SBT 10387-2004 畜禽肉和水产品中呋喃唑酮的测定.pdf

I C S 6 7.1 2 0X 0 4备案号:1 4 1 6 8-2 0 0 4中华人 民共和 国国内贸易行业标准S B/T 1 0 3 8 7-2 0 0 4畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的测定De t e r mi n a t i o n o f f u r a z o l i d o n e i n me a t o f l i v e s t o c kp o u l t r y a n d a q u a t i c p r o d u c t s2 0 0 4-0 8-0 4 发布2 0 0 4-0 9-0 1 实 施中华人民共和国商务部发 布S B/T 1 0 3 8 7-2 0 0 4月 U青 本标准由中华人民共和国商务部提出。本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾病预防控制中心参加起草 本标准主要起草人:周深、金社胜、杨祖英、宋书锋、韩会新、张新玲、刘虎成、王贵际。本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释。S B/T 1 0 3 8 7-2 0 0 4畜禽 肉和水产品中肤喃哇酮的测定 1 范围 本标准规定了畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的测定方法。本标准适用于畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的检验。2原理 样品中吠喃噢酮用二氯甲烷提取，经无水硫酸钠柱净化，用正己烷去脂肪后，。4 5 p m微孔滤膜过滤，滤液进行 HP L C分析。3 试荆与试液 以下所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯试剂，水为重蒸水。3.1 乙睛:优级纯，作流动相用。3.2 乙腊:色谱纯。3.3 乙睛水溶液:乙腊+水(8 0+2 0,V/V),3.4 正己烷。3.5 甲醇:色谱纯。3.6 无水硫酸钠:经 6 5 0 灼烧 4h 后，贮于密闭容器中备用。3.7 无水硫酸钠柱:6 c mX1.8 c m，内装 5 c m高的无水硫酸钠(如果无合适的玻璃柱，可以用 1 0 mL注射器代替)3.8 二氯甲烷。3.9 磷酸。3.1 0 吠喃哩酮标准品:纯度 9 9.7%03.1 1 吠喃哇酮标准储备液:称取 1 0.0 m g峡喃哇酮，用乙睛水溶液(3.3)溶解并稀释定容至5 0 mL棕色容量瓶中，保存于冰箱中。该液 1.0 mL相当于 2 0 0 fa g吠喃哇酮。3.1 2 吹喃哇酮标准工作液系列:精确吸取吠喃噢酮标准储备液 2.0 mL于5 0 mL棕色容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即 得8.0 p g/m L 的溶液，然 后精确吸 取此液。.0 5,0.1 0,0.2 0,0.5 0,1.0,2.0 m L，分别放在1 0.0 m L 棕色容量瓶内，分别加水至刻度，摇匀，即得每毫升含0.0 4,0.0 8,0.1 6,0.4 0,0.8 0,1.6 0 p g的标准系列溶液。4 仪器和设备4.1 高效液相色谱仪:附紫外检测器。4.2 超声波清洗器。4.3 旋涡混匀器。4.4离心机。4.5 旋转蒸发仪。4.6 微量进样器:2 5 p L,5测定步骤51 提取与净化 取 2 0 0 g试样纹碎，称取混匀的绞碎的试样1 0 g(精确至 0.0 1 g)，于 1 0 0 mL具塞锥形瓶中，加 1S B/T 1 0 3 8 7-2 0 0 42 5 mL=氯甲烷，超声提取 5 mi n,提取液通过无水硫酸钠柱滤人 1 0 0 mL蒸发瓶中，继用 2 5 ml二氯甲烷重复提取一次，均通过无水硫酸钠柱滤人同一蒸发瓶中，用二氯甲烷 1 5 mL淋洗无水硫酸钠柱。淋洗液合并于同 一蒸发瓶，滤液于 旋转 蒸发仪上蒸发 至干(水浴温度为3 0 0C-3 5 0C).然后准确加人 1.0 m L乙睛水溶液和1.0 ml正己烷于旋涡混匀器上混匀 2 min，转入 5 ml离心管中，3 0 0 0 r/mi n 离心2 min后(鳗鱼需离心 1 0 mi n)，用吸管移去上层正己烷层，再向离心管中加人1 mL 正己烷，混匀2 mi n，离心，用吸管移去上层正己烷层，下层清液通过。.4 5 p m微孔滤膜过滤，滤液供 HP L C分析用。5.2色谱测定5.2.1 液相色谱参考条件 a)色谱柱:Hy p e r s i l O D S 2 C 1 8,2 5 0 mm X 4.6 m m,粒径 5 p m;b)流动相:乙睛+水(4 0+6 0)，每1 0 0 0 m L加 1.0 mL磷酸;c)流速:1.0 mL/mi n;d)检测波长:3 6 5 n m;e)柱温:室温。5.2.2 肤喃哇酮标准曲线的制备 依照上述色谱条件，分别进标准工作液各个点。每个标准液进 2 0 p L,测定其峰面积，然后以标准液浓度对峰面积作校准曲线，求出回归方程及相关系数。5.2.3 样品测定 在上述色谱条件下，准确吸取 2 0 p L试样溶液，进行 HP L C分析。结果3.1 计算 将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式(1)计算供试样品中吠喃哇酮的含量。c X V X 1 0 0 0m X 1 0 0 0(1)式中:X 样品中含有吠喃哇酮的含量，单位为毫克每千克(m g/k g);c 被测液中相当于标准曲线的吠喃哇酮，单位为微克每毫升(p g/mL);V 被测液的体积，单位为毫升(mL);r n 样品质量，单位为克(9)。2 检 出限 本方法的检测限为。.0 1 p g/mL，当取样量为1 0 g时，最低检测量为 1.0 u g/k g允许差同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的 1 5%0