SBT 10389-2004 肉与肉制品中山梨酸的测定.pdf

I CS 6 7.1 2 0X 0 4备案号:1 4 1 7 0-2 0 0 4S8中华 人 民共和 国 国 内贸 易 行 业标 准S B/T 1 0 3 8 9-2 0 0 4肉与肉制品中山梨酸的测定De t e r mi n a t i o n o f s o r b i c a c i d i n me a t a n d me a t p r o d u c t s2 0 0 4-0 8-0 4发布2 0 0 4-0 9-0 1 实施中华人民共和国商务部发 布S B/T 1 0 3 8 9-2 0 0 4o li舌 本标准由中华人民共和国商务部提出。本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾病预防控制中心参加起草 本标准主要起草人:金社胜、杨祖英、宋书锋、韩会新、张新玲、刘虎成、王贵际 本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释。S B/T 1 0 3 8 9-2 0 0 4肉与 肉制品中山梨酸的测定范围本标准规定了肉与肉制品中山梨酸的测定方法本标准适用于肉与肉制品中山梨酸的检验。2原理样 品中山梨 酸经提取，用中性氧化铝净化后，进行 高效 液相色谱仪测定。试剂和材料 以下所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯试剂，水为重蒸水。3.1 甲醇:优级纯。3.2乙酸按。3.3 中性氧化铝:层析用，(1 0 0-2 0 0)目。3.4 0.0 2 m o l/L乙酸钱溶液:称取 1.5 4 g乙酸馁，加水溶解并稀释至 1 L o3.5 山梨酸:9 9(国家标准物质研究中心)。3.6 山梨酸标准储备液:准确称取 2 5.0 m g山梨酸标准品，加少量乙醇溶解后，用水稀释并定容至2 5.0 mL，摇匀。此溶液每毫升含 1.0 m g山梨酸。贮于冰箱中，有效期 1 5 天。3.7 山梨酸标准中间溶液:吸取 5.0 mL山梨酸标准储备液于 1 0 0 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，并摇匀。此溶液每毫升含 5 0 r g山梨酸。贮于冰箱中，有效期7天。3.8 山梨酸标准系列溶液:分别吸取 1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL山梨酸标准中间溶液于 1 0 ml容量瓶中，各加水至刻度，摇匀。即得每毫升含5.0,1 0.0,1 5.0,2 0.0,2 5。!1 g山梨酸的标准系列溶液。4仪器和设备:.;高效液相色谱仪:附紫外检测器。超声清洗器。旋涡混匀器。离心机旋转蒸发仪。微孔 滤膜过滤器。4.34445465测定步骤5.1 试样处理 取 2 0 0 g 试样绞碎，称取约 1.0 0 g(精确至。.0 1 g)试样，置于 5 0 ml塑料试管中，加 5 m L水，于旋涡混匀器混匀 l m i n，超声提取 1 5 m i n,然后以4 0 0 0 r/m i n离心2 0 m i n e 柱层析:用一只 1 0 m工注射器，底部填少量脱脂棉，内装 3 c m高的中性氧化铝，先用水润湿中性氧化铝柱，待水面接近柱顶时，加人样品提取液，让其流下，待样品液液面接近柱顶时，用流动相洗脱，收集洗脱液至 2 5 mL容量瓶中，至刻度时，停止洗脱，摇匀，溶液通过微孔滤膜过滤，滤液进行 H P L C分析5.2色谱测定5.2.1 液相色谱参考条件 a)色谱柱:Hy p e r s i l O D S 2,2 5 0 mmX4.6 m m,粒径 5 u m;7S B/T 1 0 3 8 9-2 0 0 4 b)流动相:0.0 2 m o l/L乙酸钱溶液+甲醇=1 0 0 V+9 V;c)流速:1.0 mI./mi n;d)检测波长:2 3 0 n m;e)柱温:室温。5.2.2 山梨酸标准曲线的制备 在上述色谱条件下进山梨酸标准系列溶液各 2 0 p L，以山梨酸标准溶液浓度对应的峰面积作标准曲线5.2.3 样 品测定 在上述色谱条件下，准确吸取2 0 I L试样溶液，进行 HP L C分析。6 结果6.1 计 算 将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式(1)计算供试样品中山梨酸含量。x V x 1 0 0 0m x 1 0 0 0(1)式 中:X-V刀2 样品中山梨酸的含量，单位为毫克每千克(mg/k g);被测液相当于标准曲线的山梨酸的浓度，单位为微克每毫升(p g/mL);被测液的总体积，单位为毫升(ML);样品质量，单位为克(9)。6.2 检出限 本方法检出限为2.01,刁ml，当取样量为 1.0 0 g 时，最低检测量为 2.0 m g/k g.允许差同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的 1 5%e