SNT 2445-2010 进出口动物源食品中五氯酚残留量检测方法 液相色谱-质谱质谱法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口动物源食品中五氯酚残留量检测方法液相色谱 质谱 质谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狆 犲 狀 狋 犪 犮 犺 犾 狅 狉 狅 狆 犺 犲 狀 狅 犾 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准的附录 和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：深圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。本标准主要起草人：赵凤娟、肖陈贵、岳振峰、林黎明、徐锦忠、高均丽、李丽苏、张建莹。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 进出口动物源食品中五氯酚残留量检测方法液相色谱 质谱 质谱法范围本标准规定了动物源食品中五氯酚残留量的制样、液相色谱 质谱质谱测定方法。本标准适用于猪肝、猪肾、猪肉、牛奶、鱼肉、虾、蟹等动物源食品中五氯酚残留的测定。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。分析实验室用水规格和试验方法方法提要试样中的五氯酚残留用碱性乙腈水溶液提取，经 固相萃取柱净化，浓缩、定容后，用液相色谱 质谱质谱仪检测和确证，外标法定量。试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为 级，水为 规定的一级水。乙腈。甲醇。乙腈水：（体积比）。三乙胺：分析纯。三乙胺乙腈 水溶液：准确量取 三乙胺（），转移入 容量瓶，用乙腈水（）定容至刻度，混合均匀。甲酸。乙酸铵。氨水溶液：量取 浓氨水（），转移入 容量瓶，用水定容至刻度，混合均匀。甲酸甲醇溶液：量取 甲酸，转移入 容量瓶，用甲醇定容至刻度，混合均匀。甲酸甲醇水溶液：取一定量甲酸甲醇溶液（）与水等体积混合均匀。乙酸铵水溶液：准确称取 乙酸铵（），溶于水中，转移到 容量瓶中，定容至刻度，混和均匀。标准物质：五氯酚酸钠（），编号：，纯度 ，或相当。标准溶液 标准储备溶液：称量经折算相当于 （精确到 ）五氯酚的标准品，用甲醇溶解并定容至 棕色容量瓶中，得质量浓度为 的标准储备溶液。此储备液可在 以下避光存放 个月。犛 犖犜 标准工作溶液：标准工作溶液根据需要使用前用空白样品基质溶液配制。固相萃取（）柱：，或相当。使用前依次用 甲醇和 水活化。氮气：纯度大于等于 。仪器与设备 液相色谱串联四极杆质谱仪：配电喷雾离子源。分析天平：感量 ，。旋涡混合器。离心机，。固相萃取真空装置。机械真空泵。组织捣碎机。均质器。超声波仪。吹氮浓缩仪。样品制备与保存 制样要求制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。动物肌肉、肝脏、肾脏、鱼肉、虾和蟹从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约 ，用组织捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于 以下冷冻存放。牛奶样品从所取全部样品中取出有代表性样品约 ，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于 以下冷冻存放。测定步骤 样品提取 肌肉、鱼肉、肝脏、肾脏、虾和蟹称取均质试样（精确到），置于 具螺旋盖聚丙烯离心管中，加入 三乙胺的乙腈 水溶液（）。肌肉和鱼肉样品均质提取 ；肝脏、肾脏、虾和蟹样品旋涡混合 ，超声提取 。离心 ，收集上清液于一具刻度离心管中。离心后的残渣用约 三乙胺的乙腈 水溶液（）重复上述提取步骤次，合并上清液，混匀。牛奶称取均质试样（精确到 ），置于 具刻度螺旋盖聚丙烯离心管中，加入 三乙胺的乙腈水溶液，旋涡混合 ，超声提取 ，离心 ，收集上清液于一具刻度离心管中。固相萃取净化将 中所得提取溶液转入经过预处理的 固相萃取柱中（），以约滴流速使样品溶液全部通过固相萃取柱，弃去流出液。依次用 氨水溶液（）、甲醇、甲酸的甲醇 水溶液（）淋洗，淋洗液完全通过小柱后，弃去流出液，用真空泵抽干固相萃取柱 以上。以 甲酸甲醇溶液（）洗脱，洗脱液用干净的 具刻度试管收集，水浴下吹氮浓缩至犛 犖犜 ，用水定容至，混匀。溶液以 有机滤膜过滤，滤液可直接供液相色谱 质谱质谱仪测定。测定 液相色谱条件）色谱柱：，（内径），或相当者；）流动相：甲醇 乙酸铵溶液，梯度洗脱（梯度时间表见表）；表液相色谱的梯度洗脱条件时间 流速（）乙酸铵溶液甲醇 ）流速：；）柱温：；）进样量：。质谱条件）离子化模式：电喷雾电离负离子模式（）；）质谱扫描方式：多反应监测（）；）分辨率：单位分辨率；）其他参考质谱条件见附录；）定量离子对：，定性离子对：、。液相色谱 质谱质谱仪测定根据样液中被测化合物的含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中待测化合物的响应值均应在仪器的检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参差进样测定。五氯酚的参考保留时间为 ；标准品色谱图参见附录中图。结果计算与表述 定性测定选择对母离子进行 监控，在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与基质标准溶液的保留时间偏差在 之内；且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。表定性时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 定量测定在仪器最佳工作条件下，对基质混合标准工作溶液进样，以峰面积为纵坐标，基质混合工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内，如果超出仪器线性响应范围，应用空白基质溶液进行适当稀释。五氯酚标准品的多反应监测色谱图参见附录中的图。犛 犖犜 结果计算与表述采用外标法定量，按式（）计算五氯酚残留量。计算结果需扣除空白值。犡犮犞犿 （）式中：犡 试样中被测组分残留量，单位为微克每千克（）；犮 从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每升（）；犞 样品溶液最终定容体积，单位为毫升（）；犿 最终样品溶液所代表的试样质量，单位为克（）。测定低限与回收率 测定低限本方法对五氯酚的测定低限为 。回收率猪肉、猪肝、猪肾、牛奶、鱼肉、虾、蟹中五氯酚的回收率数据见表。表五氯酚残留的添加回收率试验数据物质种类添加浓度（）回收率猪肉猪肝猪肾牛奶鱼肉虾蟹五氯酚 犛 犖犜 附录犃（资料性附录）参考质谱条件）质谱条件）气帘气压力（）：（）（氮气）；）电喷雾电压（）：；）离子源温度（）：；）雾化气压力：（）（氮气）；）辅助气压力：（）（氮气）；）其他质谱参数见表 。表 犃 主要参考质谱参数化合物母离子（）子离子（）驻留时间 五氯酚 离子为定量离子；对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。）非商业性声明：附录 所列参考质谱条件是在 型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛 犖犜 附录犅（资料性附录）标准品的多反应监测（犕犚犕）色谱图）图犅 犵犔五氯酚的多反应监测（犕犚犕）色谱图犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犃 狀 狀 犲 狓犃犪 狀 犱犪 狀 狀 犲 狓犅狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 犲 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱狑 犪 狊狌 狀 犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳犖 犪 狋 犻 狅 狀 犪 犾 犚 犲 犵 狌 犾 犪 狋 狅 狉 狔犆 狅 犿犿 犻 狊 狊 犻 狅 狀 犳 狅 狉犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犪 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犛 犺 犲 狀 狕 犺 犲 狀犃 犮 犪 犱 犲 犿 狔狅 犳 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲，犛 犺 犪 狀 犱 狅 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪，犪 狀 犱犑 犻 犪 狀 犵 狊 狌犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狑 犪 狊 犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犣 犺 犪 狅犉 犲 狀 犵 犼 狌 犪 狀，犡 犻 犪 狅犆 犺 犲 狀 犵 狌 犻，犢 狌 犲犣 犺 犲 狀 犳 犲 狀 犵，犔 犻 狀犔 犻 犿 犻 狀 犵，犡 狌犑 犻 狀 狕 犺 狅 狀 犵，犌 犪 狅犑 狌 狀 犾 犻，犔 犻 犔 犻 狊 狌犪 狀 犱犣 犺 犪 狀 犵犑 犻 犪 狀 狔 犻 狀 犵 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犪狆 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犳 狅 狉犲 狀 狋 狉 狔 犲 狓 犻 狋 犻 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲狆 狉 狅 犿 狌 犾 犵 犪 狋 犲 犱犳 狅 狉狋 犺 犲犳 犻 狉 狊 狋 狋 犻 犿 犲 犛 犖犜 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狆 犲 狀 狋 犪 犮 犺 犾 狅 狉 狅 狆 犺 犲 狀 狅 犾 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲 犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊狅 犳狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 狀 狋 犻 犳 犻 犲 犱犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犫 狔犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔 犿 犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔狅 犳狆 犲 狀 狋 犪 犮 犺 犾 狅 狉 狅 狆 犺 犲 狀 狅 犾 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犵 犻 狀 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲 狋 狅犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狆 犲 狀 狋 犪 犮 犺 犾 狅 狉 狅 狆 犺 犲 狀 狅 犾 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀狆 狅 狉 犽，狊 狑 犻 狀 犲 犾 犻 狏 犲 狉，狊 狑 犻 狀 犲犽 犻 犱 狀 犲 狔，犿 犻 犾 犽，犳 犻 狊 犺，狊 犺 狉 犻 犿 狆犪 狀 犱犮 狉 犪 犫 犙 狌 狅 狋 犲 犱狀 狅 狉 犿 犪 狋