TSHZSAQS 00131-2022 绵羊鲜精稀释与保存技术规程.pdf

ICS 65.020.30 CCS B 41 团体标准 T/SHZSAQS 001312022 绵羊鲜精稀释与保存技术规程 2022-10-05 发布 2022-10-05 实施 石河子市质量标准化协会 发 布 全国团体标准信息平台T/SHZSAQS 001312022 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 3.1 采精.1 3.2 鲜精.1 3.3 原精.1 3.4 精液密度.1 4 鲜精稀释程序.1 4.1 稀释液用量.1 4.2 稀释前准备.2 4.3 稀释液预热.2 4.4 精液品质.2 4.5 精液稀释.2 5 稀释精液品质与注意事项.2 6 鲜精保存.3 6.1 保存方法.3 6.2 鲜精抽检.3 6.3 鲜精运输.3 6.4 鲜精保存时间.3 附录 A（资料性附录）绵羊鲜精稀释液的配方与配制方法.4 全国团体标准信息平台T/SHZSAQS 001312022 II 前 言 本文件参照GB/T1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则给出的规则起草。本文件起草单位：新疆农垦科学院畜牧兽医研究所、新疆农业职业技术学院。本文件主要起草人：万鹏程、刘昱成、石国庆、傅祥伟、崔炳灿、倪建宏、王晶晶、刘长彬、卢守亮、郭延华、代蓉、张振良。全国团体标准信息平台T/SHZSAQS 001312022 1 绵羊鲜精稀释与保存技术规程 1 范围 本文件规定了绵羊鲜精稀释与保存的术语与定义及鲜精稀释程序、稀释精液品质与注意事项、鲜精保存等。适用于绵羊鲜精的稀释与保存。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB20557 山羊冷冻精液 NY/T 3186 羊冷冻精液生产技术规程 DB65/T 4119 绵羊细管冷冻精液操作规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 采精 利用假阴道获得公羊精液的操作方法。3.2 鲜精 原精及其稀释后未经冷冻的精液。3.3 原精 采自公羊未经处理的精液。3.4 精液密度 每毫升精液内含有的精子数量。4 鲜精稀释程序 4.1 稀释液用量 全国团体标准信息平台T/SHZSAQS 001312022 2 按原精与稀释液1(12)的比例计算稀释液量，保证精液稀释后所含前进运动精子数为3107个以上。4.2 稀释前准备 精液稀释液(见附录A)应在采精前一晚提前配制，移入4左右的冷藏室解冻备用。将消毒的酒精温度计、密度仪的玻璃管、稀释用的量杯以及制作好的集精杯放于37恒温箱中备用。将显微镜的恒温板打开调到37预热，并放入载玻片。4.3 稀释液预热 用37左右水浴或者恒温箱预热（2030)min，稀释时稀释液与绵羊精液的温差不超过3。4.4 精液品质 原精活力和稀释后的活力要求达到60%以上，采精应符合DB65/T4119相关要求。4.5 精液稀释 4.5.1 一步稀释、平衡法 等温稀释液缓慢加入精液，至稀释总量(精液量和稀释液量)的一半，摇匀。在32 34 水浴中暂存10min后加稀释液至稀释总量，可选下列方法中任何种进行平衡及封装：方法一:10min后在2025下进行封装，封装后的细管精液放入不透明的容器内，将容器放入35的低温柜中平衡1.5h4h。方法二:将加完稀释液后的精液放入含有3234水的容器中，放入后送35的低温柜中降温平衡，2h后往容器中加冰块促使其快速降至平衡温度，40min后在低温柜中进行细管封装。空细管亦应降至35。4.5.2 两步稀释、平衡法 将等温的第一液缓慢加入精液中，至稀释总量的一半，摇匀，将稀释精液放入一定容器的3234水浴中，并尽快放至35的低温柜中降温，第二液同时放至35的低温柜中，0.5h1h后加入等温第二液至稀释总量。完成稀释后继续平衡40min于低温柜中进行封装。5 稀释精液品质与注意事项 5.1 全国团体标准信息平台T/SHZSAQS 001312022 3 精液密度：11稀释时不低于3107/mL，12稀释时不低于1107/mL。外观正常、密度大于等于6108个/mL，活力65%的精液进行后续处理。5.2 精子活力不低于0.8。呈直线运动的精子（下限）约70%。活力检查方法应符合GB20557中A.3的相关要求。5.3 稀释前新鲜精液正常呈乳白色或浅乳黄色，应为乳白稍带黄色，无异物；如果颜色异常，红色说明有血液，绿色说明有脓液，清黄色说明有尿液，应该弃掉，不可用于稀释。5.4 稀释前新鲜精液正常无明显异味；腥味说明有脓液，臊味说明混有尿液，应该弃掉，不可用于稀释。6 鲜精保存 6.1 保存方法 稀释后的鲜精用812层纱布包裹或直接放入等温水中，再置于05恒温箱中存放，每间隔8h，将精液重新轻轻混匀。6.2 鲜精抽检 使用前对鲜精进行品质检查，镜检温度为3738，检查合格后方可用于输精。6.3 鲜精运输 运输过程中，将精液放置到05恒温箱中，避免剧烈震荡。6.4 鲜精保存时间 以附录A的稀释液稀释精液时，稀释倍数不超过3倍，稀释后立即使用，使用前要测定不同供精公羊个体稀释鲜精后的精子参数，主要包括活力变化、在38的存活时间等技术参数，根据技术参数值确定鲜精保存的最长时间，最长不超过48h。全国团体标准信息平台T/SHZSAQS 001312022 4 A A 附 录 A（资料性附录）绵羊鲜精稀释液的配方与配制方法 配方 配方成分 配制方法 配方一 葡萄糖1.69g，乳糖6.19g，卵黄20 5mL，甘油5mL，青霉素10万U，链霉素10万U，灭菌蒸馏水 先取灭菌蒸馏水约50mL溶解葡萄糖、乳糖，与卵黄、甘油混合，加灭菌蒸馏水至100mL，最后加入青霉素、链霉素。封口，搅拌30min后待用 配方二 Tris 3.05g，柠檬酸1.66g，蔗糖2.57g，果糖0.75g，维生素E6mL，卵黄15mL，甘油生4mL，青霉素10万U、链霉素10万U，灭菌蒸馏水 先取50 mL灭菌蒸馏水溶解Tris、柠檬酸、蔗糖、果糖、维生素E，与卵黄、甘油混合，加灭菌蒸馏水定容至100 mL，最后加入青霉素，链霉素。封口，搅拌30 min后待用 要求：所有化学试剂为化学纯以上；鸡蛋应新鲜，来源于健康鸡群；水为蒸馏水或双蒸水。B -全国团体标准信息平台