TJAASS 9-2020 水果、蔬菜中吡虫啉农药残留 免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术.pdf

ICS 65.020B 15团体标准T/JAASS 9-2020水果、蔬菜中吡虫啉农药残留免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术Determination of Imidacloprid by High performance liquid chromatographywith immunoaffinity column clean-up20201012 发布20201012 实施江苏省农学会江苏省农学会发 布全国团体标准信息平台T/JAASS 9-2020目次前言.1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14原理.15试剂与材料.16仪器与设备.17试样制备.28测定.29结果判定与表述.310 检测限和重复性.3全国团体标准信息平台III前言本文件按照 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。本文件由江苏省农业科学院提出。本文件由江苏省农学会归口。本文件起草单位：江苏省农业科学院、南京农业大学、浙江大学、华南农业大学、广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司。本文件主要起草人：刘凤权、王利民、华修德、王鸣华、张存政、郭逸蓉、徐振林、石松、孙远明。全国团体标准信息平台T/JAASS 9-20201水果、蔬菜中吡虫啉农药残留免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术1范围本文件规定了吡虫啉农药残留的免疫亲和层析净化高效液相色谱检测技术的原理、试剂与材料、仪器与设备、试样制备、测定、结果计算与表述和重复性。本文件适用于蔬菜、水果中吡虫啉农药残留的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法3术语和定义本文件无术语和定义。4原理试样经过甲醇-水提取后，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有吡虫啉特异性抗体的免疫亲和层析柱层析净化，经高效液相色谱仪分离、检测后，测定试样中吡虫啉的含量。5试剂与材料5.1除另有规定外，所有试剂均为分析纯；实验室用水符合GB/T 6682 中规定的二级水，标准溶液和流动相用水为一级水。5.2甲醇 色谱纯5.3苯 色谱纯5.4乙腈 色谱纯6仪器与设备全国团体标准信息平台T/JAASS 9-202026.1吡虫啉免疫亲和柱，柱容量300 ng。6.2滤纸 9 cm 双圈定性滤纸6.3容量瓶 20 mL 容量瓶6.4高效液相色谱仪7试样制备7.1提取7.1.1取试样可食部分，切碎后，称取 20 g。7.1.2加入 10 mL 乙腈（5.4）-水（70:30）溶液涡旋 5 min，静置 30 min。7.1.3随后将样品溶液在滤纸（6.2）上进行固液分离。7.1.4滤液转移至 20 mL 容量瓶（6.3）并定容至 20 mL（样品处理液冲洗滤纸中的样品）。7.1.5样品滤液由稀释液进行 5 倍稀释，待检测用。7.2净化7.2.1将免疫亲和柱（6.1）连接于 10.0 mL 玻璃定量管下。7.2.2准确移取 10.0 mL 样品提取液注入玻璃定量管中。7.2.3将空气压力泵与玻璃定量管连接，调节压力使溶液以不超过 2 mL/min 流速缓慢通过免疫亲和柱。7.2.4待溶液全部流出后，以 10.0 mL 纯水清洗柱子 2 次，弃去全部流出液。7.2.5准确加入 1.0 mL 甲醇洗脱，流速不超过 1mL/min，收集全部洗脱液于玻璃试管中，加纯水定容为 2.0 mL，供色谱检测用。8测定8.1色谱条件色谱柱：SB-C18 柱、4.6250 mm流动相：甲醇+水（15:85）溶液流速：1.0 mL/min检测波长：紫外波长 270 nm柱温：室温进样量：20 L8.2色谱测定全国团体标准信息平台T/JAASS 9-20203分别取相同体积样液和标准工作溶液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定试样的响应值（峰高或峰面积）。经过与吡虫啉标准溶液谱图比较响应值得到试样中吡虫啉的浓度。9结果计算与表述试样中吡虫啉含量以质量分数X计，单位为毫克每千克（mg/kg），按式（1）计算：（1）式中：Pi：试样溶液中吡虫啉组分的峰面积值；Cs：吡虫啉标准溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；Vs：标准溶液的检测体积（mL）；Ps：吡虫啉标准溶液面积平均值（系列浓度）；m：试样质量，单位为克（g）。测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果表示到小数点后一位。10检测限和重复性10.1检测限：蔬菜、水果中吡虫啉残留量的检测限为 0.2 mg/kg，符合 GB 2763 要求。10.2重复性：在重复实验条件下，两次独立测试结果的绝对差值不大于其算术平均值的 15%。全国团体标准信息平台T/JAASS 9-2020江苏省农学会团体标准水果、蔬菜中水果、蔬菜中吡虫啉吡虫啉农药残留农药残留免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术版权专有版权专有不得翻印不得翻印全国团体标准信息平台