ICS65.020.01B16DB15内蒙古自治区地方标准DB15/T1919—2020马铃薯黑痣病室内抗性鉴定技术规程TechniqueStandardsforResistantIdentificationofStemCankerandBlackScurfbyRhizoctoniaSolaniinPotatoinRoom2020-06-28发布2020-07-28实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T1919—2020前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由内蒙古农业大学提出。本标准由内蒙古自治区马铃薯生产与种植标准化技术委员会（SM/TC42）归口。本标准起草单位：内蒙古农业大学、中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、乌兰察布市农牧业科学研究院。本标准主要起草人：张笑宇、于卓、李得宙、于肖夏、卢艳丽、王凤梧、张冬梅、李宇晨、刘雨薇、王野、冯亚艳、王丽玮、邢星。DB15/T1919—2020马铃薯黑痣病室内抗性鉴定技术规程1范围本标准规定了室内条件下马铃薯抗黑痣病鉴定材料的选择与鉴定方法。本标准适用于马铃薯品种（系）在室内条件下对黑痣病抗性水平的鉴定。2鉴定材料2.1马铃薯选用抗病品种底西芮、感病品种大西洋、被鉴定品种（材料）的块茎和组培苗。2.2病原菌选用从内蒙古自治区马铃薯主要种植区发病植株上分离得到的黑痣病致病菌株。2.3培养基PDA培养基、改良的Richard培养基、MS培养基。3鉴定方法3.1薯片接菌法3.1.1PDA培养基制备将马铃薯去皮切成2cm2~3cm2的小块，取200g加入1000mL水，在锅内煮20min~30min，至马铃薯软而不烂时，用2层纱布过滤，滤液加入琼脂粉15g~18g，加热搅拌至融化，再加葡萄糖20g搅拌溶解，然后定容至1000mL，分装到三角瓶内，121℃高压湿热灭菌20min，冷却至室温备用。3.1.2病原菌活化将保存的黑痣病病原菌取小块放置PDA平板中央，放25℃恒温培养箱中培养进行活化。3.1.3操作方法——灭菌。将健康的马铃薯块茎用自来水洗净，再用0.5%的KMnO4溶液进行灭菌20min；——切片。将灭菌马铃薯无菌操作切成厚约0.6cm的薯片，放在装有2层湿润滤纸（加10mL无菌蒸馏水）的培养皿中；——接种。将在PDA培养基上培养4d的马铃薯黑痣病菌菌饼（直径0.5cm）倒放在薯片中央，每个薯片接1个菌饼，每份材料处理20片；——培养。接种后的马铃薯片置25℃恒温培养箱内黑暗培养。DB15/T1919—202023.1.4调查和抗性评价接种的马铃薯片培养48h，用十字交叉法测量病斑直径，计算病斑面积，根据病斑面积大小评价马铃薯材料的抗病性。评价标准如下：——病斑面积为0.00免疫（I）；——病斑面积为0.01~0.50高抗（HR）；——病斑面积为0.51~1.00中抗...
