SN 0501-1995 出口禽肉中拉沙里菌素残留量检验方法.pdf

SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准S N 05 0 1 一 9 5出口 禽肉中拉沙里菌素残留量检验方法M e t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f l a s a l o c i dr e s id u e s i n p o u l t r y m e a t f o r e x p o r t1 9 9 5 一 1 1 一 2 8 发布1 9 9 6 一 0 1 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口 禽肉中 拉 沙里 菌 素残留 量 检 验方法S N0501 一 95M e t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f l a s a l o c i d r e s i d u e s恤 p o u l t r y me a t f o r e x p o r t主匆内容与适用范围本标准规定了出口禽肉中拉沙里菌素残留量检验的抽样和制样及液相色谱测定方法。本标准适用于出口鸡肉中拉沙里菌素残留量的检验。抽样和制样 检验批以不超过 2 5 0 0 件为一检验批。同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。抽样数量 批量，件最低抽样数，件1-2 52 6-1 0 0n巴J工了0111止，上n1 0 1 -2 5 02 5 1 5 0 0 5 0 1-1 0 0 01 0 0 1 2 5 0 02.3 抽样方法 按 2.2 规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品，原始样品总量不少于2 k g，放入清洁容器内，加 封后，标明标记，及时送实验室。2.4 试样制备 从每袋原始祥品中取部分有代表性样品，将可食部分放人高速组织捣碎机中捣碎均匀，充分混匀，用四分法缩分出不少于5 o o g试样，装入洁净容器中，加封后，标明标记。2.5 试样保存 将试样于一1 8 以下冷冻保存。注:在抽样和制样过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。3 测定方法3，方法提要 样品中的拉沙里菌素经用乙睛提取，提取液用正己烷洗涤后，用配有荧光检测器的液相色谱仪测中华人民共和国国家进出口商品检验局1 9 9 5-1 1 一 2 8 批准1 9 9 6-0 1 一 0 1 实施S N 05 01一 9 5定，绘制标准曲线法定量。3.2 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。3.2.1 乙睛:重蒸馏。3-2.2 正己烷:重蒸馏。3.2.3 四氢吠喃:重蒸馏。3.2-4浓氨水。3.2.5 甲醇:重蒸馏。3-2.6 氮气。3.2.7 流动相 A液:取四氢吠喃 1 5 0 mL、甲醇 3 0 m L,浓氨水l O m L、正己烷8 1 0 m L，在分液漏斗中充分混合，静置分层约 1 h，弃去下层。B液:取四氢吠喃 1 5 0 mL、甲醇3 0 mL、正己烷 8 2 0 mL，在量筒中充分混合。取 3 份A液加1 份 B液，在棕色瓶中充分混合，作为流动相。3.2.8 流动相饱和的水:将 1 0 0 m L流动相与 5 0 mL水于 2 5 0 m L分液漏斗中混合，用力振摇 4 0 s，静置分层，移出下层待用。现用现配。3.2.9 拉沙里菌素钠标准品:纯度)9 9%,3.2.1 0 拉沙里菌素标准溶液:准确称取 1 0 0.O m g拉沙里菌素，用少量四氢映喃溶解，并用四氢吠喃稀释，配成浓度为 1.O m g/m L的标准储备液。用流动相分别稀释成2 0 n g/m L,5 0 n g/m L,1 0 0 n g/m L,2 0 0 n g/m L的拉沙里 菌素标准工作液。3.3 仪器和设备3.3.1 液相色谱仪并配有荧光检测器。3.3-2 自动进样器或 5 0(.L微量进样器。3-3-3 全玻璃蒸馏装置。3.3.4 均质器:5 0 0 m L均质杯。3.3.5 离心机。3.3.6 离心管:3 0 m L,5 O m L，具塞，带刻度;2 5 0 m L,3.4 测定步骤3.4.，提取 称取约1 她试样(精确至0.1 g),置于 5 0 0 m L均质杯中，加入 4 0 mL乙睛，均质 2 min，然后全部移人2 5 0 m L离心管中。在离心机上以2 5 0 0 r/mi n 离心2 0 min。离心后，取上清液 2 3 mL于 5 0 mL离心管中，加入2 3 m L正己烷，剧烈振摇2 0 s。再在离心机上以2 0 0 0 r/m i n离心2 0 m i n，记录下层乙睛的体积(B)。吸出上层正己烷弃去，取下层乙睛 2 0 m L,置于 3 0 mL离心管中，于 6 0 水浴中，在氮气流下吹至近干加1.O m L用流动相饱和的水，旋摇 2 0 s。再加入 2.O m L流动相，混合 2 0 s，在离心机上以 2 5 0 0 r/mi n离心2 0 min，上清液供液相色谱测定。3.4.2 测定3.4-2.1 色谱条件 a.色谱柱:硅胶色谱柱(Hy p e r s il 7 9 9 1 6 S I，或相当者)，5 p m,1 0 0 mm X 4.6 m m(i d);两个柱串联;b.流动相:A液一 B液(3.2.7);c.流速:1.5 mL/mi n;d 荧光检测器:激发波长3 1 0 n m，发射波长4 3 0 n m;e进样量:5 0 p L o3.4.2.2 色谱测定S x 0 501 一 95 用流动相平衡至系统稳定，分别取2 0 n g/m L,5 0 n g/m L,l 0 0 n g/m L,2 0 0 n g/m L 浓度的标准工作液5 0 g L，进行色谱测定。以峰面积对应进样浓 度绘制标准曲 线。取样液5 如L 进行色 谱测定。在上述条件下，拉沙里菌素的保留时间约为1.7 min,I5 空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。I6 结果的计算和表述 用色谱数据处理机或按下式计算样品中拉沙里菌素的含量:X=二 X 4(B 乙 2 3)式中:X-试样中拉沙里菌素的含量,n g/g;A 由 标准曲 线查得的样液中拉沙里菌素 浓度，n g/m L;B加正己烷离心之后的乙睛体积，m L;m 试样重量+g=注:计算结果需扣除空白值。测定低限、回收率 测定低限本方法测定 低限为2 0 n g/g,回收率回收率实验数据:拉沙里菌素添加浓度在 2 0 -5 0 n g/g范围内，回收率为 9 1.7%-9 7.5%,附加说明:本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。本标准由中华人民共和国烟台进出口商品检验局负责起草。本标准主要起草人刘桂荣、沈志刚、李立、于俐俐、王洪兵。P r o f e s s i o n a l S t a n d a r d o f t h e P e o p l e s R e p u b l i c o f C h i n a f o r I mp o r t a n d E x p o r t C o mmo d i t y I n s p e c t i o nM e t ho d f o r t h e de t e r m;A t i o n o f l a s a l o c i dS N 05 01一 95r e s i d u e s i n p o u l t r y me a t f o r e x p o r t1 S c o p e a n d f i e l d o f a p p l i c a t i o n T h i s s t a n d a r d s p e c i f i e s t h e m e t h o d s o f s a mp l i n g,s a mp l e p r e p a r a t i o n a n d d e t e r m i n a t i o n b y li q u id c h r o-m a t o g r a p h y o f l a s a l o c id r e s i d u e s i n p o u lt r y me a t f o r e x p o r t.T h i s s t a n d a r d i s a p p l ic a b l e t o t h e d e t e r min a t io n o f l a s a lo c i d r e s i d u e s i n c h i c k e n me a t f o r e x p o rt.2 S a m p l i n g a n d s a mp l e p r e p a r a t i o n2.1 I n s p e c t i o n l o t T h e q u a n t i t y o f a n i n s p e c t i o n l o t s h o u l d n o t b e m o r e t h a n 2 5 0 0 p a c k a g e s.T h e c h a r a c t e r i s t ic s o f t h e c a r g o w i t h in t h e s a m e i n s p e c t io n lo t,s u c h a s p a c k i n g,m a r k,o r i g i n,s p e c if ic a-t i o n,g r a d e e t c.,s h o u ld b e t h e s a me.2.2 Qu a n t it y o f s a mp l e t a k e n N u m b e r o f p a c k a g e s Mi n i mu m n u mb e r o f i n e a c h in s p e c t i o n l o t p a c k a g e s t o b e t a k e n 1-2 5 1 2 6-1 0 0 5 1 0 1-2 5 0 1 0 2 5 1-5 0 0 1 5 5 0 1-1 0 0 0 1 7 1 0 0 1-2 5 0 0 2 02.3 S a m p li n g p r o c e d u r e A n u mb e r o f p a c k a g e s s p e c i f i e d i n 2.2 a r e t a k e n a t r a n d o m a n d o p e n e d o n e b y o n e.F r o m e a c h p a c k-a g e s a t le a s t o n e b a g s h a l l b e t a k e n a s t h e p r ima r y s a mp l e.T h e t o t a l w e ig h t o f a l l p r i m a r y s a mp l e s s h o u l dn o t b e l e s s t h a n 2 k g,wh i c h s h a ll b e p l a c e d i n a c le a n c o n t a in e r,s e a l e d,l a b e l e d a n d s e n t t o l a b o r a t o r y i nt i m e.2.4 P r e p a r a t i o n o f t e s t s a m p l e P a r t o f r e p r e s e n t a t i v e s a mp le i s t a k e n f r o m e a c h b a g o f t h e p r i m a r y s a mp l e a n d t h e e d i b l e p o r t i o n s a r