TGZTPA 0003-2020 茶青中多种农药残留测定.pdf

T/GZTPA团团 体体 标标 准准T/T/GZTPAGZTPA 00030003-202020202020-08-13 发布2020-09-01 实施贵州省绿茶品牌发展促进会贵州省绿茶品牌发展促进会发布发布茶青中多种农药残留测定Determination of anthocyanidins in teaT/GZTPA0003-20202目次前言.2第 1 部分茶青中多种农药残留测定 气相色谱-质谱联用法.31 范围.32 规范性引用文件.33 抽样和原理.34 试剂和材料.35 仪器和设备.46 分析步骤.57 定性及定量.68 结果计算.79 灵敏度、精密度、准确度.810 实验要求.811 其他.8附录 A1 88 种农药及其代谢物和内标化合物的保留时间、定量离子对、定性离子对.9附录 B1 88 种农药及其代谢物和内标化合物多反应监测 TIC 总离子流图色.14附录 C1 88 种农药及其代谢物方法定量限、回收率.15第 2 部分茶青中多种农药残留测定 液相色谱-质谱联用法.181 范围.182 规范性引用文件.183 抽样和原理.184 试剂和材料.185 仪器和设备.196 分析步骤.197 定性及定量.208 结果计算.219 灵敏度、精密度、准确度.2110 实验要求.2211 其他.22附录 A2124 农药保留时间及 LC-MS/MS 参数.23附录 B 2124 种农药及其代谢物和内标化合物多反应监测 TIC 总离子流图色.29附录 C 2124 种农药及其代谢物方法定量限、回收率.30第 3 部分茶青中多种农药残留测定 气相色谱法.331 范围.332 规范性引用文件.33T/GZTPA0003-202033 抽样和原理.334 试剂和材料.335 仪器和设备.346 分析步骤.347 定性及定量.368 结果计算.369 灵敏度、精密度、准确度.3710 实验要求.3711 其他.37附录 A3.129 种有机氯农药及其代谢物分组及保留时间.38附录 A3.229 种有机氯农药及其代谢物分组及保留时间.39附录 B 3.1有机磷第一组分组农药及其代谢物 色谱图.40附录 B 3.2有机磷第二组分组农药及其代谢物 色谱图.41附录 B 3.3有机磷第三组分组农药及其代谢物 色谱图.42附录 B 3.4有机氯及拟除虫菊酯第一组分组农药及其代谢物 色谱图.43附录 B 3.6有机氯及拟除虫菊酯第三组分组农药及其代谢物 色谱图.45附录 C 3.1 29 种有机磷农药及其代谢物方法定量限.46附录 C 3.2 29 种有机氯及拟除虫菊酯农药及其代谢物方法定量限.47T/GZTPA0003-20202前言本标准按照 GB/T 1.1-2009 标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写给出的规则起草。本标准的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任；本标准茶青中多种农药残留测定分为 3 个部分；第 1 部分：茶青中多种农药残留测定 气相色谱-质谱联用法第 2 部分：茶青中多种农药残留测定 液相色谱-质谱联用法；第 3 部分：茶青中多种农药残留测定 气相色谱法；本标准由贵州省农产品质量安全监督检验测试中心提出。本标准由贵州省绿茶品牌发展促进会提出并归口。本标准起草单位：贵州省农产品质量安全监督检验测试中心。本标准主要起草人：李俊、蔡滔、庞宏宇、王震、赖飞、杜楠、张兴伦、熊胜利、王志、祝愿、刘佳、王艺蓉、周雪丽、丁静、王晓鹭、刘凯、罗华兰。T/GZTPA0003-20203第 1 部分茶青中多种农药残留测定气相色谱-质谱联用法1 1范围本标准规定了茶青中88种农药残留(见附录A1)的气相色谱-质谱联用法分析法。本标准适用于茶青中88种农药残留量的测定。2 2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 2102-2011 茶叶抽样技术规范GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 3抽样和原理3.13.1抽样按NY/T 2102-2011中“5.1茶园抽样”规定进行。按照茶园面积和地形的不同，采用随机法、对角线法、五点法、Z形法、S形或棋盘法等确定抽样点，每个抽样点应抽鲜0叶0.5-1.0kg。抽取点、抽样步骤、样品处理、运输、储存按NY/T 2102-2011执行。3.23.2原理试样用水浸泡后，用乙腈提取，提取液采用固相萃取净化，气相色谱-质谱联用仪检测，保留时间和离子丰度比定性，内标法或外标法定量。4 4试剂和材料除另有说明外，在分析中仅使用确认为分析纯试剂和GB/T 6682中规定的一级水。4.14.1试剂4.1.1乙腈（CH3CN,CAS号：75-05-8）。色谱纯4.1.2醋酸（CH3COOH,CAS号：55896-93-0）。T/GZTPA0003-202044.1.3氯化钠(NaCL,CAS号：7647-14-5)。4.1.4醋酸钠（CH3COONa,CAS号：6131-90-4）。4.1.5硫酸镁（MgSO4,CAS号：7487-88-9）。4.1.6柠檬酸钠（Na3C6H5O7,CAS号：6132-04-3）。4.1.7柠檬酸氢二钠（C6H6Na2O7,CAS号：6132-05-4）。4.1.8PSA吸附剂（5982-8382、美国安捷伦）4.1.9C18吸附剂（5982-1182、美国安捷伦）4.1.10 GCB粉末(5982-4482，美国安捷伦)4.1.11 微孔过滤膜（尼龙）：13 mm0.2 m4.24.2溶液配制提取液：乙腈-醋酸溶液（99+1）：量取10 mL醋酸加入990mL乙腈中，混匀。4.34.3标准品环氧七氯内标和88种农药及其代谢物标准品，参考附录A1，浓度1 000mg/L。4.44.4标准溶液配制4.4.1标准储备溶液:准确量取0.81.0 mL精确至0.01 mL）各农药标准品，根据标准品的溶解性和测定的需要选丙酮或正己烷等溶剂溶解并定容至10mL，避光-18 保存，有效期1年。4.4.2混合标准溶液：吸取一定量的农药标准储备溶液于25mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度。混合标准溶液避光04保存，有效期3个月。基质混合标准工作溶液应现配现用。4.4.3内标溶液：准确量取0.81 mL精确至0.01 mL）环氧七氯，用乙酸乙酯等溶剂溶解并定容至10 mL，避光-18 保存。5 5仪器和设备5.15.1气相色谱-三重四级杆质谱联用仪：配有电子轰击源（EI）5.25.2分析天平：感量 0.1 mg 和 0.01 g5.35.3匀浆机:转速不低于 15 000 r/min5.45.4高速离心机：转速不低于 4 200 r/min5.55.5旋涡振荡器：转速不低于 3 000 r/minT/GZTPA0003-202055.65.6氮吹仪:可调温，控温精度0.55.75.7食品加工机6 6分析步骤6.16.1试样制备茶青样采集后，冷藏保存带回实验室，在实验室里将茶青用食品加工机粉碎均匀后于-20-16条件下保存。6.26.2提取秤取10.0 g试样（精确至0.01 g），于100 mL离心管中，先加入10.0 mL水，再加入20.0mL乙腈，15 000 r/min匀浆提取4 min（在3 min左右时加入3 g 左右NaCL）,4 000 r/min离心5 min分离出上清液，待净化。6.36.3净化取4.0 mL上清液于预称有75 mg PSA、25 mg C18及4 mgGCB粉末的5 mL离心管里，涡旋60 s，再于4 000 r/min下离心5 min，准确吸取2mL上清液于10mL试管中，40水浴中氮气吹至近干。加100L内标，加1.0 mL乙酸乙酯复溶，微孔滤膜过滤，供气相色谱-串联质谱测定。6.46.4气相色谱-三重四级杆质谱（GC-MS/MS）仪器条件6.4.1.6.4.1.气相色谱条件气相色谱条件a)VF-5MS 石英毛细柱(30 m0.250 mm，0.25 m)；b)升温程序：80 保持 1.0 min，以 20.0 /min 升温到 130.0 保持 1.0 min，以 6.0 C/min 升温到 250.0 保持 5.0 min；再以 8.0 C/min 升温到 300.0 保持 5.0 min；c)载气(He)流速 1.0 mL/min；d)进样口温度(230.0)；e)进样量 1.0 L；不分流进样。6.4.2.6.4.2.质谱条件：质谱条件：a)电子轰击(EI)离子源；b)电子能量（70 eV）；c)气相色谱-质谱传输线温度(280)；T/GZTPA0003-20206d)离子源温度(250)；e)碰撞反应气压力（Ar，1.5 mTor）f)选择性离子多反应监测模式扫描（SeLective Reaction Monitor,SRM）。88 种农药及代谢物监测离子对、碰撞气能量参见附录 A1。6.56.5基质匹配混合标准曲线的绘制基质匹配混合标准工作溶液配制稀释4.4.2中混合标准储备溶液，配成0.02、0.04、0.10、0.20和0.40 mg/L系列的基质匹配混合标准工作溶液。取不含待测物的茶叶样品，按6.1、6.2节节的前处理方法制得空白基质溶液，取空白基质溶液氮气吹干，加入100L内标溶液，加入1.0 mL相应质量浓度的混合标准溶液复溶，过微孔滤膜。基质混合标准工作溶液应现用现配。注：空白基质溶液取样量应与相应的试样处理取样量一致。7 7定性及定量7.17.1保留时间定性在相同的条件下进行样品测定，被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在2.5%之内。7.27.2定量离子、定性离子及子离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定量和定性离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表1规定的范围，则可判断样品中存在目标农药。表 1定性时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度50%20%至 50%10%至 20%10%允许相对偏差20%25%30%50%7.37.3定量内标法或外标面积法定量。7.47.4试样溶液的测定T/GZTPA0003-20207将基质混合标准工作溶液和试样溶液依次注入气相色谱-质谱联用仪中，保留时间和定性离子定性，测得定量离子峰面积，待测样液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超过线性范围时应根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。7.57.5平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。7.67.6空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。8 8结果计算试样中各农药残留量以质量分数计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，内标法按公式（1）计算，外标法按公式（2）计算。10001000231mVAAVVAAisissii（1）10001000231mVAVVAS（2）式中：试样中被测物残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；基质标准工作溶液中被测物的质量浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；A试样溶液中被测物的色谱峰面积:As基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；i试样溶液中内标物的质量浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；si基质标准工作溶液中内标物的质量浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；Asi基质标准工作溶液中内标物的色谱峰面积；Ai试样溶液中内标物的色谱峰面积；V1试样提取溶液体积，单位为毫升（mL）；V2试样提取溶液分取体积，单位为毫升（mL）；V3试样溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。计算结果应扣除空白值，计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留两位有效数字，含量超 1 mg/kg 时保留三位