ICS65.020.20B04DB12天津市地方标准DB12/T838—2018辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定方法MethodofidentifyingseedpurityofpepperbyusingSSR-basedmarker2018-11-07发布2018-12-01实施天津市市场和质量监督管理委员会发布DB12/T838—2018I前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由天津市农村工作委员会提出并归口。本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所、天津市蔬菜研究中心、黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所。本标准主要起草人：兰青阔、吕敬刚、赵新、王成、兰璞、焦荻、高素燕、陈锐、关海涛、张耀中、焦贺敏。DB12/T838—20181辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定方法1范围本标准规定了辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定方法的原理、仪器设备及试剂、方法步骤、纯度计算。本标准适用于辣椒单交种的纯度鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1种子纯度seedpurity种子在SSR分子标记带型方面典型一致的程度，用具有本品种特异带型的种子粒数占鉴定样品种子粒数的百分率表示，以反映某品种特征特性的一致性程度。3.2聚合酶链式反应polymerasechainreaction(PCR)一种在体外通过酶促反应扩增特异DNA片段的技术。3.3简单重复序列simplesequencerepeat(SSR)由几个核苷酸（1～6个）为重复单位聚集而成的长达几十个至几百个bp（一般为100～200）的串联重复序列，又称微卫星序列或短串联重复序列，其高度多态性主要来源于串联数目的不同。3.4分子标记molecularmarker以蛋白质、核酸分子的多态性为基础，鉴定生物在遗传上的差异。4原理SSR分布于辣椒整个基因组，每个位点上重复单位的数目不同造成了品种间的多态性，利用PCR技术将多态的SSR扩增出来，通过电泳检测扩增产物，利用电泳图谱进行辣椒种子纯度鉴定。5仪器设备及试剂DB12/T838—201825.1仪器设备PCR仪；测序电泳槽；水平电泳槽；高压电泳仪（3000V，400mA，400W）；万分之一电子天平；微量加样器；磁力搅拌器；台式离心机；紫外-可见成像系统；胶片观察灯；水平摇床；高压灭菌锅；pH计等。5.2试剂乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）；三羟甲基氨基甲烷（Tris）；盐酸（HCl，36%）；十二烷基硫酸钠（SDS）；氯化...
