DB52T 1661-2022 地方鸡资源场禽白血病净化技术规程.pdf

?ICS 65.CCS B 0贵地2022-020.30 01 州地方鸡-03-03 发州鸡资源发布 贵省源场禽贵州省市场地 禽白血 场监督管理方血病净理局 发方DB净化技发 布 52标B52/T 166技术规2022-02 准612022规程 06-01 实准 2 实施DB52/T 16612022 I 目次 前言.II 1 范围.3 2 规范性引用文件.3 3 术语和定义.3 4 养殖条件与要求.4 5 检测条件.4 6 净化流程与方法.4 7 种蛋选留与孵化.5 8 净化效果与评估.5 9 无害化处理.5 10 养殖档案记录.5 附录 A（规范性）主要试剂与主要仪器.6 附录 B（资料性）养殖档案记录.7 DB52/T 16612022 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由贵州省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：贵州省畜牧兽医研究所、贵州省畜禽资源管理站、榕江县农业农村局、贵州省榕江山农发展有限责任公司。本文件主要起草人：文正常、王璇、唐继高、张芸、潘淑惠、王永春、张杨子、冉江、姜兆芳、黎恒铭、沈德林、刘嘉、明炜、陈亚亚、吴玙彤。1 范围本文选留与孵本文2 规范下列仅该日期文件。GB GB/GB GB GB/NY/NY/NY 中华3 术语下列 3.1 贵州被列 3.2 资源从事 3.3 禽白在贵性检测筛 3.4 禽白p27抗原，禽 文件规定了贵孵化、净化效文件适用于贵性引用文件 列文件中的内期对应的版本3095 环境空T 6682 分析13078 饲料18596 畜禽T 26436 禽T 388 畜禽T 680 禽白5027 畜禽饮华人民共和国和定义 列术语和定义州地方鸡 列入国家地源场 事地方鸡品种白血病净化 贵州地方鸡养筛查，淘汰感白血病病毒 p抗原为禽白血禽白血病外源地方鸡贵州地方鸡资效果与评估、贵州地方鸡资内容通过文中本适用于本文空气质量标准析实验室用水料卫生标准 禽养殖业污染禽白血病诊断禽场环境质量白血病病毒p2饮用水水质 国农业部农医义适用于本文地方畜禽品种种资源保护或养殖场或指定感染阳性个体p27 抗原 血病病毒衣壳源性病毒和“鸡资源场资源场禽白血无害化处理资源场。中的规范性引文件；不注日准 水规则和试验染物排放标准断技术 量标准 27抗原酶联免医发2017文件。种资源目录或提纯复壮的定区域内，对通体以实现根除壳蛋白，该蛋“E”亚群内源 场禽白血病血病净化养殖理和养殖档案引用而构成本期的引用文件验方法 准 免疫吸附试验25号 病死原产于贵州的养殖场。通过持续监测除禽白血病的蛋白在各亚群源性病毒，在病净化技殖条件与要求记录等。文件必不可少件，其最新版验方法 死及病害动物无的地方鸡品种测禽白血病阳过程。群之间具有高在感染细胞后技术规程、检测条件、少的条款。其版本（包括所无害化处理技种。阳性感染的地高度的同源性后都可产生。DB52/T 程、净化流程与其中，注日期的所有的修改单技术规范 地方鸡种群，性和保守性，166120223 与方法、种蛋的引用文件，单）适用于本经多代次阳为群特异性2 蛋本性DB52/T 1664 3.5 禽白血Ab和J亚4 养殖条件资源场4.1 应符合 NY 5对实施4.2 对净化4.3 场区消4.4 每天及4.5 5 检测条件检测实5.1 主要试5.2 6 净化流程净化流6.1 6.1.1 根据能测定后，进行血清感和泄殖腔棉6.1.2 对阴抗原 ELISA其对应的种6.1.3 第一剂盒和胶体检测。淘汰6.1.4 在留用禽白血病用 PCR 方法6.1.5 在完日龄雏鸡开样品采6.2 6.2.1 无菌6.2.2 鸡翅6.2.3 每只6.2.4 将种612022 血病 Ab 和 J 亚亚群病毒为外件与要求 场养殖环境空5027 的要求施净化的核心化鸡群使用弱消毒每周不少及时清除粪污件 实验室用水规试剂与主要仪程与方法 流程 据资源场种群采集每只鸡感染抗体阳性棉拭子进行 AL阴性种鸡繁育检测试剂盒种母鸡，阴性一世代净化种体金快速检测汰阳性鸡。留种前的第 2病抗原 ELISA法进行 ALV p2完成第一世代开始，重复 6.采集与处理 菌采集鸡泄殖翅静脉无菌采只种母鸡收集种公鸡泄殖腔亚群病毒 外源性禽白血空气质量应符求；场环境质量心种鸡群要单弱毒疫苗的质少于 2 次。污，并对粪便规则和检测方仪器见附录 A群规模，选定的血清和泄殖性检测，同时用LV p27 抗原交育的第一世代盒和胶体金快速性雏鸡按全同胞种鸡开产初期试纸条进行28 周龄30检测试剂盒和27 抗原检测代的禽白血病1.26.1.4殖腔棉拭子加采血，用高速集 2 枚种蛋，腔周围用酒精血病病毒的两符合 GB 3095量应符合 NY单独分区隔离质量规范做到便做无害化处方法应符合 GA。定一定数量的殖腔棉拭子并用禽白血病抗交叉检测。淘代 1 日龄雏鸡速检测试纸条胞上笼育雏和期，全群采集ALV p27 抗原周龄，全群采和胶体金快速。淘汰阳性鸡病检测与净化4 操作步骤。加入 1 mL 样品速离心机分离每枚种蛋吸精棉球擦拭干两个不同亚群的规定；饲Y/T 388 的要离饲养并远离到疫苗无外源处理。GB/T 6682 规的拟净化核心并标记，用禽抗原 ELISA 检淘汰阳性鸡，鸡（出壳 24 小条进行 ALV p和育成。集鸡血清和泄原交叉检测；采集鸡泄殖腔速检测试纸条鸡，阴性种鸡化后，对 2 品稀释液后，离血清样品用吸取 1 mL 蛋清干净，轻轻按群,对禽具有较料卫生应符合要求。离其他鸡群，源性禽白血病规定。心基础种群，禽白血病 Ab检测试剂盒和阴性种鸡人小时以内）全p27 抗原交叉泄殖腔棉拭子公鸡采集精腔棉拭子，同条进行 ALV p鸡进行人工授3 个世代次反复冻融 3用于检测。清，-20 反按摩其腹部至较强的致病性合 GB 13078安排专职人员毒污染。对净化种鸡群和 J 亚群抗体胶体金快速检人工授精后收全部采集胎粪叉检测，按全，用禽白血病精液用 PCR 方时每只母鸡取27 抗原交叉授精，收集种次的鸡群禽白血次待检。复冻融 3 次后至尾部，待泄殖性。的规定；饮用员管理。群完成生产和体 ELISA 检测检测试纸条进收集种蛋孵化粪并标记，用禽同胞淘汰阳性病抗原 ELIS方法进行 ALV 取 2 枚种蛋叉检测；采集公种蛋进行孵化血病检测与净后用于检测。殖腔外翻时用水水质和繁育性测试剂盒进行血清化。禽白血病性雏鸡及SA 检测试p27 抗原的蛋清，公鸡精液化。净化从 1。，轻轻挤压泄殖腔离心取上6.2.5 轻挤压雏次后吸取检6.3 6.3.1 6.3.2 6.3.3 净6.4 6.4.1 一检测样6.4.2 并进行无7 种蛋所有编号的孵8 净化对8.1 J 亚群血为资源场要再延续对8.2 国家畜禽9 无害病9.1 鸡9.2 10 养殖每批处理等，腔外缘，将精上清液用于检当天收集出壳雏鸡的腹部，取上清用于检测净化技术 禽白血病病毒禽白血病病毒禽白血病病毒化检测要求 对用禽白血病样本鸡的血清要加强对鸡群无害化处理。选留与孵化 有留种母鸡经孵化纸袋或纸效果与评估 实施净化后血清抗体及 p2场核心种群达续下一个世代资源场商品扩禽标准化示范化处理 死鸡的无害化粪、垫料、污殖档案记录 批鸡应有养殖养殖档案记精液接入装有检测。壳雏鸡胎粪，排出胎粪，检测。毒 p27 抗原酶毒 p27 抗原毒抗原快速检病病毒 p27 抗清、泄殖腔棉群的观察，密 经产的全部种纸盒中，放入的第三或第四27 抗原检测达到禽白血病代次的净化。扩繁种群按范场建设对鸡化处理应符合污水等废弃物殖档案（附录记录保存两年有 1 mL 稀释液，用灭菌指形装进样品管酶联免疫吸附PCR 特异性检检测试纸条的抗原酶联免疫棉拭子或蛋清密切监视鸡群种蛋应编号并入孵化器集中四世代核心种阳性率在 1%病净化合格标 10%随机进行鸡禽白血病的合农医发2物的无害化处录B），包括生年以上。液（含青链霉形管按鸡只个管中，用洁净附试验方法应检测方法符合的操作方法参疫吸附试验和清检测结果不群状态，对有并与母鸡编号中孵化。种群种母鸡按%以下，公鸡精标准。若母鸡行抽检，若禽的净化标准要201725 号的处理应符合 G生产、饲料和 霉素的灭菌 P个体分别收集净小棒搅动指应符合 NY/T 合 GB/T 2643参照试剂盒说和胶体金试纸一致的，均判有疑似临床症一一对应，将按10%随机进精液禽白血病鸡群禽白血病抗禽白血病 p27求。的规定。GB 18596 的规和兽药使用、PBS 液）的灭集样品，加入指形管里胎粪680 的要求。36 的规定。说明书进行。纸条检测方法判定为阳性，症状的病鸡及将同一只母鸡进行抽检，若母病 p27 抗原检抗原抗体监测抗原检测阳规定。消毒、免疫DB52/T 灭菌离心管中入 1 mL 的样品粪，待混匀经。法进行交叉检，并做淘汰处及已死亡鸡要鸡产的种蛋置母鸡禽白血病检测全部为阴测阳性率高于阳性率在 7%以疫、诊疗和病166120225 中，混匀后，品稀释液，轻经反复冻融 3检测时，如同处理。要及时淘汰，置于带有母鸡病A/B亚群、阴性，则判定于 1%，则需以内，则符合病死禽无害化2 轻3同鸡定需合化DB52/T 16612022 6 A A 附录A （规范性）主要试剂与主要仪器 A.1 主要试剂：禽白血病 Ab 和 J 亚群抗体 ELISA 检测试剂盒、禽白血病抗原 ELISA 检测试剂盒、禽白血病病毒抗原胶体金快速检测试纸条、病毒基因组 DNA/RNA 提取试剂盒、2Taq PCR MasterMix、Tris、EDTA、核酸染色剂、Marker 等。A.2 主要仪器：全自动酶标仪、台式高速冷冻离心机、超低温冰箱、紫外可见分光光度计、梯度 PCR仪，核酸电泳系统与凝胶成像分析系统、电泳仪、微量移液器等。DB52/T 16612022 7 B B 附录B （资料性）养殖档案记录 表B.1 生产记录 圈舍号 时间 原因 数量及来源 禽（产品）调出（出售）死淘数存栏数记录人 备注数量 来源 数量 去向（地点）表B.2 饲料和兽药使用记录 使用时间 名称 生产企业 批号/生产日期 规格及用量停用或 休药时间 记录人 备注 DB52/T 16612022 8 表B.3 消毒记录 日期 消毒场所 消毒药名称 用药剂量 消毒方法 记录人 表B.4 免疫记录 时间 圈舍号 存栏数量 免疫数量 疫苗名称及规格 生产企业名称批号（有效期）免疫方法免疫剂量 记录人 备注 时间 圈号 日期 舍号 禽标识编码 日 数日龄 发病数 病 数量 表病因 诊疗结果 表B.6 病死因 表B.5 诊疗记用药名称用药方法 病死禽无害化畜禽标识 编码 记录 用药数量停药时间 化处理记录 处理方法 休药期 出栏时间 处理单位处理人 DB52/T 数量 执业兽（签 位或人 备166120229 兽医师签名）备注 2 DB52/T 1661-2022