SNT 1746-2006 进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素A的检验方法.pdf

SN/T1746-2006工作溶液。4.3仪器设备4.3.1高效液相色谱仪：带有荧光检测器4.3.2高速均质器：18000r/min-22000r/min。4.3.3玻璃注射器：10ml。4.3.4玻璃试管：直径12mm,长75mm,无荧光特性。4.3.5空气压力泵。4.3.6微量注射器：10044.3.7槽纹折叠滤纸。4.3.8赭曲霉毒素A免疫亲和柱。4.3.9玻璃纤维滤纸：直径11cm,孔径1.54m,无荧光特性。4.4分析步骤4.4.1提取准确称取试样50.0g(准确到0.1g)(大豆需要暨细且粒度2mm)于均质器配置的搅拌钵中，加入5.0g氯化钠(4.2.3)及100ml甲醇(4.2.1)（适用于油菜籽）或100mL甲醇+水(8+2)(4.2.2)，以均质器高速搅拌提取1min。以槽纹折叠滤纸(4.3.7)过滤，准确移取10.0ml.滤液并加入40.0mL水稀释，用玻璃纤维滤纸(4.3.9)过滤至滤液澄清，滤液备用。4.4.2净化将免疫亲和柱(4.3.8)连接于10ml玻璃注射器(4.3.3)下。准确移取10.0ml.样品提取液于玻璃注射器中，将空气压力泵(4.3.5)与玻璃注射器相连接，调节压力使溶液以约6mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2ml,一3mL,空气通过免疫亲和柱。以10mL淋洗缓冲液(4.2.6)和10mL水先后淋洗免疫亲和柱，弃去全部流出液，并使2mL.3ml.空气通过免疫亲和柱。准确加人1.5mL甲醇(4.2.1)洗脱，流速为1ml/min2ml/min。收集全部洗脱液于玻璃试管(4.3.4)中，供检测用。4.4.3测定4.4.3.1高效液相色谱条件a)色谱柱：Cs柱（柱长150mm,内径3.0mm,填料直径5m):b)流动相：乙腈+0.012mol/L膦酸钠溶液pH7.5(60+40),1g/L.十六烷基三甲基溴酸铵：c)流速：0.8mI/min;d)荧光检测器：激发波长360nm,发射波长420nm:e)柱温：室温；f)进样量：10l4.4.3.2定量用进样器吸取10！赭曲霉毒素A标准工作溶液(4.2.12)注人高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值（蜂高或峰面积），得到赭曲霉毒素A标准溶液高效液相色谱图，谱图参见图A.1。用进样器吸取101样品洗脱液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定试样的响应值（峰高或峰面积)。经过与赭曲霉毒素A标准溶液谱图比较响应值得到试样中赭曲霉毒素A的浓度。4.4.4空白试验除不加试样外，按上述步骤进行4.4.5结果计算样品中赭曲霉毒素A的含量按式(1)计算：X,=9-cm).VW(】)2