DB45T 38-2002 水牛奶.pdf

ICS 65.020.30 B45 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 382002 水牛奶 2002-06-11 发布 2002-09-18 实施广西壮族自治区质量技术监督局 发 布DB45/T 382002 I 前 言 本标准由广西壮族自治区水产畜牧局提出。本标准起草单位：广西壮族自治区水牛研究所。本标准主要起草人：曾庆坤、杨炳壮、杨白云、陈恒志。DB45/T 382002 1 水牛奶 1 范围 本标准规定了生鲜水牛奶的分级和检验方法。本标准适用于收购或者销售的生鲜水牛奶的检验和评级。2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 6914 生鲜牛乳收购标准 GB/T 5409 牛乳检验方法 GB/T 5413.321997 乳粉 硝酸盐、亚硝酸盐和测定 GB/T 5009.241996 食品中黄曲霉毒素M1的测定方法 GB 4789.21994 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.181994 食品卫生微生物学检验 乳和乳制品检验 3 定义 下列定义适用于本标准。3.1 生鲜水牛奶 系指从正常饲养的、无传染病和乳房炎的健康母水牛乳房内挤出的正常乳。4 收购的生鲜水牛奶的质量要求 4.1 感官指标 正常水牛奶应为乳白色，不得含有肉眼可见的异物，不得有红色、绿色或其他异色。不能有苦、咸、涩的滋味和饲料、青贮、霉等其他异常气味。4.2 理化指标 理化指标不分级。理化指标应符合表1要求。表 1 项 目 指 标 脂肪，%5.8 DB45/T 382002 2 蛋白质，%3.9 非脂乳固体，%9.6 密度（20/4），g/mL 1.029 酸度，T 18 杂质度，mg/L 4 抗生素 阴性 硝酸盐（以 NaNO3计）,mg/kg 11.0 亚硝酸盐（以 NaNO2计）,mg/kg 0.2 黄曲霉毒素 M1,g/kg 0.5 4.3 细菌指标 收购的生鲜水牛奶的细菌指标有下列两种：第一法，采用平皿细菌总数计算法，按表2每毫升内细菌总数分级指标进行评级；第二法，采用美蓝还原褪色法按表3美蓝褪色时间分级指标进行评级。表 2 分 级 平皿细菌总数分级指标，万个/mL 50 100 200 400 表 3 分 级 美蓝褪色时间分级指标 4 h 2.5 h 1.5 h 40 min 5 检验方法 5.1 取样方法 5.1.1 适用范围 本法记述从大型或小型容器中，取得具有代表性样品的生奶及消毒奶取样的方法。5.1.2 规定 样品的采取必须由公认的、具有一定技术的代理人进行。该代理人必须无传染性疾病。样品应附有负责取样者签名的报告书，该报告书应详细记载取样的场所、奶别、货主、日期、时间、取样者和到场DB45/T 382002 3 者的姓名及职称，必要时还应包括包装形式、大气温度、湿度、取样器具的灭菌方法、样品防腐剂添加与否及有关的特殊情况。5.1.3 各样品必须贴上标签并密封之，必要时还要写明样品的质量。样品采取后必须在 24 h 内，迅速送往试验室进行检验。检验细菌的样品采样后应立即于 0 5 下冷藏，并于 18 h 内送到试验室进行检验，在运输途中样品温度不可超过 10；如无冷藏设备，必须于采样后 2 h 内进行检验。5.1.4 理化指标检验用样品采样所用器具及样品容器都必须清洁干燥。细菌检验用的取样器具必须清洁灭菌，灭菌方法应根据不同材质容器，采用不同灭菌法。5.1.4.1 在 170 高温热气中保持 2 h（能在无菌条件下放置更好）。5.1.4.2 在 120 蒸汽（高压锅）中保持 15 min20 min（能在无菌条件下放置更好）。5.1.4.3 在 100 开水中浸泡 1 min（器具立即使用）。5.1.4.4 在 70%酒精中浸泡，使用前再用火焰烧去酒精。取样容器以玻璃材料、不锈钢和某些塑料制品为好，须配有合适的橡胶塞、塑料塞或螺旋塞盖紧。使用橡胶塞时，须用不吸附的无臭物质（例如某种塑料）套好盖在容器上，也可用合适的塑料袋。5.1.5 小型容器取样，应该用密封完整的容器的内容物作为样品。理化指标检验用的鲜乳样品，可加适量对检验没有影响的防腐剂，并在标签和报告中注明。细菌和感官检验用的样品不得使用防腐剂，但必须保存在 0 5 冷藏容器中，运输途中也不可超过 10，并须防止日光直射。5.1.6 大容器取样前，应上、下持续搅拌 25 次以上，直至充分混匀，然后直接用长柄匙取样。5.1.7 检验前，无论是理化质量检验或卫生质量检验，所有生奶及消毒奶样品由冷藏处取出后均须升温至 40，剧烈颠覆上下摇荡，使内部脂肪完全融化并混合均匀后，再降温至 20，用吸管取样进行检验。5.2 脂肪含量的测定 5.2.1 罗兹-格特里(Rose-Gettlieh)法 5.2.1.1 仪器 罗兹-哥特里抽脂瓶；化学天平：感量0.1 mg。5.2.1.2 试剂 浓氨水，分析纯；95%乙醇，分析纯；乙醚，分析纯；石油醚，分析纯，沸程30 60。5.2.1.3 方法 用小烧杯称取牛奶10 g（准确至0.2 mg）倒入抽脂瓶中，用10 mL温水（60左右），分数次把附在小烧杯壁上的牛奶洗入抽脂瓶中，加入1.25 mL浓氨水，充分摇匀，置60水浴中加热5 min，再用手（如有条件可用振荡器）摇动2 min，加入10 mL 95%乙醇，充分摇匀，经冷水冷却后，加入25 mL乙醚，摇动半分钟，加入石油醚25 mL，摇匀后静置30 min，待液层分离后，读取醚层体积。放出醚层于已知重量的烧瓶中，记录放出醚层的体积。蒸馏、回收醚后，置脂肪烧瓶于98 100 的烘箱中干燥1 h，取出于干燥器中冷却25 min30 min，于天平上称重，而后再放入烘箱中干燥0.5 h，冷却、称重，直至前后两次重量差不超过2 mg，即为恒重。DB45/T 382002 4 5.2.1.4 计算 M2-M1 X1=100 （1）M V1/V0 式中：X1样品中脂肪的含量，%；M 样品含量，g；M1 烧瓶重量，g；M2 烧瓶加脂肪重量，g；V0 醚层总量，mL；V1 放出醚层量，mL。5.2.2 巴布考克法 5.2.2.1 仪器 17.6 mL牛奶吸管；50 mL烧杯；巴布考克乳脂瓶；巴氏离心机：离心因素等于350，其半径与转速关系见表4。表 4 半径，mm 转速，r/min 半径，mm 转速，r/min 240 1 140 265 1 090 245 1 130 270 1 080 250 1 120 275 1 070 255 1 110 300 1 020 260 1 100 325 980 注：本规定系以离心因素等于350为计算依据。5.2.2.2 试剂 硫酸，比重1.8201.825，分析纯。5.2.2.3 方法 吸取20 牛奶17.6 mL，注入巴氏乳脂瓶中，加等量硫酸，小心倒入乳脂瓶中，硫酸流入牛奶下面成一层，摇动乳脂瓶使牛奶和硫酸混合，即成棕黑色，继续摇动2 min3 min，将乳脂瓶放入离心机中，以离心因素等于350离心5 min，取出后向瓶中加60 热水至分离的脂肪层在瓶颈部刻度处，再用同样DB45/T 382002 5 的转速旋转2 min，取出置60 水浴中保温5 min，取出，立即读数。读数时要将乳脂肪柱下弯月面放在与眼同一水平面上，以弯月面下限为准。所得数值即为脂肪的百分数。5.3 蛋白质含量的测定 5.3.1 方法原理 用半微量凯氏定氮法,测定乳汁中氮的含量，从而计算出该乳汁中蛋白质的含量（%）。5.3.2 试剂和溶液 0.05 mol/L标准盐酸溶液；饱和氢氧化钠溶液；2%硼酸溶液；混合催化剂：无水硫酸钾或硫酸钠、硫酸铜、硒（均为分析纯）按100:10:2的质量比配制而成；混合指示液：以0.2%甲基红与0.1%次甲基蓝相等体积混合配成。5.3.3 仪器和设备 电炉：1组2组附有支撑架的可调电炉；通风橱；凯氏烧瓶：250 mL；半微量凯氏定氮仪；容量瓶：100 mL。5.3.4 操作 5.3.4.1 消化 在干净的凯氏烧瓶里,加入约2 g混合催化剂，然后用10 mL移液管吸取经40升温并冷却至20 左右的混合均匀的牛奶样品10 mL，称重后直接注入凯氏烧瓶底部，再沿瓶壁徐徐加入15 m20 mL浓硫酸，并轻轻摇荡，使样品全部被硫酸脱水炭化。将加好试剂的凯氏烧瓶放入通风橱内的可调电炉上，先小火加热，至冒出白烟后加大火力，直至瓶内溶液变成透明淡蓝色后，再继续加热约20 min30 min即可。5.3.4.2 定容 将已冷却的溶液移入100 mL容量瓶内，并用蒸馏水重复冲洗凯氏烧瓶5次6次，全部冲洗液倒入容量瓶中，冷却至室温后定容。5.3.4.3 蒸馏 吸取容量瓶内样品10 mL放入半微量凯氏定氮仪的反应室内，加入约4 mL饱和氢氧化钠溶液，放开蒸汽管夹，在通入的热蒸汽作用下，样品与氢氧化钠反应，放出NH3，经冷却管冷却后流入盛有2%的硼酸溶液接受瓶中，成为NH4HB4O7，使原来淡紫红色的硼酸溶液（内加有适量的混合指示剂）变为淡苹果绿色，直至硼酸接受瓶中溶液增加至约30 mL时取下接受杯，同时用蒸馏水少许将冷却管末端（浸入接受瓶部分）残余液滴冲洗入接受瓶内。5.3.4.4 滴定 DB45/T 382002 6 将接受瓶内液体用0.05mol/L盐酸标准溶液滴定，至出现淡紫红色时为止，读出所消耗的盐酸毫升数。5.3.4.5 计算 CV0.0146.38 X2=100 （2）M10/100 式中：X2-样品中蛋白质的含量，%；C盐酸标准溶液的浓度，mol/L；V滴定消耗的盐酸标准溶液的体积，mL；0.0141.0 mL 的盐酸标准溶液（CHCl=1.000mol/L）相当的以克表示的氮的当量；6.38氮换算成蛋白质的系数；M牛奶样品重，g。5.4 非脂乳固体的测定 5.4.1 仪器设备 带盖铝皿或带盖玻璃皿：直径50 mm70 mm；海砂。5.4.2 方法 在带盖铝皿中，加入海砂10 g20 g，于98100烘箱内烘至恒重。吸取5 mL牛奶于此铝皿中，置分析天平上称量（准确至0.2 mg），再置水浴上蒸干，擦去皿壁上的水迹，放入98 100 烘箱内干燥2 h后，加盖取出，但不要盖紧，置于干燥器中冷却后称重；再放入烘箱中干燥2 h取出，冷却20 min30 min，将盖盖紧，称重。如此重复至前后两次重量差不超过2 mg为止。5.4.3 计算 M2-M3 X3=100 （3）M1-M3 式中：X3样品中全乳固体的含量，%：M1 含有海砂的皿加样品重，g；M2 含有海砂的皿加样品干燥后重，g；M3 含有海砂的皿重，g。X4=X3-X1 （4）式中：X4样品中非脂乳固体的含量，%；X3 样品中全乳固体的含量，%；X1样品中脂肪的含量，%。5.5 密度的测定 5.5.1 仪器设备 DB45/T 382002 7 温度计：0 100；牛奶密度计（乳稠计）：20/4；量筒：250 mL，直径大小应使在沉入乳稠计时，乳稠计的周边和量筒内壁间的距离不小于0.5 cm。5.5.2 操作 将牛奶样品升温至40，上下颠倒摇荡，混合均匀后，降温至20 左右，小心地注入高度大于密度计长度，容量约250 mL的玻璃量筒中，加到量筒容积的3/4时为止。注入牛奶时应防止牛奶生成泡沫。放入乳稠计时，应持乳稠计上部，小心地把它沉入量筒内的乳汁中，让它自由浮动，要使它不与量筒壁接触。等乳稠计静止2 min3 min后，双眼对准筒内乳液表面的高度。由于牛奶表面与乳稠计接触处形成新月形，此新月形表面的顶点处乳稠计标尺的高度，即密度的数值。5.5.3 结果的表示 所用的乳稠计要以20 min 时的数值表示。因此，如果奶样具有另一温度，则须对温度的差异加以校正。温度比20 每高出1时，要在得出的乳稠计度数上加0.2，或在密度数值上加上0.0002；而温度