TGZTPA 0004-2019 茶叶中多种农药残留测定液相色谱法.pdf

T/GZTPA团团 体体 标标 准准T/GZTPAT/GZTPA 00040004-20192019茶叶中多种农药残留测定液相色谱法茶叶中多种农药残留测定液相色谱法DeterminationDetermination ofof pesticidepesticide residuesresidues inin teatea byby liquidliquid chromatographychromatography2019-12-26 发布2020-01-01 实施贵贵 州州 省省 绿绿 茶茶 品品 牌牌 发发 展展 促促 进进 会会发布发布全国团体标准信息平台T/GZTPA0004-2019I目次前言.II1 范围.12 规范性引用文件.13 原理.14 试剂和材料.15 仪器与设备.26 分析步骤.27 平行试验及空白试验.38 结果计算.39 精密度.4全国团体标准信息平台T/GZTPA0004-2019II前言本标准按照 GB/T 1.1-2009标准化工作导则第 1 部分：标准的结构和编写给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由贵州省农产品质量安全监督检验测试中心提出。本标准由贵州省绿茶品牌发展促进会归口。本标准起草单位：贵州省农产品质量安全监督检验测试中心、贵州大学。本标准主要起草人：庞宏宇 罗华兰 蔡滔 王艺蓉 王晓鹭 卢平 王震 杜楠 周雪丽 丁静全国团体标准信息平台T/GZTPA0004-20191茶叶中多种农药残留测定茶叶中多种农药残留测定 液相色谱法液相色谱法1范围本标准规定了同时测定茶叶中吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷和阿维菌素多种农药残留的检测方法。本标准适用于我省县级农产品质量安全检测站开展茶叶生产基地茶叶中农药残留例行监测和风险评估时使用。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规则和试验方法GB/T 8302 茶 取样3原理茶叶样品经水浸泡后乙腈高速匀浆提取，盐析离心，氨基固相萃取小柱净化，用乙腈+甲苯（3：1）洗脱农药，用液相色谱测定，以保留时间定性，外标法定量。4试剂和材料4.1 乙腈：色谱纯4.2 甲苯：色谱纯4.3 氯化钠：分析纯4.4 提取液：乙腈4.5 淋洗液：乙腈+甲苯=3:1（V:V）4.6 氨基固相萃取小柱：6mL/500mg 或相当4.7 滤膜:0.20 m，有机相滤膜4.8 农药标准溶液:具有有效性证书4.9 标准溶液配制4.9.1 单一组分标准溶液：用移液管准确量 1000g/mL 各标准品 1.00mL，用甲醇定容 10mL，配制成 100.0g/mL 标准储备液，04 冷藏避光保存。4.9.2 混合标准储备液：全国团体标准信息平台T/GZTPA0004-20192将配置好的单一组分标准溶液（4.10.1）用甲醇作为溶剂配置成 10.0g/mL 混合标准储备液，04 冷藏避光保存。4.9.3 混合标准工作液用 15%甲醇水溶液作为溶剂将混合标准储备液稀释成 0.1g/ml 的混合标准工作溶液，临用现配。5仪器与设备5.1 液相色谱仪：配有可变波长紫外检测器5.2 旋转蒸发仪5.3 匀浆机：转速不低于 10000r/min5.4 离心机：转速不低于 4000r/min5.5 天平：百分之一6 分析步骤6.1 试样的制备按 GB/T 8302 抽取茶叶样品，将样品粉碎，混匀，缩分，密封，作为试样。试样于 4冷藏保存，备用。6.2 提取称取5g试样（精确至0.01g）,于50 mL离心管中，加入10 mL纯水浸泡20分钟加入20.0 mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min,加入4 g氯化钠，盖上盖子剧烈震荡1 min,将离心管放入离心机中以4 000 r/min离心5 min，取10 mL上清液于梨形瓶中，45旋转蒸发至1 mL左右，待净化。6.3 净化用 5 mL 淋洗液（4.6）预淋洗氨基固相萃取小柱，弃去流出液。下接梨形瓶，将 6.2 中待净化的浓缩液转移至氨基固相萃取柱中，用 2mL 淋洗溶液洗涤梨形瓶；并将洗涤液移入萃取柱中，重复三次，再用 25 mL 淋洗液淋洗小柱，收集上述所有流出液于梨形瓶中，45水浴旋转蒸发至近干，用甲醇水溶液（15：85）定容 1mL，用液相色谱仪测定。6.4 测定6.4.1 仪器条件a)色谱柱：C18 柱，4.6 mm5m25cm；b)流动相、梯度洗脱及波长条件见表 1，表 2全国团体标准信息平台T/GZTPA0004-20193表 1 洗脱梯度时间min水%甲醇/乙腈（7+3）%0.00851520.00010023.00010023.01851530.008515表 2 波长条件设置时间/min06.0012.3013.1018.0029.00波长/nm254270247286245254c)柱温：40；d)流速：1.0 mL/min；e)进样量：10L；6.4.2 液相色谱检测及确证在相同的条件下进行样品测定，以保留时间定性。以样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量（定量时标准溶液的峰面积与样品峰面积在3倍范围内）。色谱图参见附录B。7 结果计算试样中被测农药残留量以质量分数?计，单位以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（1）计算。?=V1AV3CsmV2As（1）式中：?试样中被测物残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；Cs 基质标准工作溶液中农药的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；A 试样溶液中被测物的色谱峰面积；全国团体标准信息平台T/GZTPA0004-20194As 基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；V1 提取溶剂总体积，单位为毫升（mL）；V2 吸取出用于检测的提取液的体积，单位为毫升（mL）；V3 试样最终定容体积，单位为毫升（mL）；m 试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。计算结果保留两位有效数字。8 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。全国团体标准信息平台T/GZTPA0004-20195附录 A（参考性附录）农药检测检出限参考数据吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷和阿维菌素检出限参考数据序号中文名英文名保留时间min检出限mg/kg1吡虫啉Imidacloprid11.8870.032啶虫脒Acetamiprud12.0210.033多菌灵Carbendazim13.5180.054除虫脲Diflubenzuron21.2650.035灭幼脲Chlorbenzuron21.7240.046辛硫磷Phoxim22.3420.057阿维菌素Avermectins25.4210.05全国团体标准信息平台T/GZTPA0004-20196附 录 B(资料性附录)液相标准溶液色谱图图 1吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷和阿维菌素标准溶液色谱图全国团体标准信息平台