，加水 5减活，备用。4.10 盐酸溶液：2.0 mol/L。4.11 氯虫苯甲酰胺标准品：纯度 99。4.12 0.45 m 微孔过滤膜 4.13 标准溶液 氯虫苯甲酰胺标准储备液:准确称取氯虫苯甲酰胺 0.0100 g，置于 10.0 mL 容量瓶中，乙腈溶解并定容至刻度，配置成浓度为 1000 mg/L 储备液，于 05下避光保存。DB34/T 24072015 2 氯虫苯甲酰胺标准工作液：取 1000g/mL 氯虫苯甲酰胺储备液，用乙腈稀释，配成质量浓度分别为 8.0 mg/L、4.0 mg/L、2.0 mg/L、1.0mg/L、0.5 mg/L 和 0.25 mg/L 的标准工作溶液，待用。标准工作液需现配现用。5 主要仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪：配紫外检测器。5.2 旋转蒸发仪。5.3 真空泵。5.4 水浴恒温振荡器。5.5 氮吹仪 5.6 电子天平：感量 0.1 g 和 0.1 mg。6 分析步骤 6.1 样品的采集、贮存及试样制备方法 将不少于 1000 g 大米（已脱壳）混匀，四分法取样，放入食品加工机粉碎，过 20 目筛，制成试样，放入试样瓶中密封，做上标记，并置于-20条件下保存，待测。6.2 试样处理 6.2.1 提取 准确称取 25 g（精确至 0.1 g）制备好的试样于锥形瓶中，向锥形瓶中加 10 mL 盐酸溶液和 20 mL水浸泡 20 min，再加 80 mL 乙腈（4.1）浸泡过夜，振荡提取 1 h，过滤，残渣用 40 mL 乙腈（4.1）分两次洗涤，合并滤液于分液漏斗中，加 5.0 g 氯化钠，振摇 3 min，静置分层，弃去下层水相，乙腈相经无水硫酸钠（4.7）干燥后，用旋转蒸发仪于 35水浴下浓缩至近干，待柱层析净化。6.2.2 净化 在玻璃层析柱中依次装填 2.0 cm 高无水硫酸钠、5.0 g 中性氧化铝（4.8）、2.0 cm 高无水硫酸钠，层析柱先用 20 mL 石油醚+丙酮（1+1，体积比）预淋洗，弃去，然后转移样品液至柱上，用 50 mL 石油醚+丙酮（1+1，体积比）洗脱，重复一次，收集洗脱液，用旋转蒸发仪于 35水浴下浓缩至近干，氮吹仪用氮气吹干，乙腈（4.4）定容至 2.0 mL，过 0.45m 滤膜，供高效液相色谱仪测定。6.3 测定 6.3.1 高效液相色谱条件 a)色谱柱：C18 柱，5 m，250 mm 4.6 mm（内径）或相当者；b)柱箱温度：35；c)流动相：乙腈+水（1+1，体积比）；d)流速：0.8 mL/min；e)检测波长：220 nm；f)进样体积：10 L。6.3.2 液相色谱测定 DB34/T 24072015 3 取氯虫本甲酰胺标准工作溶液系列（4.12.2）及试样溶液各 10L，注入高效液相色谱仪进行分析，用外标法定量。6.4 平行试验 按以上步骤，对同一试样进行平行测定。6.5 空白实验 除不称取试样外，均按上述步骤测定。7 结果计算 试样中的氯虫本甲酰胺含量按公式（1）计算：mVCR .(1)式中：R 样品中氯虫本甲酰胺残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C 从标准曲线上得到的待测样液中氯虫本甲酰胺的浓度，单位为毫克每升（mg/L)；V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m 称取的试样量，单位为克（g）。注：计算结果应扣除空白值。8 方法的准确度和精密度 8.1 准确度 本方法在 0.01 mg/kg1.0 mg/kg 之间添加浓度的回收率在 80110之间。8.2 精密度 本标准精密度数据是按照 GB/T 6379.1 和 GB/T 6379.2 的规定确定的，获得重复性和再现性的值是以 95的可信度来计算，本标准方法的精密度数据参加附录B。9 高效液相色谱参考图 见附录A。DB34/T 24072015 4 A A 附 录 A（资料性附录）氯虫苯甲酰胺标准溶液色谱图（1.0 mg/L）图A.1 氯虫苯甲酰胺标准溶液色谱图（1.0 mg/L）DB34/T 24072015 5 B B 附 录 B（资料性附录）氯虫苯甲酰胺精密度数据表 表B.1 氯虫苯甲酰胺精密度数据表 名称 含量（mg/kg）重复性限 r 再现性限 R 含量（mg/kg）重复性限 r 再现性限 R 氯虫苯甲酰胺 0.01 0.0005 0.0016 0.5 0.0198 0.0380 _