调节止桑时间降低僵蚕灰分含量的试验初报.pdf

调节止桑时间降低僵蚕灰分含量的试验初报谭立新 杨义 张明海 陈泉 任杰群(重庆三峡农业科学院,重庆 万州 4 0 4 1 5 5)摘 要 灰分含量是衡量僵蚕品质的重要指标之一。将供试的5龄起蚕接种白僵菌孢子后设置不同止桑时间处理组,测定僵蚕的灰分含量,旨在探究僵蚕体质量与灰分含量的相关性,为僵蚕的规模化生产提供技术参考。结果表明,止桑时间越早其濒死蚕个体质量及僵蚕个体质量越轻,灰分含量相对较少:当有5%1 0%的家蚕濒死或5%1 0%家蚕死亡1 2h后停止给桑(即正常给桑1次),僵蚕中灰分含量符合僵蚕质量检验标准;当5%1 0%的家蚕濒死足1 8h或家蚕感病后继续按正常给桑时间给桑(即正常给桑2次),僵蚕中的灰分含量便达不到僵蚕质量检验标准。因此建议:在僵蚕生产中,给5龄起蚕接种白僵菌孢子后有5%1 0%家蚕濒死1 2h时,仅正常给桑1次即终止给桑,可减少蚕体僵死前中肠内未消化的桑叶,从而在不降低僵蚕产量的前提下有效减少僵蚕中的灰分含量,以保证僵蚕的品质。关键词 僵蚕;蚕体质量;止桑时间;灰分含量 僵蚕是蚕蛾科家蚕(B o m b y xm o r i)45龄幼虫感染或人工接种白僵菌(B e a u v e r i ab a s s i a n a)而致死的干燥体1-2,亦称僵虫、天虫和姜虫等3。僵蚕是我国传统中药材,具有祛风解痉、化痰散结、清热解毒、消肿、调节脂肪代谢及神经功能等药效,在我国的5 1 3种常用中药方剂中,需要僵蚕作药材的就有1 4 9种,其中的6 4种儿科中成药就有2 9种用到僵蚕2-4,如七珍丸、太极升降丸、小儿奇应丸、小儿镇惊丸等。随着僵蚕在保健食品、医药等领域的广泛应用,其需求量正逐年增加。但是,现在规模化养蚕技术日臻成熟,养蚕过程中白僵病发生率很低,自然感染产生的僵蚕数量很少,不能满足中药市场对僵蚕的需求,因此规模化人工养殖生产僵蚕已成必然趋势。目前,我国僵蚕的主要产地有四川、江苏、云南、重庆等省区5-6,其中四川省生产的僵蚕在市场上占比最大,一定程度上缓解了中药市场上对僵蚕的供需矛盾。规模化生产僵蚕迫切需要构建相应的生产技术体系提高僵蚕的产量和品质,其中包括控制僵蚕灰分占比的技术措施。当前实施的僵蚕质量检验标准中规定杂质不得超过3%、水分不得过1 3.0%、黄曲霉毒素B 1含量不得超过5g/k g、总灰分含量不得超过7.0%4-5,7。上述僵蚕质量标准中的前3项指标可通过人工筛选、日晒处理等方法控制,但要使灰分含量稳定在7.0%以下则难度较大7,而灰分含量又是衡量僵蚕品质的重要指标,故对灰分含量的控制成为影响僵蚕品质的技术瓶颈。为此,本课题组在2 0 2 0年、2 0 2 1年的秋季开展僵蚕生产试验的基础上,以王琳璐等7的研究结论“白僵蚕中灰分有一部分来源于家蚕死亡前中肠内尚未消化的52第4 3卷 第2期2 0 2 3年 6月 蚕 学 通 讯N e w s l e t t e ro fS e r i c u l t u r a lS c i e n c e资助项目 重庆市现代山地特色高效农业(蚕桑)技术体系(C Q G X NY-2 0 2 2-0 9-6)。作者简介 谭立新(1 9 6 6-),高级农艺师,研究方向为桑树栽培管理、桑树病虫害绿色防控技术研究与推广、蚕桑资源综合利用技术研究与推广。E-m a i l:t l x m j t k 1 2 6.c o m通讯作者 任杰群(1 9 8 9-),高级农艺师,主要从事农业病虫害绿色防控技术研究、蚕桑实用技术研究与推广工作。E-m a i l:r e n j i e q u n q q.c o m桑叶”为依据,开展不同止桑时间处理的僵蚕灰分含量检测试验,以期探索出有效降低灰分含量,提高僵蚕品质的饲养技术措施。1 材料与方法1.1 试验材料供试家蚕品种“蜀水川山”,为冷藏浸酸种,由云南禄劝宝瑞蚕业有限责任公司提供。供试白僵菌菌株为球孢白僵菌(B e a u-v e r i ab a s s i a n a)N B分离株,由四川省农业科学院蚕业研究所分离培养。供试白僵菌孢子乳化剂吐温-8 0(T w e e n-8 0)为成都市科隆化学品有限公司产品。主要仪器:万分之一F A 2 1 0 4 S型电子天平(上海天平仪器厂),DHG-9 0 3 0 A型电热鼓风恒温干燥箱(上海齐欣科学仪器有限公司),R J M-2.8-1 2型马弗炉(沈阳市长城工业电炉厂)。1.2 试验方法1.2.1 家蚕饲养饲养试验地点设在重庆三峡农业科学院甘宁基地专业化蚕房内,蚕房具备良好的升、降温及补湿条件。参试人员中有1名高级农艺师负责技术指导,1名具有丰富养蚕经验的中级技工带领23名临聘人员进行家蚕饲养。蚕种于2 0 2 2年8月2 2日出库,催青按重庆市质量技术监督局 桑蚕种 第8部分:桑蚕种催青技术规程(D B 5 0/T5 7 3.82 0 1 4)进行8,于2 0 2 2年9月1日收蚁,一日孵化率为9 9%。小蚕期采用塑料薄膜防干育,每日给桑3次;45龄采用地蚕育,每日给桑3次。供试家蚕2 0 2 2年9月1 7日1 9:0 0止桑开始4眠,9月1 9日9:2 0眠起时(5龄起蚕)接种白僵菌孢子,1 0:0 0饷食。1.2.2 白僵菌接种接种环境:处于中秋的蚕室内自然温度保持在2 52 7,通过人工补湿使相对湿度达到7 5%并维持到接种后3 0m i n。菌液配制:按照1 0g蚁量家蚕使用4g白僵菌孢子粉接种的比例配制菌液,配制时先将吐温-8 0倒入水温2 5 温水中稀释均匀,再倒入白僵菌孢子粉,充分搅拌,防止白僵菌孢子粉悬浮于吐温-8 0液体表面,温度保持在2 5左右待用。喷雾接种:采用体表喷施方法,使用2 0L电动喷雾器将菌液均匀喷于5龄起蚕体表,并确保菌液能均匀喷雾到每一头蚕的体表,喷雾接种后3 0m i n饷食;为保证接种全面、均匀,喷雾时还需要不断搅拌,防止孢子粉漂浮在水面上,采用来回喷雾方法喷雾2次。1.2.3 不同处理设置在接种后第4天进行分组处理,设置3个处理和1个对照。每个处理组(含对照)3 0 0头蚕供试(同一簸蚕),每个处理组3个重复。处理组1:当5%1 0%(即1 53 0头)的家蚕濒死时停止给桑,待其全部自然僵死。处理组2:5%1 0%的家蚕濒死1 2h(即正常给桑1次)后停止给桑,待其全部自然僵死。处理组3:5%1 0%(1 53 0头)的家蚕濒死足1 8h后(即正常给桑2次)停止给桑,待其全部自然僵死。对照组:家蚕喷雾接种后一直按常规给桑(即家蚕感病后继续按正常给桑时间给桑),直到全部自然僵死。1.2.4 感病家蚕管理家蚕感病后食欲显著下降,蚕体开始变软,此时需把濒死蚕择出单独放于蚕箔,至该簸蚕全部僵死后,分区对号将各区僵蚕人工捡出存放于另一铺好干净牛皮纸的蚕簸内逐个并排存放,经2d左右蚕体发僵后,自然晾干保存。1.2.5 僵蚕的灰分测定样品预处理:将僵蚕样品放入2 6干燥箱平衡3d。坩埚预处理:将干燥的坩埚放入5 2 52 5的马弗炉灼烧3 0m i n后,冷却至2 0 0左右,取出放入干燥器中继续冷却至室温,称量,重复上述步骤直至恒重,待用。称样:称取预处理后的僵蚕样品5g左右于已经恒重的坩埚内,先以小火加热使样品充62蚕 学 通 讯 4 3卷分炭化至无烟。灰化处理:将炭化完全的试样转入5 2 52 5的马弗炉,灰化直至无炭粒为止,待炉温冷却至2 0 0左右后,放入干燥器冷却至室温称量,计算灰分含量。灰分质量分数=灰化后样品恒定质量/灰化前初始样品质量1 0 0%。1.3 调查项目本试验设定3个调查项目,分别为濒死蚕个体质量、僵蚕个体质量、僵蚕灰分占比(质量分数)。濒死蚕个体质量指标旨在调查每个处理(含对照)濒死蚕个体的质量,反映不同给桑处理条件下未僵化蚕体的质量差异。调查时,分别随机抽取每个处理(含对照)濒死蚕3 0头称量,求平均数即为“濒死蚕个体质量”,平均数保留小数点后2位。僵蚕个体质量指标调查时间节点为蚕体变硬并全部着生白僵菌孢子时,旨在调查每个处理(含对照)僵蚕个体的质量,反映不同给桑处理条件下僵蚕个体的质量差异。调查时分别随机抽取每个处理(含对照)僵蚕3 0头称量,求平均数即为“僵蚕个体质量”。僵蚕灰分含量检测以每个处理组(含对照)的3个重复混合抽样,各随机抽样3 0头僵蚕进行灰分含量检测。2 结果与分析2.1 各处理组濒死蚕个体质量与僵蚕个体质量的比较从表1可以看出,僵蚕个体质量大小与濒死蚕个体质量大小呈正相关,且不同处理组间濒死蚕个体质量与僵蚕个体质量存在显著性差异。各组间濒死蚕个体质量从小到大依次为处理组1(3.4 4g)、处理组2(3.6 9g)、处理组3(4.1 1g)、对照组(4.2 1g),各组间僵蚕个体质量从小到大依次为处组理1(0.6 1g)、处理组2(0.6 4g)、处理组3(0.7 3g)、对照组(0.7 4g)。即表明止桑时间越早,其濒死蚕个体质量及僵蚕个体质量越小,提示生产中需要合理把握止桑时间。表1 不同止桑时间处理组濒死蚕个体质量与僵蚕个体质量的比较组别濒死蚕个体质量/(g头-1)重复1重复2重复3平均僵蚕个体质量/(g头-1)重复1重复2重复3平均处理13.4 83.3 23.5 13.4 4a0.6 20.6 10.5 90.6 1a处理23.7 13.7 53.6 23.6 9b0.6 40.6 40.6 40.6 4b处理34.2 33.9 94.1 14.1 1c0.7 30.7 30.7 20.7 3cC K4.3 34.0 94.2 24.2 1d0.7 40.7 30.7 40.7 4c 注:表中数据为平均值(x),统计分析采用I BMS P S S1 6.0软件进行单因素方差分析(O n e-W a yANOVO),同列不同小写字母表示在0.0 5水平差异显著。2.2 各处理组僵蚕中的灰分含量比较僵蚕的灰分含量检测结果见表2。各处理组僵蚕的灰分含量(质量分数)由小到大依次为处理组1(6.8 5%)、处理组2(6.9 6%)、处理组3(7.5 2%)、对照组(7.8 5%),其中处理组1和处理组2的僵蚕灰分含量符合僵蚕质量检验标准(灰分含量7%),分别低于标准指标2.1 4%和0.5 7%;处理组3及对照组僵蚕的灰分含量超过规定指标7.4 3%和1 2.1 4%,不符合质量检验标准。结果表明:家蚕5龄起蚕接种白僵菌孢子后,当有5%1 0%的家蚕濒死或5%1 0%的家蚕濒死1 2h(即正常给桑1次)后停止给桑,僵蚕中的灰分含量符合僵蚕质量检验标准;接种白僵菌孢子后,5%1 0%的家蚕濒死足1 8h(即正常给桑2次)或家蚕感病后继续按正常给桑时间给桑,僵蚕中的灰分含量不符合僵蚕质量检验标准。因此建议僵蚕生产中,5龄起蚕接种白僵菌孢子后,在出现5%1 0%濒死蚕1 2h后即停止给桑(正常给桑1次),待其全部自然僵死,既可达到僵蚕生产的产量要求,又能够有效降低僵蚕中的灰分含量。722期 谭立新等:调节止桑时间降低僵蚕灰分含量的试验初报 表2 不同止桑时间处理组僵蚕的灰分含量比较项目处理1处理2处理3C K初始样品质量/g5.0 1 385.2 8 185.4 7 725.4 4 85样品恒定质量/g0.3 4 340.3 6 760.4 1 190.4 2 77灰分质量分数/%6.8 56.9 67.5 27.8 5 注:表中数据为各处理组3个重复混合抽样的检测数据;僵蚕质量检验标准中要求灰分质量分数不超过7%。3 讨论本试验结果表明,在给5龄起蚕均匀、完全接种白僵菌孢子的前提下,掌握好出现濒死蚕后的止桑时间能有效降低僵蚕的灰分含量。聂启航等5认为个体质量越大的僵蚕,其体内所含灰分越少,品质越好。而本试验发现,僵蚕体质量越大,其体内灰分越多,这与家蚕的食桑量有关,食桑越多,僵蚕体质量越大。因此在僵蚕生产中,要从5龄盛食期开始增加日给桑次数,充分饱食,以最大限度增加蚕体质量,当5%1 0%的家蚕濒死1 2h后(5龄第6天)停止给桑,则减少了家蚕僵死前中肠内未消化的桑叶