TJAASS 6-2020 蔬菜中杀螟硫磷的快速测定 免疫层析法.pdf

ICS 65.020B 15团体标准T/JAASS 6-2020蔬菜中杀螟硫磷的快速测定免疫层析法Rapid Determination of Fenitrothion in Vegetablesby Lateral Flow Immunoassay20201012 发布20201012 实施江苏省农学会江苏省农学会发 布全国团体标准信息平台T/JAASS 6-2020目次前言.1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14原理.15试剂与材料.16试样制备.27测定.28结果判定与表述.29 检测限和特异性.3全国团体标准信息平台III前言本文件按照 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。本文件由江苏省农业科学院提出。本文件由江苏省农学会归口。本文件起草单位：江苏省农业科学院、南京农业大学、浙江大学、华南农业大学、广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司。本文件主要起草人：刘凤权、王利民、华修德、王鸣华、郭逸蓉、徐振林、张存政、孙远明、石松。全国团体标准信息平台T/JAASS 6-20201蔬菜中杀螟硫磷的快速测定免疫层析法1范围本文件规定了蔬菜中杀螟硫磷农药残留的免疫层析快速检测方法的原理、试剂与材料、试样制备、测定、结果判定与表述与检测限和特异性。本文件适用于蔬菜中杀螟硫磷农药残留的快速检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法3术语和定义本文件无术语和定义。4原理利用免疫测定中竞争法检测原理，通过在检测区包被一定量的包被抗原，对照区包被羊抗鼠多克隆抗体，利用胶体金标记的抗体与样品及检测区的物质之间的竞争反应，观测在检测条的检测区和对照区呈现的反应结果（试纸条出现色带），然后根据色带颜色的有无，判断农药检出或超标。5试剂与材料5.1杀螟硫磷免疫层析试剂盒，试剂盒中包括阳性参考品、阴性参考品、甲醇、样品处理液、检测液和检测试纸条，检测试纸条使用铝箔袋密封包装。5.2除另有规定外，所有试剂均为分析纯和 GB/T 6682 中规定的二级水。5.3天平 百分之一电子天平5.4滤纸 9 cm 双圈定性滤纸5.5微量移液器 10 L-200 L、100 L-1000 L全国团体标准信息平台T/JAASS 6-202025.6离心管 10 mL 离心管5.7容量瓶 10 mL 容量瓶6试样制备称取1.0 g 0.01 g蔬菜样品，剪碎后加入1 mL甲醇（5.1），静置15 min。加入5 mL样品处理液（5.1），充分混匀后，利用滤纸（5.4）进行固液分离。滤液转移至10 mL容量瓶（5.7）并定容至10 mL（样品处理液冲洗滤纸中的样品）。样品滤液由检测液（5.1）进行5倍稀释。7测定7.1撕开铝箔袋，取出检测试纸条。7.2将试纸条样品区浸入检测液中，在层析作用下向检测试纸条的尾端侧向流动。7.36-8 min（最长不超过 8 min）之内观察检测区和质控区的色带条数和颜色深浅。7.4对试剂盒内的阳性参考品、阴性参考品（5.1）和检测液（空白）进行同样操作，以协助结果判断。8结果判定与表述8.1对照阳性参考品、阴性参考品和空白（检测液）的结果，根据竞争免疫法的原理及试纸条检测区和控制区的色带，按照如下原则进行结果判定：无效：在检测试纸条的对照区未出现色带，表示试纸条已失效；阳性：仅在对照区出现一条红线，表示待测样品中杀螟硫磷含量已超标；阴性：在检测区及对照区各出现一条红线，表示待测样品中杀螟硫磷含量未超标；临界值：在对照区出现一条红线，在检测区出现一条模糊的阴影线，表示待测样品中杀螟硫磷含量接近标准值。8.2凡是结果呈现阳性或临界值的样品均为“阳性可疑”样品，需重复检测两次以上，并可用质谱方法进行确证。全国团体标准信息平台T/JAASS 6-20203图 1 试纸条结构及检测结果判定9检测限和特异性9.1检测限：蔬菜中杀螟硫磷的检测限为 0.5 mg/kg，符合 GB 2763 要求。9.2特异性：试纸条对甲基毒死蜱、甲基对硫磷、倍硫磷、甲基立枯磷、三唑磷等农药的交叉反应均小于 1%。全国团体标准信息平台T/JAASS 6-2020江苏省农学会团体标准蔬菜中杀螟硫磷的快速测定蔬菜中杀螟硫磷的快速测定免疫层析法免疫层析法版权专有版权专有不得翻印不得翻印全国团体标准信息平台