NYT 536-2017 鸡伤寒和鸡白痢诊断技术.pdf

NY/T536-20173.1.1采集病料可采集被检鸡的肝、脾、肺、卵巢等脏器，无菌取每种组织5g10g,研碎后进行病原分离培养。3.1.2分离培养3.1.2.1培养基增菌培养基：亚硒酸盐煌绿增菌培养基、四硫磺酸钠煌绿增菌培养基。鉴别培养基：SS琼脂和麦康凯琼脂。以上各培养基配制方法见附录A。3.1.2.2操作将研碎的病料分别接种亚硒酸盐煌绿增菌培养基或四硫磺酸钠煌绿增菌培养基和SS琼脂平皿或麦康凯琼脂平皿，37培养24h48h,在SS琼脂或麦康凯平皿上若出现细小无色透明或半透明、圆形的光滑菌落，判为可疑菌落。若在鉴别培养基配无落十变时，应从增菌培养基中取菌液在鉴别培化试哈和、3.1.3病原鉴定3.1.3.1.1生化反应试三糖铁琼脂和半固琼3.1.3.1.2操作m将可疑菌落穿刺接种三糖铁琼脂斜面，并在斜面上划线，同时接种半固体培养基，37培养24h后观察。3.1.3.1.3结果判是若无运动性，并且在三糖铁琼脂上出现阳性反应时，则进一步做血清学鉴定；动性，说明不量鸡沙门菌或雏沙门菌感染。三糖铁琼脂典型阳性反应为斜面产碱、变红，底层产酸、变黄；部分菌株斜面和底层均产酸、变黄。半固体琼脂阳性反应为穿刺线是毛制状3.1.3.2血清型鉴忘m3.1.3.2.1沙门菌属诊断血清沙门菌A-R多价C心血清、O9因子血清、O12因子血清，Ha因子血清、任/d因子血清、H-g.m因子血清和H-gp因民3.1.3.2.2操作对初步判为沙门菌的培养物做血清型鉴定。取可疑培养物接种三糖铁琼脂斜面，37培养1824h,先用A-F多价O血清与培养物进行平板凝集试验，若呈阳性反应，再分别用O9、O12、H-a、H-d、H-g.m和H-g.p因子血清做平板凝集试验，具体操作如下：用接种环取两环因子血清于洁净玻璃板上，然后再用接种环取少量被检菌苔与血清混匀，轻轻摇动玻璃板，于1mi内呈明显凝集反应者为阳性，不出现凝集反应者为阴性。试验同时设生理盐水对照，应无凝集反应。3.1.3.2.3结果判定如果培养物与O9、O12因子血清均呈阳性反应，而与H-a、H-d、H-g.m和H-g.p因子血清均呈阴性反应，则鉴定为鸡沙门菌或雏沙门菌。3.1.3.3鸡沙门菌和雏沙门菌初步鉴别生化试验3.1.3.3.1生化反应试剂鸟氨酸脱羧酶试验小管、卫茅醇试验小管和葡萄糖（产气）小管。3.1.3.3.2操作2