SNT 3040-2011 化妆品中嗜麦芽寡食单胞菌检测方法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 化妆品中嗜麦芽寡食单胞菌检测方法犇 犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀狅 犳犛 狋 犲 狀 狅 狋 狉 狅 狆 犺 狅 犿 狅 狀 犪 狊犿 犪 犾 狋 狅 狆 犺 犻 犾 犻 犪犻 狀犮 狅 狊 犿 犲 狋 犻 犮 狊 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局、潍坊医学院。本标准主要起草人：林黎明、刘云国、赵乃昕、雷质文、吴兴海。犛 犖犜 化妆品中嗜麦芽寡食单胞菌检测方法范围本标准规定了化妆品中嗜麦芽寡食单胞菌的检验方法。本标准适用于各类化妆品中嗜麦芽寡食单胞菌的检验。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。化妆品微生物标准检验方法总则术语和定义下列术语和定义适用于本文件。嗜麦芽寡食单胞菌犛 狋 犲 狀 狅 狋 狉 狅 狆 犺 狅 犿 狅 狀 犪 狊犿 犪 犾 狋 狅 狆 犺 犻 犾 犻 犪又名嗜麦芽寡养单胞菌。是一种严格的非发酵型需氧革兰氏阴性杆菌，是能引起感染的条件致病菌，与眼睛、泌尿器官、伤口和呼吸道的感染有关。广泛分布于水、土壤、植物根系、人和动物的体表与消化道中。嗜麦芽寡食单胞菌在营养琼脂上呈灰黄色、针尖状菌落，直径，中央突起。设备和材料 吸管：，分刻度 ；，分刻度。灭菌平皿：直径，底部平整的玻璃或一次性塑料灭菌平皿。恒温培养箱：、。显微镜。接种针、接种环（）。灭菌的样品处理器具：镊子、剪刀、勺子。天平：量程 ，精度。高压灭菌器。灭菌小试管：。可调移液器：，。均质器。培养基和试剂 液体培养基：见 。嗜麦芽寡食单胞菌选择性增菌肉汤（）基：见 。犛 犖犜 培养基：见 。嗜麦芽寡食单胞菌选择性分离培养基（）：见 。无机盐基础培养基（）：见 。、培养基：见 。液体石蜡。吐温 。生理盐水。检验程序 方法原理嗜麦芽寡食单胞菌中 以上的菌株需要含硫氨基酸作为生长因子才能生长，以乳酸盐为唯一的碳源并产生碱性反应，在只含有乳酸盐的无机盐培养基（）中不能生长，在加有微量酵母膏的 中该菌分解麦芽糖产酸，利用这些生理生化特性建立本方法中所用的生化鉴定方法。检验程序嗜麦芽寡食单胞菌的检验程序见图。图嗜麦芽寡食单胞菌检验程序示意图检验步骤 样品制备 总体要求参照 进行制样。犛 犖犜 液体样品 水溶性液体样品，可量取 加到 灭菌生理盐水中，如样品少于 仍按 倍稀释法进行。如为则加 灭菌生理盐水，混匀后，制成 稀释液。油性液体，取样品 ，先加 灭菌液体石蜡混匀，再加 灭菌的吐温 ，在 水域中振荡混合 ，加入灭菌的生理盐水 （在 水浴中预温），在 水浴中乳化，制成 的悬液。膏、霜、乳剂半固体状样品 亲水性的样品，称取，加到灭菌的带玻璃珠加有 灭菌生理盐水的锥形瓶中，充分振荡混匀，放 水浴静置 ，用其上清液作为 的稀释液。疏水性的样品，称取，放到灭菌的研钵中，加 灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加 灭菌的吐温 ，研磨待溶解后，加 灭菌生理盐水，在 水浴中充分混合，制成 稀释液。固体样品称取，加到灭菌的生理盐水稀释瓶中，振摇混匀，使其分散混悬后，放 水浴中，后取出，充分振荡混合，再放到 水浴中静置 ，取上清液作为 的稀释液。其他如有均质器，上述水溶性膏、霜、粉剂等，可称 样品加 灭菌生理盐水，均质 ，疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称 样品加 液体培养基，或 样品加 灭菌液体石蜡、灭菌吐温 、灭菌生理盐水，均质 。前增菌取 样品稀释液 加到 增菌培养基中，置培养箱 培养 。选择性增菌移取 增菌液，转种于 内，培养。平板分离用接种环接取一环增菌液，分别划线接种于一个 培养基平板和一个 平板上，置培养箱 分别培养 。嗜麦芽寡食单胞菌在 培养基上形成灰黄色、针尖状菌落，直径。在 培养基上形成蓝色、针尖状菌落，直径。从每个平板上挑取个革兰氏染色镜检为阴性杆菌的可疑菌落，纯化培养后进行生化鉴定。生化鉴定纯化后的可疑菌分别接种于生化鉴定培养基、培养管中，培养 。嗜麦芽寡食单胞菌在、培养基分别为阳性、阴性和阳性，见表。犛 犖犜 表嗜麦芽寡食单胞菌在 犕犅犕、犕犅犕、犕犅犕培养基上的反应特征项目嗜麦芽寡食单胞菌非嗜麦芽寡食单胞菌有细菌生长，培养基由绿色变为蓝色培养基颜色不变，仍为绿色培养基颜色不变，仍为绿色有细菌生长，培养基由绿色变为蓝色有细菌生长，培养基由绿色变为黄色培养基颜色不变，仍为绿色结果报告 符合三联生化特征，则报告为（或 ）样品中检出嗜麦芽寡食单胞菌。不符合三联生化特征，则报告为（或 ）样品中未检出嗜麦芽寡食单胞菌。犛 犖犜 附录犃（规范性附录）培养基和试剂犃 犛 犆 犇 犔 犘液体培养基犃 成分酪蛋白胨 大豆蛋白胨氯化钠磷酸氢二钾 葡萄糖 卵磷脂吐温 蒸馏水 犃 制法将上述各成分加热煮沸至完全溶解，调节 至，分装至适合的容器中，灭菌 。犃 嗜麦芽寡食单胞菌选择性增菌肉汤（犛 犕 犛 犈 犅）犃 成分蛋白胨 牛肉膏氯化钠甲硫氨酸 蒸馏水 犃 制法将上述各成分加热煮沸至完全溶解，调节 至，分装至适合的容器中，灭菌 。犃 犕 狌 犲 犾 犾 犲 狉 犎 犻 狀 狋 狅 狀培养基犃 成分牛肉粉水解酪蛋白 可溶性淀粉 万古霉素 犛 犖犜 氨苄青霉素 琼脂 蒸馏水 犃 制法将上述各成分加热煮沸至完全溶解，调节 至，分装至适合的容器中，灭菌 。犃 嗜麦芽寡食单胞菌选择性分离培养基（犛 犕 犛 犐 犕）犃 成分麦芽糖 蛋白胨万古霉素 伊米配能（）两性霉素 溴麝香草酚蓝溶液 琼脂 蒸馏水 犃 制法将上述各成分 灭菌 ，分装至适合的容器中并冷却到，调节 至。犃 无机盐基础培养基（犕犅犕）犃 成分（）琼脂 蒸馏水 犃 制法将上述各成分加热煮沸至完全溶解，调节 至，分装至适合的容器中，灭菌 。犃 犕犅犕、犕犅犕、犕犅犕犃 在无机盐基础培养基（）中分别加入适量酵母浸膏或甲硫氨酸、乳酸盐、麦芽糖制成犛 犖犜 、。犃 制备：（）：甲硫氨酸乳酸盐；（）：乳酸盐；（）：酵母膏 麦芽糖。分装于灭菌小试管中，进行标示后，高压灭菌，作为鉴定三联培养基。犛 犖犜 书书书犜犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准化妆品中嗜麦芽寡食单胞菌检测方法 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街 号邮政编码：网址 电话：中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数 千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号：定价 元