DB35T 1326-2013 植物类农产品中γ-氨基丁酸的测定.pdf

ICS 65.120 B 20 DB35 福建省地方标准 DB 35/T 13262013 植物类农产品中-氨基丁酸的测定 Determination of-amino butyric acid in plant products 2013-02-20 发布 2013-05-20 实施福建省质量技术监督局 发 布 DB35/T 13262013 I 前 言 本标准按GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写给出的规则起草。本标准由福建省农业厅提出并归口。本标准起草单位：福建省农业科学院。本标准主要起草人：钱爱萍、林香信、颜孙安、林虬。DB35/T 13262013 1 植物类农产品中-氨基丁酸的测定 1 范围 本标准规定了植物类农产品中-氨基丁酸的测定方法。本标准适用于谷物、茶叶、水果中的-氨基丁酸的测定。本方法的最低检出限为12 ug/kg。2 方法原理 采用氨基酸自动分析仪。试样中-氨基丁酸经磺基水杨酸溶液提取后用离子交换色谱法分离，以茚三酮做柱后衍生，于其最大吸收波长570 nm检测，根据保留时间和峰面积用外标法进行定性和定量。3 试剂和溶液 除另有注明外，所用试剂均为优级纯；水为去离子水，电导率小于0.10 ms/m。3.1 磺基水杨酸溶液：称取 3.0 g 磺基水杨酸于 100 mL 容量瓶中，用去离子水溶解后，定容至刻度，摇匀。3.2 柠檬酸三钠。3.3 盐酸。3.4 氢氧化钠。3.5 柠檬酸钠缓冲液（pH2.2，c（Na+）=0.2 mol/L）：称取 19.6 g 柠檬酸三钠，用水溶解后加入盐酸 16.5 mL、硫二甘醇 5.0 mL、苯酚 1 g，加水定容至 1000 mL。3.6-氨基丁酸：纯度 99%。3.7-氨基丁酸标准溶液：准确称取-氨基丁酸标准品约 0.0103 g（精确至 0.0001 g），用水溶解后移入 100.0 mL 容量瓶中，并用水稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升含 0.103 mg-氨基丁酸。3.8-氨基丁酸标准使用溶液：准确移取氨基丁酸标准溶液（3.7）1.0 mL 于 10 mL 容量瓶中，加 pH2.2柠檬酸钠缓冲液（3.5）至刻度，即得 0.0103 mgmL-1-氨基丁酸标准使用液。3.9 不同 pH 和离子强度的洗脱用柠檬酸钠缓冲液：按仪器说明书配制。3.10 茚三酮显色溶液：按仪器说明书配制。3.10.1 茚三酮。3.10.2 乙二醇甲醚。3.10.3 无水乙酸钠：分析纯。DB35/T 13262013 2 3.10.4 冰乙酸：分析纯。3.11 高纯氮气：纯度 99.99%。4 仪器与设备 4.1 氨基酸自动分析仪。4.2 捣碎机、粉碎机。4.3 恒温震荡器。4.4 离心机:转速 12000 r/min。4.5 天平：感量为 0.0001 g。4.6 网筛：孔径 0.45 mm(40 目)。5 操作步骤 5.1 试样处理 5.1.1 液体试样 准确吸取试样1.0 mL5.0 mL于具塞三角瓶内，加入煮沸的3%磺基水杨酸溶液15 ml摇匀，置30 恒温水浴振荡器中，振荡15 min后，全部移入50 mL容量瓶内，用pH2.2柠檬酸钠缓冲液稀释至刻度，静置12 h，摇匀取2 mL离心，上清液待上机测定。5.1.2 固体试样 选取有代表性的样品用四分法缩减到10 g，磨碎，全部过0.45 mm（40目）孔筛，混匀装入密封容器中。新鲜样品需匀成浆状。精确称取经上述处理的试样1.000 g2.000 g于具塞三角瓶内，用0.02 molL-1盐酸溶液溶解，加入煮沸的3%磺基水杨酸溶液15ml振摇，置30 恒温水浴振荡器内，振荡15 min后，全部移入50 mL容量瓶内，用pH2.2柠檬酸钠缓冲液稀释至刻度，静置12 h后，摇匀取2 mL离心，上清液待上机测定。5.2 测试 5.2.1 仪器条件 日立L-8800氨基酸自动分析仪；分析柱：4.6 mmID60 mm；分析树脂：2622#；除氨柱：4.6 mmID60 mm；除氨柱树脂：2650 L；泵1流量：0.40 mlmin-1；泵2流量：0.35 mlmin-1。基线噪音小于4 v。5.2.2 上机测定 用3.7法配制的-氨基丁酸标准使用溶液作为上机测定用的-氨基丁酸标准，用氨基酸自动分析仪测定试样的-氨基丁酸含量。DB35/T 13262013 3 6 结果的计算 分别用式（1）和式（2），计算试样中-氨基丁酸的含量：100010509121VMVFCx(1)10001050922mMVFCx(2)式中：x1 液体试样中-氨基丁酸的含量，单位为gL-1；x2 固体试样中-氨基丁酸的含量，单位为gkg-1；C 试样测定液中-氨基丁酸的含量，单位为ng（20 L)-1；F 试样稀释倍数；V2 试样定容体积，单位为mL；M 标样中-氨基丁酸的摩尔质量，单位为gmol-1；V1 试样的体积，单位为mL；m 试样的质量，单位为g；50 将试样测定液中-氨基丁酸的含量由ng（20 L)-1折算成ngmL-1的系数；109 将试样含量由纳克(ng)折算成毫克（mg）的系数。计算结果表示为：试样含量在10 gkg-1（10 gL-1）以下，保留两位有效数字；含量在10 gkg-1（10 gL-1）以上，保留三位有效数字。7 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的12%。8 标准图谱 标准图谱见图1。DB35/T 13262013 4 图1-氨基丁酸标准图谱 GABA051015202530Retention Time(min)010203040506070Intensity(mV)DB35/T 13262013 5 参 考 文 献 1 GB/T 18246-2000 饲料中氨基酸的测定 _ DB35/T 13262013 福建省地方标准 植物类农产品中-氨基丁酸的测定 DB35/T 13262013 *2013 年 6 月第一版 2013 年 6 月第一次印刷