TSATA 031-2022 植物性农产品中111种农药及其代谢物残留量的测定 高效液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 67.05X 04团体标准T/SATA 0312022植物性农产品中 111 种农药及其代谢物残留量的测定高效液相色谱-串联质谱法Determination of 111 pesticides and their metabolitesresidues in plant agricultural products by highperformance chromatography-tandem mass spectrometrymethod2022-03-24 发布2022-04-24 实施深圳市分析测试协会发 布全国团体标准信息平台T/SATA 031-2022I目次前言.II引言.III1范围.12规范性引用文件.13原理.14试剂与材料.15仪器设备.26试样制备.27分析步骤.38结果计算.59回收率、相关系数和精密度.510方法定量限.6附录 A（资料性附录）111 种农药及其代谢物中英文名称和方法定量限.7附录 B(资料性附录)111 种农药及其代谢物的保留时间及离子对质谱参数.10附录 C（资料性）111 种农药及其代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图.14附录 D（规范性附录）实验室内重复性和实验室间再现性要求.18附录 E 111 种农药及其代谢物中文名称顺序对照索引、CAS 编号和分子式.19全国团体标准信息平台T/SATA 031-2022II前言本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由深圳市分析测试协会归口。本文件起草单位：深圳市质量安全检验检测研究院。本文件主要起草人：宋世文，宋晓仪，曾定玲。本文件为首次发布。全国团体标准信息平台T/SATA 031-2022III引言编制的意义：1、本标准在国内首先实现了应用液相色谱-串联质谱技术检测全部常见的菊酯类农药残留量。2、本标准填补国内农药残留-液相色谱串联质谱检测标准方法 15 项缺失。目前国内液相色谱串联质谱检测农药残留的方法主要有：GB 23200.121-2021 和 GB/T 20769-2008，本标准填补国内检测标准15 项缺失，其中包括常见菊酯类农药残留检测的 9 项，其他常见农药 6 项。填补的 15 项缺失分别是：1、氯氰菊酯，2、氯氟氰菊酯，3、氟氯氰菊酯，4、苯醚氰菊酯，5、氟硅菊酯，6、丙烯菊酯，7、甲醚菊酯，8、炔咪菊酯，9、氟丙菊酯，10、甲基对硫磷，11、克螨特，12、百菌清，13、三氯杀螨醇，14、杀螟硫磷,15、灭蝇胺。3、本标准明确了氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氟氰菊酯等菊酯类农药残留量的测定都包括高效异构体和其他全部异构体；氰戊菊酯包括S-氰戊菊酯。全国团体标准信息平台T/SATA 031-20221植物性农产品中 111 种农药及其代谢物残留量的测定高效液相色谱-串联质谱法1范围本文件规定了植物性农产品中111种农药及其代谢物残留量的高效液相色谱-串联质谱测定方法。本文件适用于甘蓝、菠菜、番茄、荔枝、橙、香菇和平菇中111种农药及代谢物残留量的高效液相色谱-串联质谱法的测定，其他植物性农产品可参照执行。本文件的 111 种农药及其代谢物中英文名称见附录 A。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 27404 实验室质量控制规范 食品理化检测中华人民共和国农业部公告 2386号 农药残留检测方法国家标准编制指南3原理试样用乙腈匀浆提取，盐析离心，上清液经N-丙基乙二胺吸附剂（PSA）和GCB等分散固相萃取净化，应用高效液相色谱-串联质谱仪测定，保留时间和离子丰度比定性，外标法定量。4试剂与材料所用的试剂除另有说明，均为分析纯试剂。4.1水：符合 GB/T 6682 规定的一级水指标。4.2乙腈(CH3CN):色谱纯；CAS 号：75-05-8。4.3甲酸(CH3COOH):色谱纯；CAS 号：64-18-6。4.4甲醇(CH3OH):色谱纯；CAS 号：67-56-1。4.5乙酸铵(CH3COONH4):色谱纯;CAS：631-61-8。4.6氯化钠(NaCl):分析纯；CAS 号：7647-14-5。4.7无水硫酸镁(MgSO4):525煅烧 4h，置于干燥器中备用；CAS 号：7487-88-9。4.8乙二胺-N-丙基硅烷吸附剂(PSA)：粒径 40 m60 m。4.90.1%甲酸甲醇溶液含 5 mmol/L 乙酸铵：准确量取 1 mL 甲酸，称取 0.39g 乙酸铵，用甲醇溶解并用甲醇定容至 1000 mL，混匀。全国团体标准信息平台T/SATA 031-202224.10甲醇-水溶液(1:9，体积比)：量取 100 mL 甲醇加入 900 mL 水中，混匀。4.110.1%甲酸水溶液含 5 mmol/L 乙酸铵：准确量取 1 mL 甲酸，称取 0.39 g 乙酸铵，用水溶解并用水定容至 1000 mL，混匀。4.12微孔滤膜(有机相):13 mm0.22 m，或相当者。4.13十八烷基硅烷键合硅胶(C18):粒径 40 m60 m。4.14石墨化碳黑(GCB):粒径 40 m120 m。4.15陶瓷均质子:2 cm(长)1 cm(外径)，或相当者。4.16柠檬酸钠二水合物(C6H5Na3O72H2O)；CAS 号：6132-04-3。4.17柠檬酸二钠盐倍半水合物(C6H6Na2O71.5H2O)；CAS 号：6132-05-4。4.18农药标准品111种农药标准品名称和 CAS编号见附录 E；每种农药标准品均为1000 mg/L，纯度95%，-18冰箱保存，有效期一年。4.19混合标准储备液 20 mg/L（其中三氯杀螨醇 100mg/L）依据农药标准品的编号（见附录E），分为A（编号1-35）、B（编号36-70）和C（编号71-111）三组。每组分别取4.18 标准品（1000 mg/L）0.2 mL（其中三氯杀螨醇1 mL）于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配制成 A、B、C 三组各20 mg/L混合标准储备液（其中三氯杀螨醇100 mg/L），-18冰箱中保存,有效期为6个月。4.20混合标准工作液 5 mg/L（其中三氯杀螨醇 25 mg/L）分别准确吸取4.19 A、B、C 三组标准储备液各1.25 mL于5 mL容量瓶，甲醇定容至刻度，配制成5 mg/L混合标准工作液（其中三氯杀螨醇25 mg/L），-18冰箱中保存，有效期一个月。5仪器设备5.1高效液相色谱-串联三重四级杆质谱仪，配备电喷雾离子源（ESI）；5.2分析天平：感量 0.01 g；5.3涡旋振荡器；5.4高速离心机，最高速度不低于 12,000 r/min；5.5氮吹仪；5.6组织捣碎机。6试样制备6.1试样制作样品测定部位按照 GB 2763 附录 A 的规定执行。全国团体标准信息平台T/SATA 031-20223食用菌、热带和亚热带水果（皮可食）随机取样 1 kg，水生蔬菜、茎菜类蔬菜、豆类蔬菜、核果类水果、热带和亚热带水果（皮不可食）随机取样 2 kg，瓜类蔬菜和普通水果取 46 个个体（取样量不少于 1 kg），其他蔬菜和水果随机取样3 kg。对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取一部分或全部用组织捣碎机粉碎后，放入聚乙烯瓶中。6.2试样贮存将试样按照测试和备用分别存放，于-18 及以下条件保存。7分析步骤7.1试样提取和净化称取10 g试样(精确至 0.01g)于 50 mL 塑料离心管中，加入10 mL乙腈及1 颗陶瓷均质子，剧烈震荡1 min，加入4 g无水硫酸镁、1 g 氯化钠、1 g 柠檬酸钠二水合物、0.5 g 柠檬酸二钠盐倍半水合物，再剧烈震荡3 min 后4500 r/min 离心5 min。定量吸取上清液至内含除水剂和净化材料的塑料离心管中（每毫升提取液使用150 mg无水硫酸镁、25 mgPSA）；对于颜色较深的试样，离心管中另加入 GCB（每毫升提取液使用2.5 mg），涡旋混匀3 min；4500 r/min 离心5 min，吸取上清液过微孔滤膜，待测定。灭蝇胺检测：称取10 g试样(精确至 0.01g)于50 mL 塑料离心管中，加入10 mL乙腈及1颗陶瓷均质子，剧烈震荡3 min，10000 r/min 离心5 min。全部转移上清液至20 mL容量瓶中，用1：1(V:V)乙腈水定容。定量吸取上清液至内含净化材料的塑料离心管中(每毫升提取液50 mg PSA和GCB 10 mg)，涡旋混匀3 min；10000 r/min 离心5 min。再取上清液2 mL，水浴50氮吹至近干，用1：9甲醇水(4.10)定溶到2 mL，过微孔滤膜，待测定。7.2液相色谱参考条件7.2.1色谱柱：C18(2.1 mm(内径)50 mm,1.8 m)，或相当者；7.2.2流动相：A 相为 0.1%甲酸水溶液含 5 mmol/L 乙酸铵（4.11），B 相为 0.1%甲酸甲醇溶液含5 mmol/L 乙酸铵（4.9），流动相梯度条件见表 1；7.2.3流速：0.3 mL/min；7.2.4柱温：40；7.2.5进样量：2 L。表 1：流动相及其梯度条件（VA+VB）时间 min流速 mL/minVA%（4.11）VB%（4.9）00.39821.500.39822.000.390104.000.320805.000.310906.000.310906.500.33090全国团体标准信息平台T/SATA 031-20224时间 min流速 mL/minVA%（4.11）VB%（4.9）7.000.39829.000.39827.3质谱参考条件质谱参考条件7.3.1离子源类型：电喷雾离子源；7.3.2扫描方式：正离子和负离子同时扫描；7.3.3电喷雾电压：正离子 5500 V，负离子-4500 V；7.3.4离子源温度：600；7.3.5雾化气：60 psi；7.3.6辅助加热气：55 psi；7.3.7气帘气：40 psi；7.3.8多反应监测。每种农药分别选择至少两个子离子。所有需要检测的子离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见附录 B；附录 B 中离子对为定量离子对；离子对为定性离子对。7.4基质匹配标准工作曲线选择与被测样品性质相同或相似的空白样品按照7.1部分进行前处理，得到空白基质溶液。精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为0.002 mg/L、0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L和0.5 mg/L（三氯杀螨醇浓度需5）的基质匹配标准工作溶液，根据仪器性能和检测需要选择不少于5个浓度点，供液相色谱-质谱联用仪测定。以农药定量子离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。7.5定性及定量7.5.1保留时间被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在2.5%之内。7.5.2离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表2 规定的范围，则可判断样品中存在目标农药。本方法的标准物质 LC-MS/MS 多反应监测质量色谱图参见附录 C。全国团体标准信息平台T/SATA 031-20225表 2 定性时离子丰度比的最