TCFIAS 003-2019 饲料中地西泮的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS65.120B46团体标准T/CFIAS 003-2019饲料中地西泮的测定高效液相色谱法Determination of diazepam in feeds-High performance liquid chromatography2019-06-25发布2019-06-25实施中国饲料工业协会发布T/CFIAS003-2019前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由中国饲料工业协会团体标准技术委员会提出并归口。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准起草单位：山东省饲料质量检验所。本标准主要起草人：孙延军、张芸、李俊玲、李桂华、刘华阳、门晓冬、杨志国、王英英。T/CFIAS003-20196样品按GB/T20195制备样品，至少200g,粉碎使其全部通过0.42mm孔径的分析筛，充分混匀，装入磨口瓶中，避光保存，备用。7试验步骤7.1提取平行做两份试验。称取试样2g(精确到0.0001g)于50mL离心管中，准确加入20mL乙腈(4.2)，涡旋混匀后，振荡提取5min,超声10min,10000r/min离心5min后上清液，作为提取液，备用。7.2净化依次用3mL甲醇和3mL2%甲酸水溶液(4.5)活化固相萃取柱(4.10)，准确移取5ml提取液(7.1)过柱。再依次用3mL2%甲酸水溶液(4.5)和3mL甲醇(4.3)淋洗，抽干淋洗液，最后用3mL5%氨水甲醇溶液(4.6)洗脱，收集洗脱液，于40氮气吹干，准确加入1mL甲醇(4.3)溶解残渣，过0.45m滤膜，待测。7.3液相色谱参考条件色谱柱：C1s柱，柱长100mm,内径4.6mm,粒径3.5m,或性能相当者流速：1.0mL/min。检测波长：254nm。柱温：35。进样量：20L。流动相：流动相A:甲醇(4.3)：流动相B:水(4.1)，梯度洗脱程序见表1。表1流动相梯度洗脱程序时间(min)A,%B,%020801.040608.0703010.03011.0901012.0901014.020807.4测定7.4.1标准系列工作溶液和试样溶液测定在仪器的最佳条件下，分别取标准系列工作溶液(4.9)和试样溶液(7.2)上机测定。地西泮标准溶液的液相色谱图参见附录A。7.4.2定性以保留时间定性，试样溶液中地西泮保留时间应与标准系列工作溶液中地西泮的保留时间一致，其相对偏差在2.5%之内。7.4.3定量以地西泮的浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其相关系数应不低于0.99。试样溶液中待测物的响应值应在标准系列工作溶液测定的线性范围内（相差不超过30%）。如超出线性范围，应将试样溶液用甲醇(4.3)溶液进一步稀释后，重新测定。8试验数据处理试样中地西泮的含量以质量分数0计，数值以毫克每千克(mgkg)表示，单点校准按公式(1)