DB34T 814-2008 饲料中硒的测定 原子荧光法.pdf

ICS DB34 备案号：安徽省地方标准DB34/T 8142008饲料中硒的测定 原子荧光法 2008-08-01 发布 2008-08-01 实施安徽省质量技术监督局 发布 DB34/T 8142008 I 前 言 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。本标准由安徽省质量技术监督局批准。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所。本标准主要起草人：丁在亮、刘发全、张莉、刘红云。本标准自2008年8月1日首次发布。DB34/T 8142008 1 饲料中硒的测定 原子荧光法 1 范围 本标准规定了用原子荧光法测定饲料中硒的方法 本标准适用于饲料中硒的测定,检出限为0.5ng/mL。2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1-1993 饲料采样方法 3 原理 试样经酸加热消化后，在6mol/L盐酸(HCl)介质中，将试样中的六价硒还原成四价硒，用硼氢化钠(NaBH4)或硼氢化钾(KBH4)作还原剂，将四价硒在盐酸介质中还原成硒化氢(H2Se)，由载气(氩气)带入原子化器中进行原子化，在硒特制空心阴极灯照射下，基态硒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比。与标准系列比较定量。4 试剂 实验室用水应符合 GB/T 6682-1992 中二级用水的规格，使用的试剂除另有说明外，应为分析纯。4.1 硝酸(优级纯)。4.2 高氯酸(优级纯)。4.3 盐酸(优级纯)。4.4 氢氧化钠(优级纯)。4.5 盐酸 6mol/mL。4.6 混合酸:硝酸+高氯酸(4+1)混合酸。4.7 硼氢化钠溶液(8g/L):称取 8.0g 硼氢化钠(NaBH4),溶于氢氧化钠溶液(5g/L)中，然后稀释至1000mL。4.8 铁氰化钾(100g/L):称取 10.0g 铁氰化钾(K3Fe(CN)6),溶于 100mL 水中，混匀。4.9 硒标准储备液:精确称取 100.0mg 硒(光谱纯)，溶于少量硝酸中，加 2mL 高氯酸（4.2），置水浴中加热 3h4h，冷却后再加 8.4mL 盐酸（4.3），再置沸水浴中 2min，冷却至室温后，稀释至 1000mL，其盐酸浓度为 0.1mol/L，此储备液浓度为每毫升相当于 100g 硒。贮存于冰箱中，备用。4.10 硒标准应用液:取 100g/mL 硒标准储备液 1.0mL，稀释至至 100m L，此应用液浓度为 1g/mL。5 仪器 5.1 原子荧光光度计。5.2 分析天平 分度值 0.0001g。5.3 自动控温消化炉。DB34/T 8142008 2 5.4 电热板（3000W）或可调温电炉（600W）。6 试样的制备 按 GB/T 14699.1-1993 饲料采样方法采样，选取有代表性的饲料样品，至少500g，四分法缩减至200g，粉碎，使全部通过1mm孔筛，混匀，贮于磨口瓶中低温保存备用。7 分析步骤 7.1 试样消解 7.1.1 一般饲料样品（配合饲料、浓缩饲料、单一饲料）的处理：称取 0.5g2.0g 样品于 150mL 高型烧杯内，加 10.0mL 混合酸(4.6)及几粒玻璃珠，盖上表面皿冷消化，12h 后于电热板上加热，并及时补加混合酸（使烧杯内溶液不少于 10.0mL）。当溶液变为清亮无色并伴有白烟时，再继续加热至剩余体积 2mL 左右，切不可蒸干。冷却，再加 5mL6mol/L 盐酸(4.5)，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，以完全将六价硒还原成四价硒。冷却，转移至 50mL 容量瓶中，用水稀释到刻度。同时做空白试验。7.1.2 高含硒量样品（预混合饲料）的处理：对于每千克饲料含硒在 1mg 以上含有机物的样品，按（7.1.1）处理后再准确取一定体积溶液再稀释后（使溶液含硒量0.2g/mL）测定；对于以石粉为载体的预混料，称取 1g5g 样品（精确到 0.0001g），于 150mL 高型烧杯中，加 10mL 水和 10mL 硝酸（4.1）（先逐滴加入硝酸直至不再发生气泡，然后再全部加入），煮沸至烧杯中溶液剩下5mL左右时再加10.0mL混合酸(4.6)及几粒玻璃珠，盖上表面皿冷消化，12h 后于电热板上加热，并及时补加混合酸。当溶液变为清亮无色并伴有白烟时，再继续加热至剩余体积 2mL 左右，切不可蒸干。冷却，再加 5mL6mol/L盐酸(4.5)，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，以完全将六价硒还原成四价硒。冷却，转移至 50mL 容量瓶中，用超纯水稀释到刻度，然后准确取一定体积的溶液再稀释后（使溶液含硒量0.2g/mL）测定。同时做空白试验。7.1.3 吸取 10mL 试样消化液于 15mL 离心管中，加盐酸(4.3)2mL，铁氰化钾溶液(4.8)1mL,混匀待测。7.2 标准溶液的配制 分别取0.0mL，0.1mL，0.2mL，0.3mL，0.4mL，0.5mL标准应用液(4.10)于15mL离心管中用水稀释至10mL,再分别加盐酸(4.3)2mL，铁氰化钾(4.8)1mL,混匀，制成标准工作曲线。7.3 测定 7.3.1 仪器参考条件:负高压:340V;灯电流:100mA;原子化温度:800;炉高:8mm;载气流速:500mL/min;屏蔽气流速:1000mL/min;测量方式:标准曲线法;读数方式:峰面积;延迟时间:1s;读数时间:15s;加液时间:8s;进样体积:2mL。7.3.2 标准系列及试样的测定 按7.3.1的条件设定仪器，待炉温升至800后，稳定10 min20min后开始测量。连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。转入试样测量，分别测定试样空白和试样消化液，每测不同的试样前都应清洗进样器。试样测定结果按以下公式计算。8 结果计算 8.1 计算公式 X 100010001000)(0mVcc 式中:X 试样中硒的含量 mg/kg(或mg/L)；C 试样消化液测定浓度(ng/mL)；DB34/T 8142008 3 CO 试样空白消化液测定浓度(ng/mL)；M 试样质量(体积)g(或mL)；V 试样消化液总体积(mL)。8.2 结果表示 每个试样平行测定两次，以其算术平均值作为结果。计算结果精确到0.001 mg/kg。9 允许误差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。