YYT 0578-2005 沙门、志贺菌属琼脂培养基.pdf

只41 1.1 0 0yy中 华 人 民 共 和 国 医 药 行 业 标 准Y Y/T 0 5 7 8-2 0 0 5沙门、志贺菌属琼脂培养基S a l mo n e l l a-S h i g e l l a a g a r m e d i u m2 0 0 5-1 2-0 7发布2 0 0 6-1 2-0 1 实施国家食品药品监督管理局发 布Y Y/T 0 5 7 8-2 0 0 5月q舌 本标准全部技术条款为强制性 本标准是在参考 中华人民共和国药典(2 0 0 5年版)基础上，结合中国国情及实际情况和要求而制定。本标准附录A为规范性附录。本标准由国家食品药品监督管理局提出。本标准由中国药品生物制品检定所归口。本标准由中国药品生物制品检定所负责起草。本标准主要起草人:曲守方、孙彬裕、刘艳、高尚先。YY/T 0 5 7 8-2 0 0 5沙门、志贺菌属琼脂培养基范围 本标准规定了沙门、志贺菌属琼脂培养基的质量要求、检验方法、使用说明、标志、标签以及包装、运输、贮 存 本标准适用于沙门和志贺菌属分离培养的沙门、志贺菌属琼脂培养基。2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注 日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。G B/T 1 9 1 包装储运图示标志 中华人民共和国药典(2 0 0 5 年版)J J F 1 0 7 0-2 0 0。定量包装商品净含量计量检验规则术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。3.1 培养基c u l t u r e m e d i u m 由人工方法配合而成的，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存使用的混合营养物制品3.2 质控菌株q u a l i t y c o n t r o l s t r a i n 质控菌株通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物。3.3 菌落形 成单位 c o l o n y f o r m i n g u n i t,c f u 菌落形成单位是指在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，以其表达活菌的数量。培养基配方单位为:g/Lo蛋 白陈硫代 硫酸钠牛肉浸出粉中性 红乳糖亮绿牛胆盐琼脂构椽 酸钠构椽 酸铁馁5.0 g8.5 g5.0 g0.0 2 5 g1 0.0 g0.0 0 0 3 3 g8.5 g1 2,0 g-1 4.0 g8.5 g1.0 gYY/T 0 5 7 8-2 0 0 55质t要求5.1 理化要求5.1.1 外观 应为均一的淡紫红色至淡紫色粉末。5.1.2 装t 应不低于标示量。5.1.3 p H值 灭菌后，2 0 0C 2 5 时，该培养基 P H值应为 7.2 士。.1 e5.1.4 干燥失重 应不超过 G.。%。5.2生长试验 该培养基接种质控菌株，生长情况应符合表 7 要求。表 1 生长试验观察结果质 控 菌种观 察 结 果鼠伤寒沙门菌福氏志贺菌粪 肠 球 菌大 肠 埃 希 菌生长良好，无色菌落，有黑心生长良好，无色菌落抑制(完全)抑制(部分至完全)，粉红至玫瑰红菌落6检验 方法6.1 理化检验6.1.1 外 观 采用 目测法，在自然光线明亮处目视，应符合 5.1.1 的规定。6.1.2 装f 按 J J F 1 0 7 0-2 0 0 0，测定装量，应符合 5.1.2的规定6.1.3 p H值 按使用说明配制培养基，取 6 m1新鲜配制 的液体培养基，加新鲜蒸馏水至 4 0 m L，灭菌后，在2 0 0 C-2 5 时，按 中华人民共和国药典(2 0 0 5 年版)P H值测定法测定，应符合5.1.3的规定。6.1.4 干燥失重 按 中华人民共和国 药典(2 0 0 5 年版)干燥失重测定法，在6 0 时压力2.6 7 k P a(2 0 m m H g)以 下干燥至恒重，应符合 5.1.4 的规定。6.2 生长试验 按附录 A试验方法进行，结果应符合 5.2的规定7使用说明使用说 明至少应当具有下列 内容:a)产品名称、规格;b)酉 己 方;。)用途;d)使用方法;。)注意事项;)贮存条件与失效期;YY/T 0 5 7 8-2 0 0 59)生产单位名称、联系方式。8标志与标签标志与标签至少应当具有下列内容:a)执行标准号;b)产品注册证号;c)产品名称、规格、数量、批号;d)制造厂名称、商标和厂址;e)贮存条件和失效期。9 包装、运输、贮存9.1 包装 包装储运图示标志应符合GB/T 1 9 1的规定。包装容器应保证密封性 良好，不易破碎。9.2运输 培养基在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪浸淋，防止与酸碱物质接触，防止内外包装破损。9.3贮存 产品应置阴凉干燥处贮存YY/T 0 5 7 8-2 0 0 5 附录A (规范性 附录)沙门、志贺菌属琼脂培养基生长试验方法A.1 质控菌株 鼠 伤寒沙门菌(S u l m o n e l l a t y p h i m u r i u m)C MC C(B)5 0 2 2 0 福氏志贺菌(S h i g e l l a f l e z n e r i)C MC C(B)5 1 5 7 3 粪肠球菌(粪链球菌)(E n t e r o c o c c u s f a e c a l i s)C MC C(B)3 2 2 2 5 大肠埃希菌(E s c h e r i c h i ac o l i)C MC C(B)4 4 1 1 3 培养基生长试验可采用上述菌株或其他等同的标准菌株，所用的菌株传代次数不得超过 5 代(从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第。代)，并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学特性。不 应同时操作 2个 以上菌株。A.2方法A.2.1 无菌操作要求 培养基生长试验应严格遵守无菌操作，防止微生物污染 稀释液、培养基、实验器具等灭菌时，应照 中华人民共和国药典(2 0 0 5年版)灭菌法的要求，采用验证合格的灭菌程序灭菌A.2.2 菌种复苏 启开鼠 伤寒沙门菌、福氏志贺菌、粪链球菌、大肠埃希菌菌 种，用0.9%无菌氯化钠溶液。.3 m L制成菌 悬液，加至7 m L 营养肉汤培养基中，3 0 C-3 5 培养2 4 h oA.2.3 菌种传代 取 I ml上述复苏后的鼠伤寒沙门菌、福氏志贺菌、粪链球菌、大肠埃希菌新鲜培养物，加至 7 m I.营养肉汤培养基中，3 0 0C-3 5 培养 2 4 h oA.2.4 菌种增菌培养 接种上述传代后的鼠伤寒沙门菌、福氏志贺菌、粪链球菌、大肠埃希菌的新鲜培养物至营养肉汤或营养琼脂培养基中，3 0 0C-3 5 培养 1 8 h-2 4 h oA.2.5 菌悬液制备 将上述增菌培养后的鼠伤寒沙门菌、福氏志贺菌、粪链球菌、大肠埃希菌的新鲜培养物分别用。.9 0 0无菌氯化钠溶液制成每 I m 工 含菌数约相当于1 0 0 c f u-1 0 0 0 c f u 的 菌悬液。A.2.6 培养基接种 用蒸馏水或去离子水按说明上的浓度配制待检沙门、志贺菌属琼脂培养基，煮沸至完全溶解，稍冷后在每个平皿(直径为9 0 mm)中加人约 1 5 mL 2 0 m工，待冷却至室温凝固后进行检测。检测时，每只平皿加人。.I m L上述菌悬液。每种质控菌株接种 2只平皿，并用 I 个未接种的培养基平皿做空白对照，置 3 0 0C-3 5 培养 2 4 h-3 6 h，观察菌落生长情况，并记录结果。结果应符合 5.2的要求YY/T 0 5 7 8-2 0 0 5参考文献仁 1 G B 9 9 6 9.1-1 9 9 8 工 业产品使用说明书 总则 2 陈天寿主编.微生物培养基的制造与应用.北京 中国农业出版社.1 9 9 5 年 6 月仁 3 U S P/N F(A S I A N E D I T I O N)2 0 0 4 美国 药典(2 0 0 4 年版)促生长试验 4 1 WS/T 2 3 2-2 0 0 2 商业性微生物培养基质量检验规程 质控菌种仁 5 美国国家临床实验室标准委员会(NC C L S)商品微生物培养基的质量保证(M2 2-A)