SNT 2514-2010 进出口食品中噻酰菌胺残留量的测定 液相色谱-质谱质谱法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口食品中噻酰菌胺残留量的测定液相色谱 质谱 质谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犻 犪 犱 犻 狀 犻 犾 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准附录、附录为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：王岚、谢建军、陈捷、徐娟、吴映璇、叶弘毅、陈永红。犛 犖犜 进出口食品中噻酰菌胺残留量的测定液相色谱 质谱 质谱法范围本标准规定了进出口食品中噻酰菌胺残留量检测的液相色谱 质谱质谱检测方法。本标准适用于生菜、胡萝卜、菜心、大米、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱、茶叶、蜂蜜中噻酰菌胺残留量的测定和确证。方法提要样品用乙酸乙酯提取，凝胶色谱（）和固相萃取小柱净化，液相色谱 质谱质谱测定，外标法定量。试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水。环己烷。乙酸乙酯。乙腈：色谱纯。甲醇：色谱纯。无水硫酸钠：灼烧，在干燥器内冷却至室温，储于密封瓶中备用。氯化钠。噻酰菌胺（）标准品：纯度大于等于 ，分子式：，编号：。噻酰菌胺标准储备液：准确称取适量噻酰菌胺，用乙腈配制成浓度为 的标准储备液。噻酰菌胺标准中间溶液：准确吸取适量标准储备液，用乙腈稀释至浓度为 的标准中间溶液。噻酰菌胺标准工作液：使用前根据需要将标准中间溶液用各种样本的空白基质稀释成适当浓度的标准工作液。氨基固相萃取柱：，和 ，或相当者。临用前用乙腈将氨基柱（）活化次，每次。在氨基柱（）上填装 无水硫酸钠，临用前用乙酸乙酯活化次，每次。固相苯取柱（大孔径硅藻土填料）：，或相当者。微孔滤膜：和 ，有机相。仪器和设备 液相色谱 质谱质谱仪：配有电喷雾离子源。凝胶渗透色谱仪。天平：感量 和 。高速均质机。高速低温冷冻离心机：。犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m 旋转蒸发仪。氮气吹干仪。旋涡振荡器。聚四氟乙烯塑料离心管：，具塞。玻璃刻度试管，和 ，具塞。鸡心瓶：。样品制备与保存 样品制备 生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄取有代表性样品约 ，将其可食用部分切碎后，用捣碎机加工成浆状。混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。大米、板栗、茶叶取有代表性样品约 ，用粉碎机粉碎并通过孔径 圆孔筛。混匀，装入洁净容器，密闭，标明标记。牛肉、鸡肉、羊肝、罗非鱼取有代表性样品约 ，剔骨去皮，用绞肉机绞碎，混匀，装入洁净容器，密闭，标明标记。番茄酱取有代表性样品约 ，混匀，装入洁净容器，密闭，标明标记。蜂蜜取代表性样品约 ，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀；对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过 的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时必须注意防止水分挥发。装入洁净容器，密封，标明标记。试样保存茶叶、蜂蜜、粮谷及坚果类等试样于保存；水果蔬菜类和动物源性食品等试样于 以下冷冻保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取 生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱称取（精确至 ）试样于 离心管中，加 乙酸乙酯，匀质提取 ，另取一个 离心管，加入 乙酸乙酯洗匀质器刀头，合并均质液。加入 无水硫酸钠，振荡 。提取液 离心 ，吸取 上清液，冰箱以下放置，过 有机滤膜，待凝胶渗透色谱净化。大米称取（精确至 ）试样于 离心管中，加入 水，浸泡 ，加 乙酸乙酯，匀质提取 ，另取一个 离心管，加入 乙酸乙酯洗匀质器刀头，合并均质液。加入 无水硫酸钠，振荡 。将样本提取液 离心 ，吸取 上清液，冰箱以下放置，再过 有机滤膜，待凝胶渗透色谱净化。茶叶称取（精确至 ）试样于 离心管中，加入 水，浸泡 ，再加入无水硫酸钠，涡旋振荡 。加入 乙酸乙酯，涡旋振荡 ，将样本提取液 离心 ，吸取上清液。再加入 乙酸乙酯，涡旋振荡 ，离心 ，重复提取一次，合并二次的上清液，吹氮浓缩至 左右，定容至 ，过 有机滤膜，待凝胶渗透犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m色谱净化。蜂蜜称取（精确至 ）试样于 离心管中，加 水，氯化钠，振荡混匀，过 固相萃取柱（）。上样后，将样本液保持 ，用 乙酸乙酯分多次淋洗，流速控制为 ，收集滤液于 鸡心瓶中，在 下减压浓缩至约 ，待净化。净化 生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱、大米、茶叶将 、的所得溶液 ，过凝胶渗透色谱仪，收集 的流出液，操作浓缩装置，在 下浓缩至近干，乙腈定容，作为初净化液。将初净化液过氨基柱（，）后，用乙腈洗涤收集瓶次，每次，洗液同样过柱，流速控制为 ，收集全部过柱溶液于吹氮管中，在 下吹氮浓缩至近干，用甲醇定容至 ，再加入 去离子水，涡漩振荡均匀，过 有机滤膜，待测。蜂蜜将浓缩液过氨基柱（，），乙酸乙酯分三次洗脱，流速控制为 ，收集洗脱液于吹氮管中，在 下吹氮浓缩干，用甲醇定容至 ，再加入 去离子水，涡漩振荡均匀，过 有机滤膜，待测。仪器测定条件 凝胶色谱净化条件 凝胶净化柱：，（内径）；。浓缩时温度：。流动相：环己烷 乙酸乙酯（，体积比）。定容试剂：乙腈。流速：。进样量：。犔 犆 犕 犛犕 犛质谱条件 液相色谱参考条件）色谱柱：柱，（内径），或相当者。）柱温：。）流动相：甲醇 水（，体积比）。）流速：。）进样量：。质谱测定参考条件参见附录。液相 质谱质谱法测定根据样液中噻酰菌胺含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中噻酰菌胺响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，噻酰菌胺的保留时间约为 。被测组分选择个母离子，个以上子离子，在相同实验条件下，如果样品中待检测物质与标准溶液中对应的保留时间偏差在 之内；且样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表规定的范围，被确证的样品可判定为噻酰菌胺阳性检出。标准品的质谱图参见附录中图 、图 。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m 空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。结果计算和表述用色谱数据处理机或按式（）计算试样中噻酰菌胺的残留含量，计算结果需扣除空白值。犡犃犮犞犃犿（）式中：犡 样液中噻酰菌胺含量，单位为纳克每克（）；犃 样液中噻酰菌胺的色谱峰面积；犮 标准工作溶液中噻酰菌胺浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 最终样液的定容体积，单位为毫升（）；犃 标准工作溶液中噻酰菌胺的色谱峰面积；犿 最终样液所代表试样质量，单位为克（）。注：计算结果应扣除空白值。计算结果应表示到小数点后两位。测定低限、回收率 测定低限本方法的测定低限为 。回收率噻酰菌胺添加浓度及回收率的实验数据见表。表噻酰菌胺的回收率样品名称添加浓度（）回收率葡萄 生菜 菜心 柑橘 板栗 胡萝卜 犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m表（续）样品名称添加浓度（）回收率番茄酱 鸡肉 罗非鱼 牛肉 羊肝 大米 茶叶 蜂蜜 犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m附录犃（资料性附录）参考质谱条件）参考质谱条件：）离子源：电喷雾离子源（）；）扫描方式：负离子扫描；）检测方式：多反应选择离子检测（）；）电喷雾电压（）：；）雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气及其他合适气体；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求；）辅助气温度（）：；）离子源温度：；）定性离子对、定量离子对、采集时间、去簇电压及碰撞能量见表 。表 犃 噻酰菌胺监测离子对、定量离子对、去簇电压及碰撞能量被测物名称监测离子对（）定量离子对（）驻留时间 去簇电压碰撞能量噻酰菌胺 注：对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。）非商业性声明：附录所列参考质谱条件是在 型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m附录犅（资料性附录）噻酰菌胺标准品犔 犆 犕 犛犕 犛质谱图图 犅 噻酰菌胺标准品子离子全扫描质谱图图 犅 噻酰菌胺标准品多反应监测（犕犚犕）色谱图（犵犔）犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犃 狀 狀 犲 狓犃，犪 狀 狀 犲 狓犅狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱犻 狊狌 狀 犱 犲 狉狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲 犱狅 犳狋 犺 犲犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀犃 犱 犿 犻 狀 犻 狊 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲狆 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犌 狌 犪 狀 犵 犱 狅 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犲犿 犪 犻 狀犱 狉 犪 犳 狋 犲 狉 狊狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲犠 犪 狀 犵犔 犪 狀，犡 犻 犲犑 犻 犪 狀 犼 狌 狀，犡 狌犑 狌 犪 狀，犠狌犢 犻 狀 犵 狓 狌 犪 狀，犢 犲犎 狅 狀 犵 狔 犻 犪 狀 犱犆 犺 犲 狀犢 狅 狀 犵 犺 狅 狀 犵 犛 犖犜 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犻 犪 犱 犻 狀 犻 犾 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊 狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犮 狅 狀 犳 犻 狉 犿 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犻 犪 犱 犻 狀 犻 犾 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊犫 狔犔 犆 犕 犛犕 犛狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犮 狅 狀 犳 犻 狉 犿 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犻 犪 犱 犻 狀 犻 犾 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犾 犲 狋 狋 狌 犮 犲，犮 犪 狉 狉 狅 狋，犮 犪 犫 犫 犪 犵 犲，狉 犻 犮 犲，狅 狉 犪 狀 犵 犲，犵 狉 犪 狆 犲，犮 犺 犲 狊 狋 狀 狌 狋，犫 犲 犲 犳，狊 犺 犲 犲 狆 犾 犻 狏 犲 狉，犮 犺 犻 犮 犽 犲 狀，狋 犻 犾 犪 狆 犻 犪，犽 犲 狋 犮 犺 狌 狆，狋 犲 犪犪 狀 犱犺 狅 狀 犲 狔 犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲犜 犺 犲狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀 狋 犲 狊 狋 狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊 犪 狉 犲犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犲 犱狑 犻 狋 犺犲 狋 犺