TGTM 008-2022 微生物肥料菌落识别技术规范.pdf

团体标准T/GTM008-2022微生物肥料菌落识别技术规范Technical specifications for microbial fertilizer colonyidentification2022-10-14发布2022-10-25实施北京国农科技特派员创新战略联盟发布全国团体标准信息平台T/GTM008-2022I前前言言本文件按照GB/T 1.1-2020 标准化工作导则 第一部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由保定多微质检技术服务有限公司提出。本文件由北京国农科技特派员创新战略联盟归口。本文件起草单位：保定多微质检技术服务有限公司、微生物肥料技术研究推广中心、河北神微环境治理有限公司、河北省（保定）农用微生物菌种产业技术研究院。本文件主要起草人：景玉蓉、王文磊、张少骅、孟庆伟。本文件为首次发布。全国团体标准信息平台T/GTM008-20221微生物肥料菌落识别技术规范微生物肥料菌落识别技术规范1 1范围范围本文件适用于微生物肥料科研、生产和质检等领域的常见菌种菌落识别。2 2规范性引用文件规范性引用文件下列文件中的条款通过本文件的引用而成为本文件的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本文件。NY/T 1113-2006微生物肥料术语NY/T 2321-2013微生物肥料产品检验规程GB 20287-2006农用微生物菌剂3 3术语和定义术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1菌落colony微生物在固体基质上生长繁殖形成的肉眼可见的、具有一定形态特征的细胞聚集体。3.2纯培养物puer culture由单个细胞繁殖而来的培养物。3.3菌株strain属于同一种，但来源不同的单细胞或纯培养的后代。4 4识别原则识别原则4.1科学严谨用于识别的菌株应为纯培养物。4.2全面客观整个识别过程能够全面客观的反映菌株的特性。4.3准确完整识别的结果应与模式菌株和识别小组识别结果进行比对，进一步确定。5 5菌落识别流程菌落识别流程5.1确认培养基根据待识别目标菌种类相关标准确认培养基的准确性，一般分通用培养基和专用培养基。5.2确认培养时间5.2.1培养全国团体标准信息平台T/GTM008-20222在恒温培养箱倒置培养，一般情况：细菌3037培养12d、霉菌2528培养34d、放线菌2528培养57d。具体到某一种菌，其温度也有变化。5.2.2识别根据检测标准，待培养平皿的菌落全部整齐长成后进行识别。5.3菌落形态特征 观察5.3.1菌落大小观察菌落的大小，对比目标菌的大小差异度，大小比对控制在70以上。5.3.2菌落形状观察形状，目标菌菌落形态是否符合既定菌的形态。5.3.2.1质地观察质地，重点观察其透亮度、质地具体感官，相似度在70以上。5.3.2.2边缘观察边缘，目标菌菌落形态的边缘是否符合既定菌的边缘，重点观察其毛边的规则性，其相似度70以上。5.3.2.3隆起观察隆起，重点观察菌的隆起高度及每个菌落隆起的均匀度，其相似度在70以上。5.3.2.4颜色观察菌落颜色，在同样培养基上颜色要一致，不同颜色的差异度要低于30。5.3.2.5光泽度观察菌落的光泽度，观察目标菌落正面和背面的光泽度与透明度，其相似度在70以上。5.4光学显微镜观察挑取在适宜培养基上生长的幼龄培养物，涂片、革兰氏染色；显微镜下观察菌体形状、大小、革兰氏染色反应等；观察芽孢的有无、形态和着生位置，其相似度在70以上。5.5识别结果判定5.5.1小组成立在菌落识别流程中建立菌落识别小组，小组人员一般为35人。5.5.2目标菌的确定根据5.4和5.5菌落识别特征结果，均在70以上时直接确认目标菌。5.5.3判定方法根据5.4和5.5菌落识别特征结果，未全部达到70以上时启动识别小组判断法。全国团体标准信息平台T/GTM008-202235.5.4判定结果小组人员70以上人员确定目标菌是既定菌时，判定为该菌落；小组人员70以上人员确定目标菌不是既定菌时，判定为非该菌落，进入基因测序流程判定；无法判定的菌体识别，直接进行基因测序流程。全国团体标准信息平台