SNT 3538-2013 出口食品中六种合成甜味剂的检测方法 液相色谱-质谱质谱法.pdf

SN/T3538-2013出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了出口食品中甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜6种人工合成甜味剂检测的液相色谱质谱/质谱测定和确证方法。本标准适用于奶粉、液态奶、酸奶、奶油、奶酪、冰激凌、红酒、果汁、糕点、蜜饯、甜酸藠头中甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中人工合成甜味剂采用甲酸-三乙胺缓冲液(pH=4.5)提取，HLB固相萃取小柱净化或用甲醇-水(1+1，体积比)提取后稀释进样，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。4试剂和材料除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1乙腈：液相色谱级。4.2甲醇：液相色谱级。4.3甲酸。4.4甲酸铵。4.5三乙胺。4.6亚铁氰化钾。4.7乙酸锌。4.8三氯甲烷（氯仿）。4.910%亚铁氰化钾溶液：10g亚铁氰化钾溶解于100mL水中。4.1020%乙酸锌溶液：20g乙酸锌溶解于100mL水中。4.110.1%甲酸-5mmol/L甲酸铵溶液：取1mL甲酸、0.315g甲酸铵，用水稀释并定容至1000mL。4.12甲酸-三乙胺缓冲溶液(pH=4.5):取0.8mL甲酸、2.5mL三乙胺，用水稀释并定容至1000mL。4.13甲醇-水(1十1，体积比)：量取100mL甲醇，加入100mL水，混匀备用。4.14甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜标准物质：纯度95%，基本信息参见附录A。4.15标准贮备液：准确称取适量的4.14中的标准物质，用甲醇-水(1+1，体积比)分别配制成质量浓1SN/T3538-2013度为1.0mg/mL的标准储备溶液，一18下避光保存，可稳定12个月以上。4.16混合标准中间溶液：取4.15中的标准贮备液适量，用甲醇-水(1十1，体积比)配制成104g/mL的标准混合溶液，4下避光保存，可稳定3个月以上。4.17标准工作溶液的配制：吸取适量的4.16中的混合标淮中间溶液，用空白样品基质配制成适当浓度的混合标准工作溶液，使用前配制。4.18固相萃取小柱：Waters oasis HLB固相萃取小柱，6mL,600mg或相当者，4.19海砂：化学纯，粒度0.65mm0.85mm。5仪器和设备5.1高效液相色谱质谱/质谱仪：配电喷雾离子源(ESI)。5.2分析天平：感量为0.01g和0.0001g。5.3涡旋混匀器。5.4高速离心机（最大转速10000r/min)。5.5氮气吹干仪。5.6固相萃取装置。5.7超声清洗器5.8研钵。5.9离心管：聚丙烯，具塞，50mL6试样制备与保存6.1一般要求在制样的操作过程中，应防止样品受到污染我发生残留物含量的变化。6.2试样制备取有代表性样品500g,混匀，装人洁净的盛样容器内，密封饼标明标记。6.3试样保存奶粉、红酒、果汁、糕点、蜜饯、甜酸藠头于04以下保存，液态奶、酸奶、奶油、奶酪、冰激凌于一18以下冷冻保存。7测定步骤7.1提取7.1.1奶粉、液态奶、酸奶、奶油、奶酪、冰激凌称取奶粉1g(精确至0.01g),液态奶、酸奶、冰激凌各2g(精确到0.01g)试样于50mL离心管中，称取2g(精确至0.01g)奶油、奶酪于研钵中，加人5g海砂充分进行研磨，使其分散均匀，研磨后的样品置于50mL离心管中，加入15mL提取液(4.12)，涡旋混匀3min,超声30min后，取出加入1mL10%亚铁氰化钾(4.9)和1mL20%乙酸锌溶液(4.10)以及5mL三氯甲烷，涡旋混匀2min,以7500r/min的速度离心5min,将上层清液转移至另一支50mL离心管中。在残渣中再加人15mL提取液(4.12)重复以上提取过程，合并两次提取液，待净化。2